systemisk aktivitet af Avermectinerne mod Katteloppen (Siphonaptera: Pulicidae)

abstrakt

Ivermectin har potent systemisk aktivitet mod adskillige arter af nematoder og leddyr, men der er nogle vigtige arter i disse to grupper, såsom katteloppen, Ctenocephalides felis (Siphonaptera: Pulicidae bouch K.), Der ser ud til at være ildfast over for det. I et forsøg på at afgøre, om manglen på systemisk aktivitet mod C. felis er specifik for ivermectin, eller hvis det er et klassefænomen, blev 20 avermectinderivater testet i et kunstigt membranloppefodringssystem i koncentrationer på 20, 10 og 1 liter/ml. Resultaterne viste, at ivermectin havde lc90-og LC50-værdier mod lopper på henholdsvis 19,1 og 9,9 liter/ml. Kun fire af de øvrige 19 evaluerede forbindelser havde både lc90-og LC50-værdier, der var mere potente end ivermectin, og selv da var fordelen beskeden. Blandt disse fire forbindelser var en dobbelt stigning i styrke i forhold til ivermectin, når lc90–værdierne blev overvejet (interval, 9,2-10.3 liter/ml) og en to til otte gange stigning, når LC50–værdierne blev undersøgt (interval, 1,23-5,26 liter/ml). Hverken besiddelsen eller antallet af oleandrosyl-sukkerarter på den makrocykliske rygrad var relevante for yderligere loppeaktivitet, fordi blandt disse fire forbindelser var to disaccharider, et monosaccharid og en aglycon. Også bindingsdisposition mellem C-22 og 23 bidrog ikke til stigning i aktivitet, fordi disse molekyler omfatter medlemmer med enten enkelt-eller dobbeltbindinger. En af disse avermectinanaloger blev opskaleret og testet subkutant hos en hund ved > 100 gange den kommercielle ivermectindosis, og der blev observeret nul effekt over for loppen. Vi konkluderer, at selv det bedste In vitro avermectin ikke har in vivo potentiale til at blive en kommerciel oral eller subkutan loppebehandling for ledsagende dyr.

avermectinklassen af endektocider har potent systemisk aktivitet mod adskillige arter af nematoder og leddyr (Egerton et al. 1979, 1980). Særligt slående er for eksempel de næsten absolutte virkninger mod helminths, såsom umoden hjerteorm, Dirofilaria immitis, hos hunde ved 6,0 liter/kg (Campbell 1989) og mod insekter såsom larverne fra den almindelige kvæggrub, Hypoderma lineatum (Villers), hos kvæg ved 0,2 liter/kg (Drummond 1984). På trods af denne enorme styrke er der imidlertid andre organismer inden for disse grupper, der ser ud til at være ildfaste over for ivermectin. Katteloppen, Ctenocephalides felis (Bouch Lart), er et klinisk relevant eksempel. Ivermectin blev oralt administreret ugentligt ved 0,5 mg / kg eller dagligt ved 0.05 mg/kg og observeret at være inaktiv mod denne parasit på hunde (Blair et al. 1984). Banks et al. (2000) og Shoop et al. (2001) bekræftede uafhængigt disse resultater ved at vise, at ivermectin har svag systemisk aktivitet mod katteloppen i kunstige membranloppefodringsanalyser.

i et forsøg på at afgøre, om manglen på systemisk aktivitet mod lopper er specifik for ivermectin, eller om det er et klassefænomen, blev 20 avermectiner testet i et kunstigt membranloppefodringssystem. Den strategisk udvalgte serie af testede avermectiner indeholdt repræsentanter for de fleste af de kemisk tilgængelige steder, der er blevet udnyttet omkring makrocyklen. Gruppen omfatter alle de naturligt forekommende avermectiner såvel som semisyntetiske medlemmer af den biologisk vigtige aglycon -, monosaccharid-og disaccharidserie. De kommercialiserede forbindelser abamectin, ivermectin, milbemycin D og selamectin blev også inkluderet. I denne artikel præsenterer vi de relative styrker af disse medlemmer af avermectin-familien mod lopper gennem test i et kunstigt membransystem og viser in vivo effektresultater fra en hund doseret subkutant med et af de mest potente avermectiner testet.

materialer og metoder

Greyhound.

det kunstige membranloppefodringssystem, vi brugte, er en modifikation af den “kunstige hund” fremstillet af Jay R. Georgi (FleaData, Freeville, NY). Dette kunstige membransystem blev designet til at bageste lopper, men det blev også foreslået, at det kunne teste virkningerne af systemiske insekticider (vade og Georgi 1988 og Pullen og Meola 1996), og det er blevet brugt til at opdage den nye indolterpen, nodulisporinsyre a (Shoop et al. 2001). I et samarbejde med Jay R. Georgi ændrede vi den kunstige hund. Dette nye system (Fig. 1) fik betegnelsen “Greyhound”, fordi den var designet til at være mere effektiv, lettere at oprette og tillod, at et større antal forbindelser blev testet samtidigt. I modsætning til den kunstige hund, der kun indeholder 25, 5 cm bure ophængt individuelt under et opvarmet Pleksiglas-kabinet, indeholder det nye system En aftagelig 59 med 38 cm manifold, der holder 104, 2,5 cm bure. Vi har også erstattet aluminium ikke-engangs fodring ærmer med plast CVC ærmer (Costar, Cambridge, MA). Plastmufferne blev anbragt efter hver brug for at minimere sandsynligheden for forurening med stoffer.

Loppeopdræt.

vores loppekoloni blev vedligeholdt på katte, der er anbragt i henhold til vores institutionelle Udvalg for dyrepleje og brug. Æg indsamlet fra katte blev inkuberet ved 28 liter C og 85% RH i et medium bestående af otte dele sand og en del frysetørret kvægblod (California Spray Dry Company, Stockton, CA). Lopper anvendt i denne undersøgelse var kommet ud af deres puparia inden for 48 timer.

sammensat præparat.

avermectiner blev testet i koncentrationer på 20, 10 og 1 liter/ml. To replikationer af hver forbindelse på hvert niveau blev testet i en sammenligning side om side ved hjælp af to af vores fodringssystemer. Det anvendte køretøj var polyethylenglycol 400 og dimethylsulfoksid (2:1). Milliliter hepariniseret kvægblod blev anvendt. Alle forbindelser blev fermenteret eller syntetisk modificeret af Merck-kemikere undtagen selamectin.

foreløbig oprensning af selamectin forløb som følger. Seks ampuller med Revolution (240 mg hver) blev fortyndet i minimale mængder CH2Cl2 og lastet på en pude silicagel (4 tommer høj). Gradient eluering,

.

,

.