antimikrobielle, Antioksidante og sårhelende egenskaber hos Kigelia africana (Lam.) Beneth. og Strophanthus hispidus DC.

abstrakt

mikrobielle infektioner af forskellige typer sår er en udfordring til behandling af sår og sårheling. Undersøgelsen var at undersøge antimikrobielle og antioksidante egenskaber af methanolblad og stammebarkekstrakter af Kigelia africana og methanolblad og rodekstrakter af Strophanthus hispidus og også at bestemme sårhelende egenskaber af ekstrakterne. Methanolekstrakternes antimikrobielle aktiviteter blev bestemt mod to Gram-positive og to Gram-negative bakterier og en svamp ved anvendelse af agardiffusions-og mikrofortyndingsmetoder. Antioksidantaktiviteten blev bestemt ved anvendelse af 1,1-diphenyl-2-picrylhydrasyl (DPPH)–metoden. Ekstraktenes indflydelse på sårlukningshastigheden blev undersøgt ved hjælp af udskæring sårmodel og histopatologisk undersøgelse af behandlede og ubehandlede sårvæv udført. Mikrofonerne for bladekstrakt af K. africana mod testorganismer var 2,5 – 7,5 mg/mL, og stammebarkekstrakt var 2,25–7.5 mg / mL. Bladekstraktet af S. hispidus havde et MIC-interval på 2,5 – 7,5 mg/mL og 2,5–10 mg/mL for rodekstrakt. IC50 for ekstrakter af blade og stængelbark af K. africana var henholdsvis 56,9 og 13,7 liter/mL, og blade og rod af S. hispidus var henholdsvis 49,8 og 45,1 liter/mL. K. africana-ekstrakter (7,5% vægt/vægt) viste signifikant () sårkontraktion på dag 7 med 72% af sårlukningen, mens signifikante () sårkontraktioner blev observeret på dag 11 for stammebark af K. africana, blad-og rodekstrakter af S. hispidus. Sårvæv behandlet med ekstrakterne viste forbedret kollagenation, genepiteliasisering og hurtig granulationsdannelse sammenlignet med ubehandlede sårvæv. Ekstrakterne viste sig at indeholde alkaloider, saponiner, tanniner, flavonoider, kulhydrater og sapogenetiske glycosider. HPLC-fingerudskrivningen af ekstrakterne blev udviklet. Blad, stængelbark og rodekstrakter af K. africana og S. hispidus udviste antimikrobielle, antioksidante og forbedrede sårhelende egenskaber, og disse kan retfærdiggøre plantens medicinske anvendelse til behandling af mikrobielle infektioner og sår.

1. Introduktion

sår bruges mest, når der henvises til skade på huden eller underliggende væv eller organer ved et slag, snit, missil eller stikk. Sår omfatter også skader på huden forårsaget af kemikalier, kulde, friktion, varme, tryk og stråler og manifestation i huden af Indre forhold, for eksempel tryksår og sår . Sår har en enorm indflydelse på den helbredende sundhedsøkonomi. Kroniske sår udgør en stor sundhedsbyrde og dræner sundhedsressourcerne i verden, herunder Ghana .

et stort problem med sår er den høje risiko for infektion; derfor, hvis et middel, der er aktivt mod disse mikroorganismer, der forårsager infektionen, bruges i helingsprocessen, vil det derefter hjælpe med at reducere risikoen for infektion, og den samlede tid til sårheling kan reduceres markant. For eksempel er det meget let for bakterier at komme ind gennem den ødelagte hud og trænge ind i resten af kroppen. Bakterier koloniserer sår inden for 48 timer efter skade, og bakterier såsom Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa og Streptococcus spp kan forårsage infektion, og dette kan forlænge den inflammatoriske fase af sårheling . Derfor kan egnede antimikrobielle midler anvendes enten topisk eller systematisk for at forhindre infektion af sår og fremskynde sårhelingsprocessen.

