Eine Knockin-Maus definiert ein Tiermodell, in dem eine interessierende Gensequenz durch Einzelsubstitution durch ein Transgen oder durch Hinzufügen von Gensequenzen, die nicht innerhalb des Locus gefunden werden, verändert wird.
Die Insertion eines Transgens erfolgt typischerweise in bestimmten Loci. Dieser „gezielte“ Ansatz verursacht weniger Störungen der transkriptionsaktiven genetischen Umgebung.
Knockin-Mäuse eignen sich für ein breites Anwendungsspektrum, von der Untersuchung regulatorischer Elemente wie Promotoren bis zur Herstellung therapeutisch nützlicher humanisierter Antikörper.
Unsere Knockin-Mausmodelllösungen
Neben konventionellen Knockins, bei denen eine interessierende Gensequenz zu einem endogenen Locus hinzugefügt wird, bieten wir eine Reihe häufig verwendeter Lösungen an:
- Quick Knockin™ (Rosa26 und Hprt)
Volle Kontrolle über Ihre Genexpression durch Targeting der am besten untersuchten permissiven Loci Rosa26 und Hprt.
- Punktmutation Knockin Maus
Beeinflussen die Funktion eines bestimmten Proteins (Funktionsgewinn oder -verlust) durch ein oder mehrere mutierte Nukleotide
- Reportermaus
Überwachen genetische Ereignisse, Proteinfunktion, Lokalisierung und Zellhandel
- Humanisierte Mausmodelle
Ersetzen Sie eine Mausgensequenz durch das menschliche Gegenstück
Bedingte Aktivierung von Geninsertionen oder -substitutionen
Alle Knockin-Designs können Bedingungen erfüllen, unter denen Ihre Geninsertion oder -substitution aktiviert werden kann: A) in bestimmten Zelltypen in einem bestimmten Gewebe, während andere Zelltypen und Gewebe eine unmodifizierte, funktionelle Genexpression aufweisen, und/oder B) zeitlich zu einem gegebenen Zeitpunkt in embryonalen, postnatalen oder adulten Tieren.
Typischerweise werden zwei gängige Ansätze verwendet:
lox-STOP-lox
Die Cre-Rekombinase erkennt die Loci der Rekombination loxP, die eine Deletion der Stopsequenz zwischen den beiden loxP-Stellen verursachen, wodurch die Transkription Ihres Mutationsgens von Interesse ermöglicht wird.
FLEx
Sowohl loxP als auch lox511 werden von der Cre-Rekombinase erkannt, aber lox511-Stellen können nur mit anderen lox511-Stellen rekombinieren, nicht mit loxP-Stellen.
Wenn die DNA-Sequenz von Lox-Stellen in entgegengesetzter Ausrichtung flankiert wird, invertiert die Cre die Sequenz zwischen den Stellen. Wenn die DNA-Sequenz von Lox-Stellen in der gleichen Orientierung flankiert wird, wird die Cre die Sequenz herausschneiden.
Durch die Kombination von Art der Lox-Standorte, Anzahl und Ausrichtung der Lox-Standorte, die Ihre interessierenden Gene umgeben, kann ein leistungsfähiges FLEx-Tool für Ihre spezifischen wissenschaftlichen Anforderungen erstellt werden.
Was den Lox-STOP-Lox-Ansatz betrifft, führt die Expression der Cre-Rekombinase in einem spezifischen Zelltyp oder Gewebe zu einer gewebespezifischen mutierten Genexpression, und die Verwendung einer induktoraktivierten Cre-Rekombinase führt zu einer zeitlich mutierten Genexpression in Gegenwart eines Induktors wie Tamoxifen.
