Objetivo/antecedentes: Las formas bacterianas deficientes en la pared celular (formas L) pueden ocurrir junto con resistencia a los factores que desencadenan su aparición. Es de interés estudiar la relación entre la transformación en forma L de Mycobacterium tuberculosis y la exposición de tolerancia al etambutol (EMB), un inhibidor de la síntesis de la pared celular.
Métodos: La variante en forma L se produjo a partir de una cepa de EMB sensible de M. tuberculosis a través de un protocolo de tratamiento de estrés criogénico y posteriormente se cultivó en medio semisólido Middlebrook 7H9, que contenía EMB en una concentración inhibitoria mínima de 2 mg/L. La susceptibilidad a EMB de la cepa parental y su variante en forma L se evaluó fenotípicamente y utilizando un ensayo de polimorfismo de longitud de fragmento de restricción de reacción en cadena de la polimerasa dirigido a una mutación en el fragmento de gen embB306.
Resultados: En contraste con la sensibilidad a EMB de la cepa parental, su variante en forma de L mostró resistencia fenotípica a altas concentraciones de EMB (16 mg/L), pero no se encontró la mutación en embB306. La observación por microscopía electrónica de la variante en forma de L mostró una población heterogénea de bacterias, con diferentes grados de deficiencia de la pared celular, así como células de tipo protoplásico sin paredes celulares. De especial interés fueron las estructuras en forma de cápsula observadas alrededor de las células en forma de L y la matriz en forma de biopelícula producida por la población en forma de L.
Conclusión: Sugerimos que la expresión de resistencia fenotípica a los EMB en M. tuberculosis puede estar asociada con alteraciones o pérdida de paredes celulares en bacterias de forma L, respectivamente, lo que resulta en la falta de un objetivo específico para la acción de los EMB. Además, la producción de estructuras en forma de cápsula y matriz de biopelícula por formas L podría contribuir a su resistencia y supervivencia en presencia de agentes antibacterianos.