inflammationsprocessen fører normalt til frigivelse af biologisk aktive mediatorer for at tiltrække neutrofiler, leukocytter og monocytter til sårområdet, og disse angriber fremmede affald og mikroorganismer gennem fagocytose. Dette fører derefter til produktion af iltfrie radikaler, såsom brintoverilte, superilteanion og hydroksileanion, og overskud af disse stoffer forårsager vævsskade hos mennesker eller dyr, hvis de overvælder værtens naturlige antioksidanter, såsom katalase, superilte dismutase og glutathionperoksidase. Derfor forhindrer antioksidanter aktiviteten af de frie radikaler og forhindrer derved skader på celler og væv, hvilket giver beskyttelse til mennesker og dyr, og forbedrer også helingen af inficerede og ikke-inficerede sår .

Kigelia africana (Lam.) Beneth. tilhører familien Bignoniaceae. Det er kendt som” Nufutene ” i det lokale Asante i Ghana. Det er udbredt i hele Afrika, herunder Ghana, Sierra Leone, Gambia, Sudan og Nigeria, og det findes i våd savanne og nær flodlegemer, hvor det forekommer i overflod . Det anvendes til behandling af hudsygdomme, herunder svampeinfektioner, bylder, psoriasis og eksem, spedalskhed, syfilis og kræft. Rødderne, træet og bladene har vist sig at indeholde kigelinon, vernolsyre, kigelin, iridoider, luteolin og 6-hydroksyluteolin . Iridoiderne har antibakteriel virkning .

Strophanthus hispidus DC. tilhører familien Apocynaceae og det kaldes” Maatva ” i den lokale Asante-to. Det findes over hele Afrika og savanneskove i Ghana, Senegal, Sudan, Congo DR, Uganda og Tansania. Det har mange medicinske anvendelser, såsom modgift mod giften fra den sorthalsede kobra, til behandling af syfilisår, knoglet syfilis og guinea-orm sår og sår . Planten indeholder et amorft glycosid (pseudo-strophanthin) med tung olie, to alkaloider (trigonellin og cholin), harpiks, mucilage og et rhamnose sukker . Formålet med undersøgelsen er at undersøge de antimikrobielle, antioksidante og sårhelende egenskaber af methanolblad og stammebarkekstrakter af K. africana og methanolblad og rodekstrakter af S. hispidus.

2. Materialer og metoder

2.1. Plantematerialer og kemikalier

Stammebark og blade af K. africana og blade og rødder af S. hispidus blev indsamlet i maj 2011 fra Krofra i Ashanti-distriktet og godkendt af Dr. A. Asase fra Ghana Herbarium, Institut for botanik, University of Ghana. Voucher prøver af planterne er blevet deponeret på Ghana Herbarium, University of Ghana, Ghana. De forskellige plantedele blev tørret ved stuetemperatur (28-30 liter C) i to uger. De tørrede plantedele blev derefter formalet til pulveriserede materialer. Medmindre andet er angivet, blev alle kemikalier købt fra Sigma (Deisenhofen, Tyskland).

2.2. Fremstilling af ekstrakter

tyve gram pulveriserede K. africana blade blev tilsat 300 mL 70% methanol og ekstraheret med Ultra-Turraks T 50 (Janke & Kunkel, Labortenik, Tyskland) under iskøling med en hastighed på 24000 omdr. / min i 3-5 min. Den resulterende blanding blev derefter filtreret under anvendelse af filterpapir Nr.10. Den roterende fordamper blev derefter brugt til at koncentrere supernatanten Under 40 liter C og lyofiliseret. Proceduren blev gentaget for alle de resterende pulveriserede plantematerialer (K. africana stambark, S. hispidus blade og rødder). Udbyttet af bladekstrakt (KAL) og stammebarkekstrakt (KASB) af K. africana og bladekstrakt (SHL) og rodekstrakt (SHR) af S. hispidus var henholdsvis 4,3, 12,8, 13,0 og 11,4 vægtprocent (relateret til det tørrede materiale).

