validering af formodede test for ikke-humant blod ved hjælp af Kastle Meyer og Hemastiks reagenser

Kastle Meyer og Hemastiks reagenser er formodede test, der almindeligvis anvendes i retsmedicinsk sagsbehandling til påvisning af blod, og deres egnethed er blevet gennemgået i adskillige publikationer. Imidlertid, undersøgelser til dato har fokuseret på validering af disse test på humant blod alene, og intet offentliggjort arbejde har set på følsomheden, specificitet og effekt på DNA-analyse, når disse reagenser anvendes til formodet test for dyreblod. Formålet med denne undersøgelse var at validere de to reagenser til brug med dyreblod og sammenligne deres præstationer for at vælge den bedste test baseret på omstændighederne i efterforskningen af vildtkriminalitet.

metodernes følsomhed, specificitet, stabilitet og robusthed blev vurderet ved forsøg med fortyndinger af dyreblod (fra 1:4 til 1:65536) ved anvendelse af direkte og indirekte (gnid) test, potentielle interfererende stoffer, blodkilder fra forskellige arter og alderen blod. Virkningerne af de to reagenser på efterfølgende DNA-analyse blev også undersøgt.

under de direkte tests viste Kastle Meyer en højere følsomhed og detekterede blod ned til en fortynding på 1:16.384, en størrelsesorden lavere end Hemastiks. Under gnidningstesten viste Hemastiks imidlertid en højere følsomhed og detekterede blod ned til en fortynding på 1:64 på porøse materialer, mens Kastle Meyer kun var positiv ned til en fortynding på 1:16. Ved anvendelse af den samme vatpind til formodet test og DNA-ekstraktion tillod hemastiks-test desuden amplifikation af en tilstrækkelig mængde DNA til artidentifikation ved dens følsomhedsgrænse på porøse materialer (1:64), mens Kastle Meyer hæmmede mest amplifikation af DNA ved dens mindre følsomme grænse på 1:16 fortynding. På den anden side viste Hemastiks en meget lavere specificitet og producerede falske positive resultater, når de blev udsat for tomat, kartoffel, rust, aviær urinsyre, blegemiddel og vaskerot, mens Kastle Meyer kun producerede en svag positiv reaktion fra kartoffel. Begge tests udførte lige så godt påvisning af frisk blod fra forskellige dyrearter. Stabilitetstesten gav sammenlignelige resultater blandt testene bortset fra alderen fiskeblodpletter, hvor Kastle Meyer-testen fungerede dårligt.

på grund af dens brugervenlighed, højere følsomhed og manglende interferens med nedstrøms DNA-analyse og på trods af dens reducerede specificitet sammenlignet med Kastle Meyer er Hemastiks-metoden mere passende til brug i undersøgelser af vilde dyr. Positive resultater vil altid blive bekræftet med DNA-analyse, og den lave interferens af reagenset tillader anvendelse af en enkelt vatpind til formodet test og DNA-prøveudtagning.

Skriv et svar

Din e-mailadresse vil ikke blive publiceret.