muunnettua Knottin menetelmää käytetään mikrofilarioiden, erityisesti Sydänmatotartunnan Dirofilaria immitis, pitämiseen ja tunnistamiseen. Se on erotettava ei-patogeenisestä dipetalonema reconditumin mikrofilariasta (lyhyemmin ’dipet’).
samanaikaisesti voidaan tehdä suora verinäytteen Otto. Se on nopea, ei-pitoisuus testi mikrofilaria. Dirofilaria ja Dipetti eroavat toisistaan motiliteettikuvionsa perusteella.
nämä testit tulee tehdä aina, kun potilas tekee heartworm antigeenipositiivisen testin, tai on syytä epäillä, että koiralla on tai on ollut sydänmatotauti aiemmin. Läsnäolo Dirofilaria vaikuttaa kurssin ja / tai valinta hoidon.
Knottin testi voidaan tehdä tekemättä suoraa preparointia, mutta ei koskaan tehdä suoraa preparointia ilman Knottin testiä. Knott ’ s on herkempi testi, koska se konsentroi mikrofilaria, joten ne ovat vähemmän todennäköisesti ohi mikroskooppisen tutkimuksen aikana.
menettely suoraan kokeeseen:
yksinkertainen. Aseta pisara verta, mieluiten EDTA-putkesta tai heparinisoidusta ruiskusta, liukumäen keskelle. Pudota kansi lipsahdus päälle ja tutkia mikroskoopilla 10x teho. Dirofilaria on paikallaan, kiemurteleva liike; Dipetalonema näytteille nopeampi, suuntaava liike ja usein ampua suoraan pois kentän.
muutetun Knottin tekniikan menettely:
varmista, että käytät suojakäsineitä. 15 ml: n sentrifugiputkea käyttäen lisätään noin 10 ml 2% formaliinia (tätä voidaan ostaa kaupallisesti) 1 ml: aan antikoagulanttiverta. Aseta peukalo suojatun putken päälle ja käännä ylösalaisin useita kertoja, jotta seos sekoittuu perusteellisesti. Sentrifugoidaan 5 minuuttia nopeudella 1000-1500 kierrosta minuutissa.
putkilon pohjalla pitäisi olla kehräämisen jälkeen valkopurkki. Hävitä supernatantti asianmukaiseen Vaarallisen jätteen säiliöön.
lisätään pitkällä lasi-tai muovipipetillä pisara uutta metyleenisinistä tahraa
sekoita pipetillä tahra sedimenttiin
lisää pisara tätä seosta dian keskelle. Pudota suojalappu päälle. Tutkitaan mikroskoopilla 10x teholla.
toisin kuin suoralla preparaatiolla, mikrofilaria esiintyy paikallaan pysyvänä. Dirofilaria on erotettava dipetalonema koon ja muodon perusteella. Käytä seuraavaa taulukkoa apuna eriyttämisessä:
parametri |
D. immitus |
D. reconditum |
Pituus (mikronia) |
||
leveys (mikronia) |
||
muoto (etupää) |
kapeneva |
blunt |
muoto (vartalo) |
suora |
kaareva |
muoto (pyrstö) |
suora |
Nappikoukku |
läsnä |
muutama tai monta |
muutama |
liike |
paikallaan |
liikkuu liukumäen yli |
(Cornellin yliopisto)
toinen viileä testi mikrofilarialle
täytä mikrohematokriittiputki ja pyöräytä alas ikään kuin tekisit pcv: n.
aseta putki liukumäelle ja laita se mikroskoopille. Keskity buffy coat 10x power-jos koira on heartworm positiivinen ja on kiertävä microfilaria, voit nähdä mikrofilaria kiemurtelee ympäri buffy coat!