2.3. Foreløbig fytokemisk Screening

fytokemisk screening blev udført på methanolblad-og stammebarkekstrakter af K. africana og blade og rødder af S. hispidus for at fastslå tilstedeværelsen af stivelse, tanniner, glycosider (sapogenetisk, anthracen og cyanogenetisk), flavonoider, steroider og alkaloider . Tanninindholdet blev bestemt i henhold til Glasl-metoderne og under anvendelse af pyrogallol (Merck, Darmstadt, Tyskland, renhed 99,5%, HPLC) som referenceforbindelse.

2.4. HPLC fingertryk af ekstrakter

HPLC fingertryk af ekstrakterne (KAL, KASB, SHL og SHR) blev udført på et Thermo Finnigan HPLC-system ved hjælp af Hypersl Gold C18, omvendt fase søjle ( mm). Koncentrationen af ekstrakter var 10 mg/mL. HPLC optimale forhold: injektionsvolumen: 10 liter, Detektionsbølgelængde: 254 nm, mobil fase: methanol : vand/50 : 50 (isokratisk tilstand), temperatur: 22 liter C, pumpetryk: 28 MPa, Strømningshastighed: 1 mL/min og driftstid: 10 minutter.

2.5. Bestemmelse af antimikrobiel aktivitet af ekstrakter

2.5.1. Antimikrobiel følsomhedstest

de antimikrobielle aktiviteter af ekstrakterne (KAL, KASB, SHL og SHR) og referencelægemidler (chloramphenicol og clotrimasol (Sigma, Deisenhofen, Tyskland) blev bestemt efter metoden beskrevet af Agyare og hans kolleger . Der blev anvendt medier til både bestemmelse af antibakterielle og antifungale aktiviteter. Et hundrede mikroliter (106 cfu/mL) af testorganismerne (Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Bacillus subtilis NCTC 10073 og klinisk svampemiddel Candida albicans) blev anvendt til frø af henholdsvis næringsstofagar-og sabouraud-agarplader. I hver af disse plader blev fire (4) lige store brønde med en diameter på 8 mm skåret ud under anvendelse af steril korkborer og brønde fyldt med forskellige koncentrationer af ekstrakter og referencelægemidler opløst i dimethylsulfokse (DMSO) og fik lov til at diffundere ved stuetemperatur (28-30 liter C) i 1 time. Vækstinhiberingsområderne blev målt efter 24 h inkubation ved 37 liter C (for bakterierne) og 3 dage ved 30 liter C (for svampen). Aktiviteten af DMSO blev bestemt og viste sig ikke at udvise nogen aktivitet mod testorganismerne.

2.5.2. Mikrofortyndingsmetode

mikrofonerne for ekstrakterne (KAL, KASB, SHL og SHR) mod testbakterierne blev bestemt ved anvendelse af den modificerede mikrofortyndingsteknik som beskrevet af Agyare et al. og Eloff . Testopløsninger (100 mg/mL) af ekstrakterne blev fremstillet med DMSO, og testopløsningen (25-100 liter) blev serielt fortyndet til 100 liter/mL og 100 liter (106 cfu/mL) af testbakterierne dyrket i næringsstofbuljong (Oksoid Limited, Det Forenede Kongerige) tilsat til hver brønd i mikropladerne. De overdækkede mikroplader blev inkuberet ved 37 liter C i 24 timer.for at indikere vækst blev 30 liter 3-(4,5-dimethylthiasol-2-yl)-2,5-diphenyltetrasoliumbromid opløst i vand tilsat til mikropladebrøndene og inkuberet ved 37 liter C i 30 minutter. Test svampemiddel (C. albicans) blev dyrket i sabouraud dekstrose bouillon (Oksoid Limited, Det Forenede Kongerige) og derefter inkuberet i 3 dage ved 30 liter C. mikrofonerne af Kal -, KASB -, SHL-og SHR-ekstrakter mod testsvampen blev bestemt i henhold til retningslinjerne beskrevet i National Committee for Clinical Laboratory Standards for filamentous fungi. De mindste hæmmende koncentrationer af ekstrakterne mod testorganismerne blev påvist som den mindste koncentration af ekstrakter, der ikke udviste mikrobiel vækst efter tilsætning af MTT til mediet og inkubation ved 37 liter C i 20 minutter . Ovennævnte eksperimenter blev gentaget tre gange.

