(Nota: En la siguiente descripción, el formato del ensayo es inmovilizar el ligando para medir el receptor libre en la muestra. Por el contrario, el receptor puede inmovilizarse para medir el ligando libre en la muestra, dependiendo de los materiales utilizados.)
La medición del receptor libre se logra exponiendo brevemente la mezcla de muestra a una fase sólida en la que el ligando está inmovilizado. El tiempo de exposición es crítico porque mantener el tiempo de interacción de la muestra a la fase sólida bastante corto resulta en una situación en la que la única unión significativa a la fase sólida proviene del receptor libre. El Ensayo de Exclusión Cinética contrasta con un ensayo de competencia en el que la solución equilibrada está en contacto con la fase sólida el tiempo suficiente para que el ligando de fase sólida compita por el receptor de la solución.
La ventaja de KinExA es que la señal del receptor capturado representa solo la concentración libre en la solución. Conocer la concentración de equilibrio del receptor permite determinar las constantes de unión como se describe en la página de Unión reversible.
Los instrumentos disponibles comercialmente para realizar ensayos KinExA (KinExA 4000, 3200 y 3100 de Sapidyne) utilizan una pequeña columna de partículas a través de la cual se pasa la muestra y otros reactivos. El tiempo de contacto de cualquier porción de la muestra con la fase sólida es entonces el tiempo de tránsito a través de la columna y se puede controlar por el caudal elegido (de alrededor de 50 milisegundos a aproximadamente un segundo).
Los sistemas con aglutinantes de rango nM o más ajustados estarán en el modo de ensayo de exclusión cinética (modo KinExA). Los aglutinantes más débiles todavía se pueden medir, pero pueden requerir un cuidado adicional para evitar perturbaciones de la muestra a causa de la medición. KinExA es particularmente adecuado para medir la afinidad y la cinética y también funciona como una plataforma de inmunoensayo mejorada. A continuación se incluye una explicación más detallada de las mediciones de KinExA.
