antimikrobiális, antioxidáns és sebgyógyító tulajdonságai Kigelia africana (Lam.) Beneth. és Strophanthus hispidus DC.

absztrakt

a különböző típusú sebek mikrobiális fertőzései kihívást jelentenek a sebek kezelésére és a sebgyógyulásra. A vizsgálat célja a Kigelia africana metanol levél-és szárkéregkivonatainak, valamint a Strophanthus hispidus metanol levél-és gyökérkivonatainak antimikrobiális és antioxidáns tulajdonságainak vizsgálata, valamint a kivonatok sebgyógyító tulajdonságainak meghatározása volt. A metanol kivonatok antimikrobiális aktivitását két Gram-pozitív és két Gram-negatív baktérium és egy gomba ellen határoztuk meg agardiffúziós és mikrohígítási módszerekkel. Az antioxidáns aktivitást 1,1-difenil-2-pikril–hidrazil (DPPH) módszerrel határoztuk meg. A kivonatok sebzárási sebességre gyakorolt hatását a kimetszett seb modelljével, valamint a kezelt és kezeletlen sebszövetek kórszövettani vizsgálatával vizsgáltuk. A K. africana levélkivonat MIC–értéke a vizsgált organizmusokkal szemben 2,5–7,5 mg/mL, a szár kéregkivonat pedig 2,25-7 volt.5 mg / mL. A S. hispidus levélkivonat MIC–tartománya 2,5–7,5 mg/mL, a gyökérkivonat esetében pedig 2,5-10 mg/mL volt. A K. africana levél-és szárkéregkivonat IC50 értéke sorrendben 56,9, illetve 13,7 6G/mL, az S. hispidus levél-és gyökérmintája pedig 49,8, illetve 45,1 g/mL volt. A K. africana kivonatok (7,5% w/w) szignifikáns () sebösszehúzódást mutattak a 7.napon, a sebzáródás 72% – ával, míg a 11. napon jelentős () sebösszehúzódásokat figyeltek meg a K. africana szár kérgére, a S. hispidus levél-és gyökérkivonataira. Az extraktumokkal kezelt sebszövetek a kezeletlen sebszövetekhez képest jobb kollagenációt, re-epitheliaziót és gyors granulációs képződést mutattak. A kivonatok alkaloidokat, szaponinokat, tanninokat, flavonoidokat, szénhidrátokat és szapogenetikus glikozidokat tartalmaznak. A kivonatok HPLC ujjlenyomatát fejlesztették ki. A K. africana és S. hispidus levél -, szár-és gyökérkivonatai antimikrobiális, antioxidáns és fokozott sebgyógyító tulajdonságokkal rendelkeznek, és ezek indokolhatják a növények gyógyászati felhasználását mikrobiális fertőzések és sebek kezelésére.

1. Bevezetés

a sebet leggyakrabban akkor használják, amikor a bőr vagy az alatta lévő szövetek vagy szervek ütéssel, vágással, rakétával vagy szúrással történő sérülésére utalnak. A seb magában foglalja a vegyi anyagok, a hideg, a súrlódás, a hő, a nyomás és a sugarak által okozott bőrkárosodást, valamint a belső körülmények, például a nyomásfekélyek és fekélyek bőrön való megnyilvánulását . A sebek óriási hatással vannak a gyógyító egészségügyi gazdaságra. A krónikus sebek jelentős egészségügyi terhet jelentenek, és elvezetik a világ egészségügyi erőforrásait, beleértve Ghánát is .

a sebek egyik fő problémája a fertőzés magas kockázata; ezért ha a fertőzést okozó mikroorganizmusok ellen aktív hatóanyagot használnak a gyógyulási folyamatban, akkor ez segít csökkenteni a fertőzés kockázatát, és a sebgyógyulás teljes ideje jelentősen csökkenthető. Például a baktériumok nagyon könnyen bejuthatnak a törött bőrön keresztül, és behatolhatnak a test többi részébe. A baktériumok a sérülést követő 48 órán belül kolonizálják a sebeket, és a baktériumok, mint például a Staphylococcus aureus, a Pseudomonas aeruginosa és a Streptococcus spp fertőzést okozhatnak, és ez meghosszabbíthatja a sebgyógyulás gyulladásos szakaszát . Ezért megfelelő antimikrobiális szerek helyileg vagy szisztematikusan alkalmazhatók a sebek fertőzésének megelőzésére és a sebgyógyulási folyamat felgyorsítására.