2.6. Bestemmelse af fri radikal Opfangningsaktivitet

ekstraktets frie radikale opfangningsaktiviteter blev bestemt efter metode af Chisola og hans kolleger ved anvendelse af 1, 1-diphenyl-2-picrylhydrasyl (DPPH). Opløsning (0,1 mM) af DPPH i methanol blev fremstillet, og 10 liter af denne opløsning blev tilsat til 100 liter methanolekstrakter sammen med liter-tocopherol i forskellige koncentrationer i 96-brønds mikrotiterplader. Pladerne blev rystet i 30 sek, og efter 30 min blev absorbansen målt ved 517 nm. Inhiberingsprocenten ( % ) af radikal rensning blev beregnet ved hjælp af følgende ligning. Inhibering, hvor er absorbansen af kontrollen, er absorbansen af prøven ved 517 nm og hæmmende koncentration, IC50 er mængden (larg/mL), der reducerer absorbansen med 50%.

2.7. Evaluering af sårheling egenskaber (udskæring sår Model)

2.7.1. Forsøgsdyr

femogtredive rotter blev anbragt i bure i rustfrit stål og fodret med normal kommerciel rotter diæt (GAFCO, Tema, Ghana), givet vand ad libitum og opretholdt under laboratoriebetingelser (temperatur 28-30 C, Relativ fugtighed 60-70% og normal lys-mørk cyklus). En dag før eksperimentet blev rotterne bragt til laboratoriet og vant til eksperimenthåndtering og apparatet for at minimere effekten af stress og nyhed. Alle procedurer og teknikker, der blev anvendt i disse undersøgelser, var i overensstemmelse med National Institute of Health Guidelines for Care and Use of Laboratory Animals (NIH, Department of Health Services publication No. 83-23, revideret 1985). Protokollerne til undersøgelsen blev godkendt af institutets etiske udvalg.

2.7.2. Udskæringssårmodel

dyrene (hunrotter), der vejer 115-120 g, blev bedøvet med ketamin ved 120 mg/kg kropsvægt subkutant inden dannelsen af sårene. 40 mm ved hjælp af barberblade, og det forventede område af såret, der skulle oprettes, blev skitseret på den barberede hud. Områderne blev renset med 70% ethanol, før udskæringssårene blev oprettet i henhold til den modificerede metode af Bhakta et al. . Hudsår blev skabt langs markeringerne ved hjælp af tandede tang, kirurgiske Knive og spids saks. Hele sårene blev åbnet, og dyrene blev opdelt i syv (7) grupper på fem dyr hver. Den første gruppe blev topisk behandlet med 1% vægt / vægt sølvsulfadiasinsalve (Arytons Drugs, Ghana) som referencelægemiddel . Den anden gruppe blev behandlet med vandig creme (vehikel alene). Den tredje gruppe blev efterladt ubehandlet og tillod normal sårheling at finde sted. De sidste fire grupper blev behandlet med 7,5% vægt/vægt ekstraktcremer (henholdsvis Kal, KASB, SHL og SHR). Sårbehandling begyndte den 2. dag efter sårdannelse. Ekstrakterne og referencemedicinerne blev topisk påført sårene 24 hver time i 24 dage. I løbet af behandlingen blev der taget skalerede fotografier af sårområderne (ved hjælp af digitalkamera med høj opløsning) sammen med en millimeterskalamåling hver 48.time startende fra den første dag i sårbehandling. Sårområderne blev bestemt hver anden dag indtil den 24.dag.

