Abstrakti
Ivermektiinillä on voimakas systeeminen vaikutus lukuisiin sukkulamatoihin ja niveljalkaisiin, mutta näihin kahteen ryhmään kuuluu joitakin tärkeitä lajeja, kuten kissan kirppu, Ctenocephalides felis (Bouché), jotka näyttävät olevan tulenkestäviä sille. Pyrittäessä selvittämään, onko systeemisen aktiivisuuden puute C: tä vastaan. felis on spesifinen ivermektiinille, tai jos se on luokan laajuinen ilmiö, 20 avermektiinijohdannaista testattiin keinotekoisessa kalvon kirppusyöttöjärjestelmässä pitoisuuksilla 20, 10 ja 1 µg/ml. Tulokset osoittivat, että ivermektiinin LC90-arvo kirppuja vastaan oli 19, 1 µg/ml ja LC50-arvo 9, 9 µg / ml. Vain neljällä muista arvioiduista 19 yhdisteestä oli sekä lc90-että LC50-arvot ivermektiiniä voimakkaampia, ja silloinkin etu oli vaatimaton. Näiden neljän yhdisteen joukossa oli kaksinkertainen teho ivermektiiniin verrattuna, kun lc90-arvoja tarkasteltiin (vaihteluväli 9, 2–10.3 µg / ml) ja LC50 – arvoja tutkittaessa nousu oli kaksin-kahdeksankertainen (vaihteluväli 1, 23–5, 26 µg/ml). Oleandrosyylisokerien hallussapidolla tai määrällä makrosyklisessä selkärangassa ei ollut merkitystä kirppujen ylimääräiseen toimintaan, koska näiden neljän yhdisteen joukossa oli kaksi disakkaridia, monosakkaridi ja aglykoni. Myöskään sidosten jakautuminen C-22: n ja 23: n välillä ei edistänyt aktiivisuuden lisääntymistä, koska nämä molekyylit koostuvat jäsenistä, joilla on joko yksi-tai kaksoissidos. Yksi näistä avermektiinianalogeista skaalattiin ja testattiin ihon alle koiralla, jonka annos oli >100-kertainen kaupalliseen ivermektiiniannokseen verrattuna, eikä kirppua vastaan havaittu tehotonta vaikutusta. Johtopäätöksemme on, että parhaallakaan in vitro-avermektiinillä ei ole in vivo-potentiaalia tulla kaupalliseksi Oraaliseksi tai ihonalaiseksi kirppuhoidoksi seuraeläimille.
endektosidien avermektiiniluokalla on voimakas systeeminen vaikutus lukuisiin sukkulamatoihin ja niveljalkaisiin (Egerton et al. 1979, 1980). Erityisen silmiinpistävää, esimerkiksi, ovat lähes absoluuttinen teho vastaan helmintit kuten epäkypsä sydänmatoa, Dirofilaria immitis, koirilla 6.0 µg/kg (Campbell 1989) ja hyönteisiä, kuten toukat yhteisen karjan grub, Hypoderma lineatum (Villers), naudoilla 0.2 µg/kg (Drummond 1984). Tästä valtavasta tehosta huolimatta näiden ryhmien sisällä on kuitenkin muita organismeja, jotka näyttävät olevan tulenkestäviä ivermektiinille. Kissan kirppu, Ctenocephalides felis (Bouché), on kliinisesti merkittävä esimerkki. Ivermektiiniä annettiin suun kautta viikoittain 0, 5 mg/kg tai kerran vuorokaudessa 0.05 mg / kg ja havaittu olevan inaktiivinen tätä loista vastaan koirilla (Blair et al. 1984). Banks ym. (2000)ja Shoop et al. (2001) vahvisti itsenäisesti nämä tulokset osoittamalla, että ivermektiinillä on heikko systeeminen aktiivisuus kissan kirppua vastaan keinotekoisissa kalvon kirppusyöttötesteissä.
