Los microarrays de ADN mostraron que el queratoacantoma actínico y el carcinoma cutáneo de células escamosas son entidades distintas con firmas moleculares únicas (Figura 2). Nuestro estudio identificó genes expresados diferencialmente y vías moleculares enriquecidas cuando se compara el queratoacantoma con el carcinoma de células escamosas y la piel normal, sentando una base sólida para su separación a nivel molecular. Nuestros datos mostraron 1.449 genes expresados diferencialmente entre queratoacantoma y carcinoma de células escamosas (5 FC: P0,01). El gran número de genes expresados de manera diferente indica que el queratoacantoma no solo es una lesión distinta, sino que también es marcadamente diferente molecularmente del carcinoma de células escamosas. Nuestro estudio previo con microarrays de la lesión precursora estrechamente relacionada, queratosis actínica8, mostró solo nueve genes que se expresaban diferencialmente a partir del carcinoma de células escamosas (>2 FC: P<0,05). Otras entidades que son molecularmente distintas del carcinoma de células escamosas son la piel norma8 y la hiperplasia pseudoepiteliomatosa:9.382 y 703 genes expresados diferencialmente, respectivamente (>2 FC: P<0,05) en nuestros estudios previos de microarrays.
Otros estudios han demostrado de manera similar que el queratoacantoma y el carcinoma de células escamosas son molecularmente distintos. Uno de los primeros estudios moleculares en que se utilizó la pérdida de heterocigosidad mostró múltiples diferencias entre el queratoacantoma y el carcinoma de células escamosas.11, 12 La frecuencia de pérdida de heterocigosidad de los queratoacantomas fue baja con pérdidas aisladas en 9p, 9q y 10q, en contraste con el carcinoma de células escamosas, en el que la pérdida de heterocigosidad fue común en los brazos cromosómicos 3p, 9p, 9q, 13q, 17p y 17q11, 12. Estudios más recientes de CGH con arreglo a matrices mostraron diferencias significativas entre el queratoacantoma y el carcinoma de células escamosas en la distribución del número de clones aberrantes y aberraciones recurrentes entre ellos.13, 14 Li et al14 mostraron aberraciones recurrentes en queratoacantomas en los cromosomas 17, 19, 20 y X en aproximadamente un tercio de los casos. Se encontraron aberraciones recurrentes en carcinomas de células escamosas en el 40% de los carcinomas de células escamosas en cromosomas 7, 8, 10, 13, 17, y X, con pérdidas en ciertas regiones de 17p y 17q recurrentes en el 50% de las muestras. Además, un estudio reciente de FISH mostró que las aberraciones del número de copias de genes EGFR y MYC eran más comunes en el carcinoma de células escamosas que en el queratoacantoma.15
Ha habido mucho debate sobre si el queratoacantoma es una lesión reactiva/hiperplásica o neoplásica. Para obtener información sobre la patogénesis del queratoacantoma, nos centramos en las funciones biológicas moleculares alteradas y las vías canónicas al comparar el queratoacantoma con la piel normal, y los resultados sugieren que el queratoacantoma es neoplásico. Dos de las tres vías canónicas principales: los mecanismos moleculares del cáncer y la señalización de integrinas son bien conocidos por estar involucrados en la neoplasia.8 Hemos revisado previamente la vía de señalización de la integrina y su supuesto papel en la carcinogénesis del carcinoma de células escamosas.8 Cuatro de las cinco vías biológicas moleculares más importantes desreguladas en el queratoacantoma están relacionadas con la génesis tumoral e incluyen el desarrollo, el crecimiento y la diferenciación celulares, el ciclo celular y el movimiento celular. En apoyo adicional del queratoacantoma como lesión neoplásica, los estudios moleculares previamente discutidos mostraron aberraciones moleculares que incluyen pérdida de heterocigosidad y aberraciones de número de copias por CGH que se esperarían en una lesión neoplásica.11, 12, 13, 14 Estos hallazgos moleculares serían inusuales en un proceso reactivo o hiperplásico.
Algunos de los genes con mayor regulación al comparar el queratoacantoma con la piel normal están implicados en la neoplasia e incluyen MALAT-1, S100A8 y EHF (FCs=216,93, 156,65 y 69,28). El MALAT-1 es un ARN largo no codificante que se cree que induce la migración y el crecimiento tumoral, posiblemente a través de la modulación de caspasa-3, -8, Bax, Bcl-2 y Bcl-Xl16.Se ha demostrado que su sobreexpresión está significativamente relacionada con metástasis y mal pronóstico en carcinomas de pulmón de células no pequeñas colorrectales, próstata, páncreas y cuello uterino.16, 17, 18 La FSE forma parte de la familia de factores de transcripciones del STE que han demostrado participar en una variedad de funciones celulares, como el desarrollo, la diferenciación, la proliferación, la apoptosis, la migración, la remodelación tisular, la invasión y la angiogénesis.19 Se han descrito fusiones de genes ETS con otras dianas en sarcoma de Ewing, leucemia mielomonocítica crónica y carcinoma de próstata.20 Se ha demostrado que la FEH se regula de manera diferente en los carcinomas de próstata, ovario seroso y mama.19, 20, 21 S100A8 es una proteína de unión al calcio que también se reguló al alza en nuestro estudio comparando el carcinoma de células escamosas con hiperplasia pseudoepiteliomatosa y el carcinoma de células escamosas con piel normal.8, 9 Está implicado en la regulación de diversos procesos celulares, y su papel en la tumorogénesis se discutió previamente.9
Muchos creen que los queratoacantomas son neoplasias benignas de regresión. Se ha planteado la hipótesis de que estas lesiones pueden derivarse de folículos y sufrir apoptosis similar a la involución catágena del folículo piloso.1, 2, 5, 6, 7 Nuestros datos apoyan esta hipótesis al mostrar una regulación ascendente prominente de la vía de apoptosis/muerte celular biológica molecular y la vía canónica de señalización de endocitosis mediada por clatrina al comparar el queratoacantoma con la piel normal (Tabla 3). Se afirma que varios de los genes expresados diferencialmente con mayor regulación al alza (CALM1, TP63, YWHAZ, CALR, MMP1, S100A8 y ARHGEF12) están involucrados en la muerte celular/apoptosis. La regulación ascendente de estas vías puede explicar el comportamiento benigno del queratoacantoma.