2.8. Histopatologiske undersøgelser

sårvævsprøver fra ubehandlede og behandlede dyr blev taget under helingsprocessen på dag 14. 6 mm tykke sektioner fra hver gruppe, blev opsamlet i slutningen af eksperimentet for at evaluere de histopatologiske ændringer . Prøverne blev fikseret i 10% bufret formalin i 24 timer og dehydreret med en sekvens af ethanol-ksilenserie af opløsninger, behandlet og blokeret med paraffin ved 40-60 liter C og derefter opdelt i 5-6 liter tykke sektioner. De to sektioner blev farvet med hæmatoksylin og eosin plet, Van Giesons plet, og toluidin blå plet. Hematoksylin og eosin farvede sektioner og Van Giesons farvede sektioner blev kontrolleret for kollagenaflejring. Toluidinblå farvede sektioner blev brugt til at plette mastceller .

2.9. Statistisk analyse

GraphPad Prism Version 5.0 til vinduer (GraphPad, San Diego, CA, USA) blev brugt til alle statistiske analyser. Data præsenteres som middel SEM () og analyseres af envejs ANOVA efterfulgt af Dunnets multiple sammenligningstest. * , * * og * * * blev betragtet som statistisk signifikante i alle analyser. Graferne blev tegnet ved hjælp af Sigma Plot til vinduer Version 11.0 (Systat Inc., Tyskland).

3. Resultater

3.1. Foreløbig fytokemisk Screening

både blad-og stammebark af K. africana og S. hispidus viste sig at indeholde tanniner (med forskellige mængder), steroider, saponiner, sapogenetiske glycosider og kulhydrater, mens bladene på de to planter indeholder flavonoider. Alkaloider var til stede i både blad og rod af S. hispidus (tabel 1).

3.2. HPLC-fingertryk af ekstrakter

HPLC-fingertryk af ekstrakterne (KAL, KASB, SHL og SHR) blev bestemt til at identificere de største toppe (forbindelser) i de forskellige ekstrakter med henblik på identifikation og kvalitetskontrol (Figur 1, 2, 3 og 4).

Figur 1

HPLC-kromatogram (fingertryk) af methanolbladekstrakt (KAL) af K. africana ved 254 nm.

Figure 2

HPLC chromatogram (finger-printing) of methanol stem bark extract (KASB) of K. africana at 254 nm.

Figure 3

HPLC chromatogram (finger-printing) of methanol leaf extract (SHL) of S. hispidus at 254 nm.

figur 4

HPLC-kromatogram (fingertryk) af methanolrodekstrakt (SHR) af S. hispidus ved 254 nm.

3.3. Antimikrobiel aktivitet

methanolekstrakterne (Kal, KASB, SHL og SHR) viste sig at være aktive mod testorganismerne (E. coli, P. aeruginosa, S. aureus, B. subtilis og C. albicans) med varierende gennemsnitlige inhiberingsområder, og P. aeruginosa viste sig at være mindre modtagelig for ekstrakterne. De mindste hæmmende koncentrationsintervaller for K. Africana-ekstrakter (KAL og KASB) mod testorganismerne var fra 2,25 til 7,5 mg/mL, og for S. hispidus-ekstrakter (SHL og SHR) var 2,5 til 10 mg/mL (tabel 2). Med hensyn til agardiffusionsmetoden udviser alle ekstrakter (Kal, KASB, SHL og SHR) med koncentrationer på 20 og 50 mg/mL højere inhiberingsområder mod testorganismerne end 10 mg/mL koncentration (tabel 3).

3.4. ANTIOKSIDANT aktivitet

alle ekstrakter viste et vist niveau af antioksidant egenskaber med KASB med laveste IC50 og KAL med den laveste frie rensningsaktivitet (Tabel 4 og figur 5).

figur 5

fri radikal rensning af methanolbladekstrakt (KAL) og stammebarkekstrakt (KASB) af K. africana og bladekstrakt (SHL), rodekstrakt (SHR) af S. hispidus og-tocopherol (referenceantioksidant) bestemt ved DPPH-metoden.