a gyulladás folyamata általában biológiailag aktív mediátorok felszabadulásához vezet, amelyek neutrofileket, leukocitákat és monocitákat vonzanak a sebterületre, és ezek fagocitózis útján megtámadják az idegen törmeléket és mikroorganizmusokat. Ez oxigénmentes gyökök, például hidrogén-peroxid, szuperoxid-anion és hidroxil-anion termeléséhez vezet, és ezeknek a szereknek a feleslege szövetkárosodást okoz emberben vagy állatban, ha túlterhelik a gazdaszervezet természetes antioxidánsait, például a katalázt, a szuperoxid-diszmutázt és a glutation-peroxidázt. Ezért az antioxidánsok megakadályozzák a szabad gyökök aktivitását, ezáltal megakadályozzák a sejtek és szövetek károsodását, védelmet nyújtva az emberi és állati alanyoknak, valamint fokozzák a fertőzött és nem fertőzött sebek gyógyulását .

Kigelia africana (Lam.) Beneth. a Bignoniaceae családhoz tartozik. A Ghánai helyi Asante-Twi-ben “Nufutene” néven ismert. Széles körben elterjedt Afrikában, beleértve Ghánát, Sierra Leonét, Gambiát, Szudánt és Nigériát, és nedves szavannákban és folyami testek közelében található, ahol bőségesen előfordul . Kezelésére használják bőrbetegségek, beleértve a gombás fertőzések, kelések, pikkelysömör és ekcéma, lepra, szifilisz, és a rák. A gyökerek, a fa és a levelek kigelinont, vernolsavat, kigelint, iridoidokat, luteolint és 6-hidroxiluteolint tartalmaznak . Az iridoidok antibakteriális hatást fejtenek ki .

Strophanthus hispidus DC. az Apocynaceae családhoz tartozik, a helyi Asante-Twi-ben “Maatwa” – nak hívják. Megtalálható egész Afrikában és szavanna erdők Ghána, Szenegál, Szudán, Kongó DR, Uganda és Tanzánia. Számos gyógyászati felhasználása van, mint például a fekete nyakú kobra mérgének ellenszere, szifilisz fekélyek, csontos szifilisz, valamint guinea-féreg sebek és sebek kezelésére . A növény amorf glikozidot (pszeudo-strofantint) tartalmaz nehézolajjal, két alkaloidot (trigonellint és kolint), gyantát, nyálkát és egy ramnózcukrot . A tanulmány célja a K. africana metanol levél és szár kéregkivonatainak, valamint a S. hispidus metanol levél és gyökérkivonatainak antimikrobiális, antioxidáns és sebgyógyító tulajdonságainak vizsgálata.

2. Anyagok és módszerek

2.1. Növényi anyagok és vegyi anyagok

a K. africana szár kéregét és leveleit, valamint a S. hispidus leveleit és gyökereit 2011 májusában gyűjtötték össze az Ashanti Régió Atwima-Kwanwoma körzetében található Krofrom-ból, és a Ghánai Egyetem botanikai Tanszékének Dr. A. Asase hitelesítette. A növények utalványmintáit a Ghánai herbáriumban helyezték el, Ghánai Egyetem, Ghána. A különböző növényi részeket szobahőmérsékleten (28-30 db C) szárítottuk két hétig. A szárított növényi részeket ezután porított anyagokká őröljük. Eltérő rendelkezés hiányában az összes vegyszert a Sigma-tól (Deisenhofen, Németország) vásárolták.

