den modificerede Knotts metode anvendes til koncentration og identifikation af mikrofilariae, specifikt hjerteorm Dirofilaria immitis. Det skal differentieres fra den ikke-patogene mikrofilaria af Dipetalonema reconditum (“dipet” for kort).
en direkte blodudstrygning kan udføres på samme tid. Det er en hurtig, ikke-koncentrationstest for mikrofilaria. Dirofilaria og Dipet er differentieret af deres motilitetsmønster.
disse tests skal altid udføres, når en patient tester hjerteorm antigen positiv, eller der er nogen grund til at mistanke om, at hunden i øjeblikket har eller har haft hjerteorm sygdom i fortiden. Tilstedeværelsen af Dirofilaria vil påvirke forløbet og / eller valget af behandling.
Knott ‘s test kan udføres uden at udføre en direkte udtværing, men aldrig udføre en direkte udtværing uden at udføre en Knott’ s test. Knott ‘ erne er en mere følsom test, fordi den koncentrerer mikrofilaria, så de er mindre tilbøjelige til at blive savnet under mikroskopisk undersøgelse.
Procedure for direkte udtværing:
enkel. Anbring en dråbe blod, fortrinsvis fra et EDTA-rør eller hepariniseret sprøjte, i midten af et objektglas. Drop et dæksel glide over toppen og undersøge under mikroskop på 10 gange magt. Dirofilaria vil have en stationær, vridende bevægelse; Dipetalonema vil udvise en hurtigere, retningsbestemt bevægelse og skyder ofte lige ud af marken.
Procedure for den modificerede Knott ‘ s teknik:
sørg for, at du bærer handsker til beskyttelse. 15 ml centrifugerør tilsættes cirka 10 ml 2% formalin (dette kan købes kommercielt) til 1 ml antikoaguleret blod. Placer tommelfingeren over toppen af det lukkede rør og vend flere gange for at blande grundigt. Centrifuger i 5 minutter ved 1000 til 1500 omdrejninger.
du skal være i stand til at visualisere et hvidligt stik i bunden af røret efter spinding. Bortskaf supernatanten i den rigtige beholder til farligt affald.
brug en lang glas-eller plastpipette til at tilføje en dråbe ny methylenblå plet
brug pipetten til at blande pletten med sedimentet
Tilføj en dråbe af denne blanding til midten af et objektglas. Slip en dækslip ovenpå. Undersøg på mikroskopet under 10 gange effekt.
i modsætning til med den direkte udstrygning vil mikrofilaria præsentere som stationær. Dirofilaria skal skelnes fra Dipetalonema baseret på størrelse og form. Brug følgende tabel til at hjælpe dig med at differentiere:
|
Parameter |
D. immitus |
D. reconditum |
|
Længde (mikron) |
||
|
bredde (mikron) |
||
|
form (forreste ende) |
koniske |
blunt |
|
Form (Krop) |
lige |
buet |
|
form (hale) |
lige |
knap krog |
|
antal tilstedeværende |
få til mange |
få |
|
bevægelse |
stationær |
bevæger sig på tværs af dias |
(Cornell University)
en anden cool test for mikrofilaria
Fyld et mikrohematokritrør og drej ned som om du laver en pcv.
læg røret på et objektglas og læg det på mikroskopstadiet. Fokuser på buffy coat på 10 gange strøm-hvis en hund er hjerteorm positiv og har cirkulerende mikrofilaria, kan du se mikrofilaria vride sig rundt i buffy coat!