3.5. Sårhelingsaktivitet (Sårlukningshastighed)

alle uddragene ( Kal, KASB, SHL og SHR) behandlede grupper udviste betydelige aktiviteter på sårlukningshastighederne sammenlignet med det ubehandlede og køretøjet alene med KAL og SHL med betydelige påvirkninger (og, hhv.) om sårlukningshastigheden fra 7.til 15. dag efter behandling (figur 6 og 8, tabel 5) og KASB og SHR, der udviser signifikante lignende virkninger på sårheling fra 10. til 18. dag efter behandling (Figur 7 og 9, tabel 5).

3.6. Histopatologiske undersøgelser

histologiske undersøgelser afslørede kraftig proliferation af fibroblaster med varierende grad af fibrose. Prøverne viste 70 til 80% tæt og fortykket fibrose for de sår, der blev behandlet med ekstrakterne, mens 1% vægt/vægt sølvsulfadiasinsalve (positiv kontrol) viste 60 til 70% fibrose. Fibroblastceller og kollagenfibre var fremtrædende til stede i referencegrupperne og ekstraktbehandlede grupper sammenlignet med ubehandlet kontrol. Der var kraftig angiogenese, forbedret kollagenation og reepithelialisering, tegn på markante behandlingsresponser midt i vedvarende betændelse med sårvæv behandlet med ekstrakterne sammenlignet med det ubehandlede sårvæv (Figur 10).

(a)

(b)

(c)

(d)

(e)

(f)

(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)

Figur 10

histopatologisk undersøgelse af sårvæv behandlet med vehikel, ekstrakter og det ubehandlede væv. Van Giesons plet og toluidinblå plet behandles dagligt med 7,5 vægtprocent cremer af methanolbladekstrakt (KAL) af K. africana (a), methanolstammebarkekstrakt (KASB) af K. africana (b), methanolbladekstrakt (SHL) creme af S. hispidus (c) og methanolrodekstrakt (SHR) creme af S. hispidus (d) og det ubehandlede sårvæv (e) i 14 dage. (a) KAL: rigelig angiogenese, forbedret kollagenation og reepithelialisering, tydeligt af markante behandlingsresponser midt i vedvarende betændelse. B) KASB: mærkbar angiogenese og dannelse af granulationsvæv med tegn på apoptose efter vævsnekrose med mindre intens kollagenation og reepithelialisering. (C) SHL: med mærkbar intens kollagenation og reepithelialisering. (D) SHR: med mærkbar dannelse af granulationsvæv manifesteret som vævspåfyldning. Kollagenation og genepitelisering blev også for alvor sammenlignet med det ubehandlede sårvæv. e) ubehandlet sårvæv med vedvarende inflammation med ufuldstændigt sårområde; bevis for dårlig dannelse af granulationsvæv, kollagenation og reepithelialisering, men rigelig angiogenese. (f) behandlede sårvæv med 1 vægt/vægt sølvsulfadiasin viste hurtig dannelse af granulationsvæv, kollagenering, tydeligt af forbedret sårheling og ujævn keratinøs såroverflade tydelig reepithelialisering. Forklaring: AG: angiogenese, CO: kollagenation, DS: dødt rum efter nekrose, GR: granulationsvæv efter apoptose, IC: ufuldstændigt sårområde, hvis: betændt væv, KE: keratinøst epitel, ND: nekrotisk affald af vedvarende betændelse. RE: reepithelialisering.

4. Diskussion

denne undersøgelse beskriver nogle af de biologiske aktiviteter, herunder antimikrobielle og sårhelende egenskaber af blade, stamme bark og rødder ekstrakter fra de tropiske planter K. africana og S. hispidus. Planteprodukter er potentielle sårhelende midler og foretrækkes stort set på grund af deres udbredte tilgængelighed, mindre eller ingen bivirkninger og effektivitet som råpræparater . Den fytokemiske screening af de tørrede blade og rod af S. hispidus afslørede tilstedeværelsen af tanniner, alkaloider, saponiner, steroider, kulhydrater og sapogenetiske glycosider og flavonoider i bladene. Alkaloider var fraværende i de tørrede blade og stammebark af K. africana og saponiner, steroider, kulhydrater og sapogenetiske glycosider var til stede i begge plantematerialer. Flavonoider blev også fundet i bladene af K. africana (tabel 1). HPLC-fingertryk af ekstrakterne (KAL, KASB, SHL og SHR) blev også udviklet til identifikations-og kvalitetskontrolformål (Figur 1, 2, 3 og 4).

