modifikovaná Knottova technika a přímý krevní nátěr

modifikovaná Knottova metoda se používá pro koncentraci a identifikaci mikrofilárií, konkrétně Dirofilaria immitis Dirofilaria. Musí být odlišena od nepatogenní mikrofilarie Dipetalonema reconditum (zkráceně“Dipet“).

přímý krevní nátěr lze provést současně. Jedná se o rychlý, nekoncentrační test na mikrofilarii. Dirofilaria a Dipet se liší podle vzoru motility.

tyto testy by měly být prováděny vždy, když pacient testuje antigen dirofilárií pozitivní, nebo existuje nějaký důvod k podezření, že pes má nebo měl v minulosti onemocnění dirofilárií. Přítomnost Dirofilarie ovlivní průběh a / nebo výběr léčby.

Knottův test lze provést bez provedení přímého nátěru, ale nikdy neprovádějte přímý nátěr bez provedení Knottova testu. Knottův test je citlivější, protože koncentruje mikrofilarii, takže je méně pravděpodobné, že budou při mikroskopickém vyšetření vynechány.

postup pro přímý nátěr:

jednoduché. Umístěte kapku krve, nejlépe z EDTA trubice nebo heparinizované stříkačky, do středu sklíčka. Drop krycí skluzu přes vrchol a zkoumat pod mikroskopem na 10x moc. Dirofilaria bude mít stacionární, svíjející se pohyb; Dipetalonema bude vykazovat rychlejší, směrový pohyb a často bude střílet přímo z pole.

postup pro modifikovanou Knottovu techniku:

ujistěte se, že máte ochranné rukavice. Pomocí 15 ml odstředivkové zkumavky přidejte přibližně 10 ml 2% formalinu (to lze zakoupit komerčně) do 1 ml antikoagulované krve. Položte palec přes horní část uzavřené zkumavky a několikrát otočte, aby se důkladně promíchal. Centrifugujte po dobu 5 minut při 1000 až 1500 ot / min.

po odstřeďování byste měli být schopni vizualizovat bělavou zátku ve spodní části zkumavky. Supernatant zlikvidujte ve správné nádobě s nebezpečným odpadem.

pomocí dlouhé skleněné nebo plastové pipety přidejte kapku nové methylenové modři

pipetou promíchejte skvrnu se sedimentem

přidejte kapku této směsi do středu sklíčka. Položte krycí skluz na vrchol. Zkoumat na mikroskopu pod 10x výkon.

na rozdíl od přímého nátěru se mikrofilarie zobrazí jako stacionární. Dirofilaria musí být odlišena od Dipetalonema na základě velikosti a tvaru. Použijte následující tabulku, která vám pomůže rozlišit:

(Cornell University)

další skvělý test na mikrofilarii

naplňte zkumavku mikrohematokritu a odstřeďujte se, jako byste dělali pcv.

položte zkumavku na sklíčko a položte ji na mikroskop. Zaměřte se na buffy coat na 10x power-pokud je pes dirofilárií pozitivní a má cirkulující mikrofilarii, můžete vidět mikrofilarii, jak se kroutí v buffy coat!