Bøger fra Sapidyne Technology

(Bemærk: i den følgende beskrivelse er analyseformatet at immobilisere liganden for at måle fri receptor i prøven. Omvendt kan receptoren immobiliseres for at måle fri ligand i prøven afhængigt af de anvendte materialer.)
måling af den frie receptor opnås ved kort at udsætte prøveblandingen for en fast fase, på hvilken liganden er immobiliseret. Eksponeringstiden er kritisk, fordi det at holde samplens interaktionstid til den faste fase ganske kort resulterer i en situation, hvor den eneste signifikante binding til den faste fase er fra den frie receptor. Den kinetiske Udelukkelsesanalyse er i modsætning til en konkurrenceanalyse, hvor den ækvilibrerede opløsning er i kontakt med den faste fase længe nok til, at den faste fase ligand kan konkurrere om opløsningsreceptoren.
fordelen ved Kineks er, at signalet fra den optagne receptor kun repræsenterer den koncentration, der er fri i opløsningen. At kende ligevægtskoncentrationen af receptoren muliggør bestemmelse af bindingskonstanterne som beskrevet på den Reversible Bindingsside.
de kommercielt tilgængelige instrumenter til udførelse af Kineksa-analyser (Sapidynes Kineksa 4000, 3200 og 3100) anvender en lille kolonne af partikler, gennem hvilke prøven og andre reagenser ledes. Kontakttiden for en hvilken som helst del af prøven med den faste fase er derefter transittiden gennem søjlen og kan styres af den valgte strømningshastighed (fra omkring 50 millisekunder til ca.et sekund).

systemer med nM-rækkevidde bindemidler eller strammere vil være i kinetisk udelukkelsesassaytilstand (Kineksa-tilstand). Svagere bindemidler kan stadig måles, men kan kræve ekstra omhu for at undgå forstyrrelse af prøven fra målingen. Særligt velegnet til måling af affinitet og kinetik og fungerer også som en forbedret immunoassay platform. En mere detaljeret forklaring af Kineksa-målingerne er inkluderet nedenfor.

Skriv et svar

Din e-mailadresse vil ikke blive publiceret.