de fytokemiske bestanddele af en plante bestemmer ofte den fysiologiske virkning på menneskekroppen. Antioksidanter er midler, der beskytter celler mod skader forårsaget af molekyler kendt som frie radikaler. Det er en af de mest almindelige årsager til denne sygdom, der kan opstå, når en person er i stand til at bestemme, om han eller hun er i stand til at tage en pause fra hverdagens stress og jag . Derfor spiller bestanddelene af ekstrakterne, såsom tanniner og flavonoider, en vigtig rolle i sårheling ved at forhindre og beskytte iltningsskader fra frie radikaler .

den antimikrobielle aktivitet af methanolekstrakter af K. africana blade og stamme bark og S. hispidus blade og rødder blev bestemt mod fire bakterier, to Gram-positive bakterier (S. aureus og B. subtilis), to Gram-negative bakterier (E. coli og P. aeruginosa) og en svamp (C. albicans) ved hjælp af cup plate agar diffusionsmetoden. Methanolekstrakterne fra de to planter var aktive mod alle de testede organismer (tabel 2). Den mindste inhiberende koncentration (MIC) blev bestemt som den laveste koncentration af råekstrakt, hvor ingen mikrobiel vækst og mikrofoner af KAL mod S. aureus, B. subtilis, E. coli, P. aeruginosa og C. albicans var henholdsvis 5, 2,5, 5,5, 7,5 og 2,5 mg/mL, og KASB var henholdsvis 5, 5,5, 5,25, 7,5 og 2,25 mg/mL. SHL-og SHR-ekstrakter udviste også lignende antimikrobiel aktivitet, og deres mikrofoner var i samme rækkevidde som K. africana-ekstrakterne (tabel 2 og 3). De antibakterielle og antifungale aktiviteter af ekstrakterne (KAL, KASB, SHL og SHR) svarede Til aktiviteten udstillet af bladekstrakter af Kigelia pinnata.) DC. som rapporteret af Binutu et al. . Den antimikrobielle virkning af ekstrakterne kan tilskrives astringerende karakter af phenolbestanddelene, herunder tanniner og andre polyfenoler, der er til stede i ekstrakterne .

beboelse af patogene bakterier såsom stafylokokker, streptokokker og Pseudomonas i sår kan normalt føre til infektion af sår, som kan resultere i dannelse af kroniske sår . Fra denne undersøgelse blev det indset, at K. africana og S. hispidus ekstrakter udviste stærk og bredspektret antimikrobiel aktivitet mod disse patogener. Da de fleste mikrofoner af ekstrakterne mod testorganismerne var under 8 mg/mL, kunne det udledes, at ekstrakterne udviste potent antimikrobiel aktivitet ifølge Fabry og hans kolleger . Den topiske anvendelse af antimikrobielle midler eller ekstrakter er en effektiv terapimetode til at ødelægge mikrobielle populationer på grund af tilgængeligheden af de aktive stoffer på sårstedet, hvilket fører til forbedret sårhelingsaktivitet .

