Activité systémique des Avermectines Contre la Puce du Chat (Siphonaptera: Pulicidae)

Résumé

L’Ivermectine a une activité systémique puissante contre de nombreuses espèces de nématodes et d’arthropodes, mais il existe certaines espèces importantes dans ces deux groupes, telles que la puce du chat, la puce du chat, la puce du chat, la puce du chat, Ctenocephalides felis (Bouché), qui lui semblent réfractaires. Dans le but de déterminer si l’absence d’activité systémique contre C. felis est spécifique de l’ivermectine, ou s’il s’agit d’un phénomène à l’échelle de la classe, 20 dérivés de l’avermectine ont été testés dans un système d’alimentation par puces à membrane artificielle à des concentrations de 20, 10 et 1 µg /ml. Les résultats ont montré que l’ivermectine avait des valeurs de CL90 et de CL50 contre les puces de 19,1 et 9,9 µg / ml, respectivement. Seulement quatre des 19 autres composés évalués possédaient à la fois des valeurs de CL90 et de CL50 plus puissantes que l’ivermectine et même alors, l’avantage était modeste. Parmi ces quatre composés, il y avait une augmentation de la puissance de deux fois par rapport à l’ivermectine lorsque les valeurs de CL90 étaient considérées (plage, 9,2–10.3 µg/ml) et une augmentation de deux à huit fois lorsque les valeurs de CL50 ont été examinées (plage, 1,23-5,26 µg/ml). Ni la possession ni le nombre de sucres oléandrosyliques sur le squelette macrocyclique n’étaient pertinents pour l’activité supplémentaire des puces, car parmi ces quatre composés se trouvaient deux disaccharides, un monosaccharide et une aglycone. De plus, la disposition des liaisons entre C-22 et 23 n’a pas contribué à l’augmentation de l’activité car ces molécules comprennent des membres avec des liaisons simples ou doubles. L’un de ces analogues de l’avermectine a été mis à l’échelle et testé par voie sous-cutanée chez un chien à > 100 fois la dose d’ivermectine commerciale et une efficacité nulle a été observée contre la puce. Nous concluons que même la meilleure avermectine in vitro n’a pas le potentiel in vivo de devenir un traitement commercial des puces par voie orale ou sous-cutanée pour les animaux de compagnie.

La classe des endectocides d’avermectine a une activité systémique puissante contre de nombreuses espèces de nématodes et d’arthropodes (Egerton et al. 1979, 1980). Particulièrement frappantes, par exemple, sont les efficacités quasi absolues contre les helminthes tels que le ver du cœur immature, Dirofilaria immitis, chez les chiens à 6,0 µg/ kg (Campbell 1989) et contre les insectes tels que les larves du ver du cœur commun, Hypoderma lineatum (Villers), chez les bovins à 0,2 µg/ kg (Drummond 1984). Cependant, malgré cette puissance énorme, il existe d’autres organismes au sein de ces groupes qui semblent réfractaires à l’ivermectine. La puce du chat, Ctenocephalides felis (Bouché), en est un exemple cliniquement pertinent. L’ivermectine a été administrée par voie orale une fois par semaine à 0,5 mg/kg ou une fois par jour à 0.05 mg/kg et observé inactif contre ce parasite sur les chiens (Blair et al. 1984). Banks et coll. (2000) et Shoop et al. (2001) ont corroboré indépendamment ces résultats en montrant que l’ivermectine a une faible activité systémique contre la puce du chat dans des tests d’alimentation par puces à membrane artificielle.

Dans le but de déterminer si l’absence d’activité systémique contre les puces est spécifique à l’ivermectine ou s’il s’agit d’un phénomène à l’échelle de la classe, 20 avermectines ont été testées dans un système d’alimentation par puces à membrane artificielle. La série d’avermectines sélectionnées stratégiquement testée contenait des représentants de la plupart des sites chimiquement accessibles qui ont été exploités autour du macrocycle. Le groupe comprend toutes les avermectines naturelles, ainsi que les membres semi-synthétiques des séries aglycone, monosaccharide et disaccharide d’importance biologique. Les composés commercialisés abamectine, ivermectine, milbémycine D et sélamectine ont également été inclus. Dans cet article, nous présentons les puissances relatives de ces membres de la famille des avermectines contre les puces grâce à des tests dans un système membranaire artificiel et montrons les résultats d’efficacité in vivo d’un chien administré par voie sous-cutanée avec l’une des avermectines les plus puissantes testées.

Matériaux et méthodes

Le Lévrier.

Le système d’alimentation des puces à membrane artificielle que nous avons utilisé est une modification du « chien artificiel » fabriqué par Jay R. Georgi (FleaData, Freeville, NY). Ce système de membrane artificielle a été conçu pour repousser les puces, mais il a également été suggéré qu’il pourrait tester les effets des insecticides systémiques (Wade et Georgi 1988 et Pullen et Meola 1996) et il a été utilisé pour découvrir le nouveau terpène indole, l’acide nodulisporique A (Shoop et al. 2001). En collaboration avec Jay R. Georgi, nous avons modifié le chien artificiel. Ce nouveau système (Fig. 1) a reçu la désignation « Greyhound » parce qu’il a été conçu pour être plus efficace, plus facile à mettre en place et permettait de tester simultanément un plus grand nombre de composés. Contrairement au chien artificiel, qui ne contient que des cages de 25, 5 cm suspendues individuellement sous une enceinte en plexiglas chauffée, le nouveau système contient un collecteur amovible de 59 par 38 cm contenant des cages de 104, 2,5 cm. Nous avons également remplacé les manchons d’alimentation non jetables en aluminium par des manchons CVC en plastique (Costar, Cambridge, MA). Les manchons en plastique ont été éliminés après chaque utilisation afin de minimiser le risque de contamination par des médicaments.

Élevage de Puces.

Notre colonie de puces a été maintenue sur des chats hébergés selon notre Comité institutionnel de Soins et d’utilisation des Animaux. Les œufs prélevés sur des chats ont été incubés à 28 °C et 85% d’humidité relative dans un milieu composé de huit parties de sable et d’une partie de sang bovin lyophilisé (California Spray Dry Company, Stockton, CA). Les puces utilisées dans cette étude étaient sorties de leur puparie en 48 h.

Préparation du composé.

Les avermectines ont été testées à des concentrations de 20, 10 et 1 µg/ml. Deux réplications de chaque composé à chaque niveau ont été testées lors d’une comparaison côte à côte à l’aide de deux de nos systèmes d’alimentation. Le véhicule utilisé était le polyéthylène glycol 400 et le diméthylsulfoxyde (2:1). Dix microlitres de véhicule par millilitre de sang bovin hépariné ont été utilisés. Tous les composés ont été fermentés ou synthétiquement modifiés par les chimistes de Merck, à l’exception de la sélamectine.

La purification préliminaire de la sélamectine s’est déroulée comme suit. Six ampoules de révolution (240 mg chacune) ont été diluées dans des volumes minimes de CH2Cl2 et chargées sur un tampon de gel de silice (4 pouces de haut). Élution par gradient,

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