pyrittiin selvittämään, liittyykö kirppuihin kohdistuvan systeemisen aktiivisuuden puute ivermektiiniin vai onko kyseessä luokan laajuinen ilmiö, testattiin 20 avermektiiniä keinotekoisessa kalvoruokintajärjestelmässä. Testattujen avermektiinien strategisesti valittu sarja sisälsi edustajia useimmista kemiallisesti käytettävissä olevista paikoista, joita on hyödynnetty makrosyklissä. Ryhmään kuuluvat kaikki luonnossa esiintyvät avermektiinit sekä biologisesti tärkeiden aglykoni -, monosakkaridi-ja disakkaridisarjojen puolisynteettiset jäsenet. Mukana olivat myös kaupallistetut yhdisteet abamektiini, ivermektiini, milbemysiini D ja selamektiini. Tässä artikkelissa esittelemme näiden avermektiiniperheen jäsenten suhteelliset potenssit kirppuja vastaan testaamalla keinotekoisessa kalvojärjestelmässä ja osoitamme in vivo-tehokkuustulokset koiralta, joka on annosteltu ihon alle yhdellä voimakkaimmista testatuista avermektiineistä.
materiaalit ja menetelmät
vinttikoira.
käyttämämme keinotekoinen kalvokirppusyöttöjärjestelmä on muunnos Jay R. Georgin valmistamasta ”keinotekoisesta koirasta” (FleaData, Freeville, NY). Tämä keinotekoinen kalvojärjestelmä suunniteltiin kasvattamaan kirppuja, mutta ehdotettiin myös, että se voisi testata systeemisten hyönteismyrkkyjen vaikutuksia (Wade and Georgi 1988 ja Pullen and Meola 1996), ja sitä on käytetty löytämään romaani indole terpene, nodulisporiinihappo a (Shoop et al. 2001). Yhteistyössä Jay R. Georgin kanssa muokkasimme tekokoiran. Tämä uusi järjestelmä (Kuva. 1) sai nimityksen ”Greyhound”, koska se oli suunniteltu tehokkaammaksi, helpommaksi asentaa ja mahdollisti suuremman määrän yhdisteitä testattavaksi samanaikaisesti. Toisin kuin keinotekoinen koira, joka sisältää vain 25, 5-cm häkit ripustettu yksittäin alla Lämmitetty Plexiglas kotelo, uusi järjestelmä sisältää irrotettava 59 x 38-cm manifold tilalla 104, 2,5-cm häkkejä. Korvasimme myös alumiiniset nondisposable ruokinta hihat muovi CVC hihat (Costar, Cambridge, MA). Muovihihat hävitettiin jokaisen käyttökerran jälkeen, jotta huumeiden aiheuttaman saastumisen todennäköisyys olisi mahdollisimman pieni.
Keinotekoinen kalvosyöttöjärjestelmä, jota käytetään systeemisen kirpputehon testaamiseen.
Keinotekoinen kalvosyöttöjärjestelmä, jota käytetään systeemisen kirpputehon testaamiseen.
Kirppujen Kasvatus.
Kirppusiirtokuntamme säilyi kissoilla, joita säilytettiin Laitoseläinten hoito-ja Käyttökomiteamme mukaan. Kissoilta kerätyt munat inkuboitiin 28°C: n ja 85-prosenttisen RH: n lämpötilassa väliaineessa, joka koostui kahdeksasta osasta hiekkaa ja yhdestä osasta pakastekuivattua naudan verta (California Spray Dry Company, Stockton, CA). Tässä tutkimuksessa käytetyt kirput olivat ilmaantuneet pupariastaan 48 tunnin kuluessa.
Yhdistevalmiste.
Avermektiineille testattiin pitoisuudet 20, 10 ja 1 µg/ml. Kahta toistoa jokaisesta yhdisteestä testattiin rinnakkain vertailussa käyttäen kahta ruokintajärjestelmäämme. Käytetty kantaja-aine oli polyetyleeniglykoli 400 ja dimetyylisulfoksidi (2:1). Heparinisoitua naudan verta käytettiin kymmenen mikrolitraa ajoneuvoa millilitraa kohti. Kaikki yhdisteet olivat Merck-kemistien fermentoimia tai synteettisesti muuntamia paitsi selamektiini.
selamektiinin esipuhdistus eteni seuraavasti. Kuusi ampullia vallankumousta (240 mg kukin) laimennettiin minimaalisissa määrissä CH2Cl2: ta ja ladattiin silica-geelialustalle (4 tuumaa korkea). Gradientti eluutio,
.
,
.
.
.
:
–
.
.
.
.
:
–
.
.
.
.
:
–
.
.
.
.
:
–
.
.
.
.
:
–
.
.
.
.
. (Lehdistötiedote).
.
.
.
:
–
.
.
.
.
:
–
.
.
.
.
(painettuna).
.
.
.
:
–
.
