KinExA Technology-Sapidyne

(poznámka: v následujícím popisu je formátem testu imobilizace ligandu k měření volného receptoru ve vzorku. Naopak receptor může být imobilizován pro měření volného ligandu ve vzorku, v závislosti na použitých materiálech.)
měření volného receptoru se provádí krátkým vystavením směsi vzorku pevné fázi, na které je ligand imobilizován. Doba expozice je kritická, protože udržování doby interakce vzorku s pevnou fází poměrně krátké vede k situaci, kdy jediná významná vazba na pevnou fázi je z volného receptoru. Kinetický vylučovací test je na rozdíl od konkurenčního testu, ve kterém je rovnovážný roztok v kontaktu s pevnou fází dostatečně dlouho na to, aby ligand v pevné fázi mohl soutěžit o receptor roztoku.
výhodou přípravku KinExA je, že signál ze zachyceného receptoru představuje pouze koncentraci, která je v roztoku volná. Znalost rovnovážné koncentrace receptoru umožňuje stanovení vazebných konstant, jak je popsáno na reverzibilní vazebné stránce.
komerčně dostupné nástroje pro provádění testů KinExA (Sapidynova KinExA 4000, 3200 A 3100) používají malý sloupec částic, kterými prochází vzorek a další činidla. Doba kontaktu jakékoli části vzorku s pevnou fází je pak doba průchodu kolonou a může být řízena zvoleným průtokem (od přibližně 50 milisekund do přibližně sekundy).

systémy s pojivy rozsahu nM nebo pevnějšími budou v režimu kinetic exclusion assay (režim KinExA). Slabší pojiva mohou být stále měřena, ale mohou vyžadovat zvláštní péči, aby se zabránilo narušení vzorku z měření. KinExA je zvláště vhodná pro měření afinity a kinetiky a funguje také jako vylepšená imunotest platforma. Podrobnější vysvětlení měření KinExA je uvedeno níže.

Napsat komentář

Vaše e-mailová adresa nebude zveřejněna.