IC50-værdierne for ekstrakterne (KAL, KASB, SHL og SHR) var henholdsvis 1,5, 56,9, 13,7, 49,8 og 45,1 liter/mL (Tabel 4). Disse resultater tyder på, at disse ekstrakter besidder antioksidant egenskaber med undtagelse af ekstrakter af S. hispidus og dette kunne lette heling af sår . Dette kan indikere, at de traditionelle anvendelser af S. hispidus som sårhelende middel kan ikke nødvendigvis skyldes dets antioksidante aktivitet, men snarere være baseret på andre biologiske virkninger. IC50-værdierne af blade og stamme bark af K. africana svarede til resultaterne af Gathirva og hans kolleger .

ekstrakterne (KAL, KASB, SHL og SHR) havde betydelig indflydelse på sårlukningshastigheden baseret på de forskellige behandlingsdage for sårene med ekstrakterne sammenlignet med de ubehandlede. SHL-ekstrakt udviste signifikant forbedret effekt på sårhelingsprocessen på dag 11 () med procentvis sårlukning på 90.13 (figur 8) sammenlignet med de ubehandlede sår. Påvirkningen af SHL på sårene var den samme som SHR-ekstrakt med signifikant øget sårkontraktion på dag 11 () og sårlukning på 91,72% (figur 9). Indflydelsen af KASB-ekstrakt (Figur 7) svarede til SHL-og SHR-ekstrakter. Imidlertid forbedrede KAL-ekstrakt signifikant sårkontraktion fra dag 7 () med sårlukning på 85,1% (figur 6) til den 17.dag. Histopatologisk undersøgelse af sårvævene afslørede kraftig angiogenese, forbedret kollagenation og reepithelialisering sammenlignet med de ubehandlede sår (Figur 10). Disse biologiske aktiviteter af ekstrakterne kan skyldes den forbedrede proliferation af fibroblaster og keratinocytter og vellykket reduktion af patogene bakterier af ekstrakterne, og disse kan tilskrives de fytokemiske bestanddele af ekstrakterne.

virkningerne observeret i kun behandlet creme og de ubehandlede sår var ikke statistisk signifikante sammenlignet med ekstrakterne eller sølvsulfadiasin (reference) behandlede sår. Dette kan også indikere, at komponenterne i den vandige creme ikke interfererede med ekstraktenes aktivitet, og derfor kan de forbedrede virkninger af ekstrakterne udelukkende skyldes de bioaktive principper, der findes i disse ekstrakter. De sårhelende virkninger af ekstrakterne kan skyldes de forskellige fytokemiske bestanddele, der er til stede i dem. Tanniner såsom proanthocyanidiner og andre tanniner, herunder garvesyre, geraniin og furosin er kendt for at lette sårheling . Ekstrakterne viste sig at indeholde flavonoider og saponiner, og disse sekundære metabolitter har vist sig at forbedre sårheling, og derfor kan de forbedrede sårhelingseffekter af ekstrakterne tilskrives deres fytokemiske bestanddele.

ovenstående fund kan understøtte påstandene om, at sår behandlet med planteekstrakter heles hurtigere og bedre end ubehandlede sår og brugen af disse planter til behandling af mikrobielle infektioner. Imidlertid skal isolering og karakterisering af bioaktive forbindelser, der er ansvarlige for disse farmakologiske egenskaber, udføres.

5. Konklusion

methanolbladet og stammebarken af K. africana og methanolbladet og rodekstrakter af S. hispidus udviste antioksidant, antimikrobielle aktiviteter med MIC-intervaller på henholdsvis 2,25 til 7,5 mg/mL og 2,5 til 10 mg/mL mod testorganismerne, forbedrede sårhelingsegenskaber og disse farmakologiske egenskaber kan retfærdiggøre den medicinske anvendelse af disse planter til behandling af mikrobielle infektioner og sår. Bioaktivitetsstyret fraktionering og isolering af de bioaktive forbindelser, der er ansvarlige for de biologiske aktiviteter, vil blive udført.

interessekonflikt

forfatterne erklærer, at de ikke har nogen interessekonflikt.

anerkendelser

forfatterne ønsker at udtrykke deres taknemmelighed til Mr. Thomas Ansah fra Institut for farmakologi, KNUST, Kumasi, Ghana for hans tekniske assistance og Nana Gaber Atefah for indsamlingen af planterne. De anerkendte også Dr. Paul Ossei fra Institut for patologi, Komfo Anokye Teaching Hospital, Kumasi, Ghana for hans bidrag til den patologiske vurdering af sårvæv.