Varios estudios inmunohistoquímicos también han demostrado que la apoptosis tiene un papel en la regresión del queratoacantoma. En un estudio se distinguió el queratoacantoma del carcinoma de células escamosas al mostrar que el queratoacantoma expresaba marcadores relacionados con el inicio (el receptor citolítico P2X7) y las fases de finalización (TÚNEL) de la apoptosis.Otros 22 han demostrado que el queratoacantoma expresa fuertemente las proteínas bax y bak, que se consideran esenciales para la ejecución de la apoptosis.23 En otro estudio, los queratoacantomas mostraron una expresión más baja de la proteína antiapoptótica Bcl-xL, lo que concuerda con una posible función de la apoptosis en la regresión del queratoacantoma.24 BCL – 2 es un proto-oncogén involucrado en la protección de las células contra la apoptosis y se ha demostrado que tiene una expresión disminuida en los queratoacantomas en regresión.23, 25
Planteamos la hipótesis de que el enriquecimiento prominente de la vía de señalización de la endocitosis mediada por clatrina puede deberse a la apoptosis mediada por granzima. Las células T citotóxicas y las células asesinas naturales utilizan proteínas efectoras líticas de perforina y granzimas para eliminar las células diana. Se ha demostrado que las células T citotóxicas desempeñan un papel importante en la regresión del queratoacantoma.26 Thiery y otros27 mostraron que la perforina liberada por las células T citotóxicas activa la endocitosis dependiente de clatrina y dinamina para facilitar la internalización de la perforina y la granzima por las células diana después de su liberación. Este es el primer paso crítico que inicia la apoptosis de las células diana y puede explicar la regulación ascendente de la señalización de la endocitosis mediada por clatrina.
El modelo de apoptosis mediada por granzimas también puede explicar la regulación ascendente prominente de las proteínas de unión al calcio CALM1 (FC=73,16). CALM1 codifica la calmodulina, que es un miembro de la familia de proteínas de unión al calcio EF-hand. Codifica una proteína de unión al calcio que es una de las cuatro subunidades de la fosforilasa quinasa. En el modelo de apoptosis mediada por granzima, la acción de la perforina crea poros en la membrana celular plasmática de la célula diana, permitiendo transitoriamente que el Ca2 entre en la célula. La afluencia de Ca2 conduce a una respuesta de reparación de membrana herida, donde los lisosomas y endosomas se fusionan con la membrana plasmática para volver a sellar la membrana dañada. Esta respuesta protege a las células diana de la necrosis y les permite someterse al proceso más lento, dependiente de ATP, de la apoptosis mediada por granzimas.La calmodulina es una proteína de unión al calcio que puede desempeñar un papel en esta respuesta. Se ha observado un aumento del calcio intracelular junto con la apoptosis mediada por Saf asociada a calmodulina en la línea de células B humanas FMO, células de Jerkat, osteoclastos y células de colangiocarcinoma.28
El papel de S100A8 en la tumorogénesis se ha discutido previamente. Sin embargo, también se ha demostrado que S100A8 a través de un complejo con S100A9 tiene un papel en la apoptosis tumoral en líneas celulares de linfoma de ratón y leucemia humana, líneas celulares de carcinoma cervical y líneas celulares de carcinoma de colon.29, 30, 31 Se ha demostrado que el complejo S100A8/A9 induce efectos inhibitorios sobre la proliferación y la invasividad de las células tumorales30 a través de la exclusión de zinc de las células diana y a través de la unión a los receptores de superficie de las células diana.31
Creemos que el queratoacantoma es una entidad distinta, separada del carcinoma de células escamosas. Nosotros y otros hemos demostrado que el queratoacantoma y el carcinoma de células escamosas tienen firmas moleculares únicas.11, 12, 13, 14 Además, hay una preponderancia de pruebas de que el queratoacantoma y el carcinoma de células escamosas tienen características clinicopatológicas distintas.1, 2, 5, 6, 7 Los genes expresados diferencialmente y las vías biológicas moleculares enriquecidas que separan el queratoacantoma de la piel normal sugieren que el queratoacantoma es una neoplasia que puede retroceder debido a la regulación ascendente de la vía de muerte/apoptosis celular. Además, creemos que los queratoacantomas actínicos deben tratarse de manera conservadora y esperamos que nuestros hallazgos ayuden a prevenir tratamientos radicales, como la escisión amplia, la radioterapia y la disección del cuello para esta neoplasia escamosa involucionadora benigna.
