validace předpokládaných testů na nehumánní krev pomocí činidel Kastle Meyer a Hemastix

Kastle Meyer a činidla Hemastix jsou předpokládané testy běžně používané ve forenzních případech pro detekci krve a jejich vhodnost byla přezkoumána v mnoha publikacích. Dosavadní studie se však zaměřily na validaci těchto testů pouze na lidské krvi a žádná publikovaná práce se nezabývala citlivostí, specificitou a účinkem na analýzu DNA při použití těchto činidel k předpokládanému testování zvířecí krve. Cílem této studie bylo ověřit obě činidla pro použití se zvířecí krví a porovnat jejich výkon, aby bylo možné vybrat nejlepší test na základě okolností při vyšetřování trestné činnosti volně žijících živočichů.

citlivost, specificita, stabilita a robustnost metod byly hodnoceny experimenty s ředěním zvířecí krve (od 1: 4 do 1: 65536) pomocí přímých a nepřímých (rub) testů, potenciálních interferujících látek, krevních zdrojů různých druhů a stárnoucí krve. Byly také zkoumány účinky obou činidel na následnou analýzu DNA.

během přímých testů Kastle Meyer vykazoval vyšší citlivost a detekoval krev až do zředění 1: 16,384, o jeden řád nižší než Hemastix. Během testu rub však Hemastix vykazoval vyšší citlivost a detekoval krev až do ředění 1: 64 na porézních materiálech, zatímco Kastle Meyer byl pozitivní pouze do ředění 1: 16. Navíc, při použití stejného výtěru pro předpokládané testování a extrakci DNA, testování Hemastixu umožnilo amplifikaci dostatečného množství DNA pro identifikaci druhů na hranici citlivosti na porézní materiály (1: 64), zatímco Kastle Meyer inhiboval většinu amplifikace DNA při méně citlivé hranici ředění 1:16. Na druhé straně Hemastix vykazoval mnohem nižší specificitu, což vedlo k falešně pozitivním výsledkům při vystavení rajčatům, bramborám, rzi, ptačí kyselině močové, bělidlu a hnilobě dřezu, zatímco Kastle Meyer vyvolal pouze slabou pozitivní reakci z brambor. Oba testy provedly stejně dobře detekci čerstvé krve různých druhů zvířat. Test stability poskytl srovnatelné výsledky mezi testy s výjimkou starých rybích krevních skvrn, kde test Kastle Meyer provedl špatně.

díky snadnému použití, vyšší citlivosti a nedostatečné interferenci s následnou analýzou DNA a navzdory snížené specificitě ve srovnání s Kastle Meyer je metoda Hemastix vhodnější pro použití při vyšetřování trestných činů volně žijících živočichů. Pozitivní výsledky by byly vždy potvrzeny analýzou DNA a nízká interference činidla umožní použití jediného výtěru pro předpokládané testování a odběr vzorků DNA.

Napsat komentář

Vaše e-mailová adresa nebude zveřejněna.