2.2. Kivonatok előállítása

húsz gramm porított K. africana leveleket adunk hozzá 300 mL 70% – os metanollal és extraháljuk Ultra-Turrax T 50 (Janke & Kunkel, Labortenik, Németország) jéghűtéssel 24000 fordulat / perc sebességgel 3-5 percig. A kapott elegyet ezután a 10.számú Whatmann szűrőpapírral szűrjük. A rotációs bepárlóban ezután a felülúszót 40 6c C alá koncentráltuk, majd liofilizáltuk. Az eljárást megismételtük az összes többi porított növényi anyagra (K. africana szár kérge, S. hispidus levelek és gyökerek). A K. africana levélkivonatának (KAL) és a szár kéregkivonatának (KASB), valamint az S. hispidus levélkivonatának (SHL) és gyökérkivonatának (SHR) hozama 4,3, 12,8, 13,0 és 11,4 tömegszázalék volt (a szárított anyaghoz viszonyítva).

2.3. Előzetes fitokémiai szűrés

fitokémiai szűrést végeztünk a K. africana metanol levél-és szárkéregkivonatain, valamint az S levelein és gyökerein. hispidus jelenlétének megállapítására keményítő, tanninok, glikozidok (sapogenetikus, antracén, és cianogenetikus), flavonoidok, szteroidok, és alkaloidok. A Tannintartalmat a Glasl módszerével határoztuk meg, referenciavegyületként pirogallolt (Merck, Darmstadt, Németország, 99,5% – os tisztaságú, HPLC) használva.

2.4. HPLC

kivonatok Ujjnyomtatása a kivonatok (KAL, KASB, SHL és SHR) HPLC ujjnyomtatását egy Thermo Finnigan HPLC rendszeren végeztük Hypersil Gold C18 fordított fázisú oszlop ( mm) alkalmazásával. A kivonatok koncentrációja 10 mg / mL volt. HPLC optimális körülmények: befecskendezési térfogat: 10 6L, detektálási hullámhossz: 254 nm, Mozgófázis: metanol : víz/50 : 50 (izokratikus állapot), hőmérséklet: 22 C, szivattyúnyomás: 28 Mpa, áramlási sebesség: 1 mL/perc, üzemidő: 10 perc.

2.5. A kivonatok antimikrobiális aktivitásának meghatározása

2.5.1. Antimikrobiális érzékenységi teszt

a kivonatok (KAL, KASB, SHL és SHR) és a referencia gyógyszerek (kloramfenikol és klotrimazol (Sigma, Deisenhofen, Németország) antimikrobiális aktivitását Agyare és kollégái által leírt módszer szerint határoztuk meg . Tápanyag-agart (Oxoid Limited, Egyesült Királyság) és sabouraud agart (Oxoid Limited, Egyesült Királyság) használtak mind az antibakteriális, mind a gombaellenes hatás meghatározására. Száz mikrolitert (106 cfu/mL) használtunk a vizsgált organizmusokból (Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Bacillus subtilis NCTC 10073 és Candida albicans klinikai gombaellenes szer) a tápanyag-agar és a sabouraud agar lemezek vetéséhez. E lemezek mindegyikében négy (4) egyenlő távolságra lévő, 8 mm átmérőjű kutat vágtunk ki steril parafafúróval és különböző koncentrációjú dimetil-szulfoxidban (DMSO) oldott kivonatokkal és referenciagyógyszerekkel töltött kutakkal, és hagyjuk szobahőmérsékleten (28-30 kb C) 1 órán át diffundálni. A növekedésgátlás zónáit 24 órás inkubáció után 37 (a baktériumok esetében), 3 nap (a gomba esetében) 30 (a baktériumok esetében) C hőmérsékleten mértük. A DMSO aktivitását meghatároztuk, és megállapítottuk, hogy nem mutat aktivitást a vizsgált organizmusokkal szemben.

2.5.2. Mikrodilúciós módszer

a kivonatok (KAL, KASB, SHL és SHR) Mic-jeit a vizsgált baktériumokkal szemben az Agyare et al.által leírt módosított mikrodilúciós technikával határoztuk meg. és Eloff . Az extraktumok vizsgálati oldatait (100 mg/mL) DMSO-val készítettük el, és a vizsgálati oldatot (25-100 6L) sorozatosan 100 g/mL-re hígítottuk, és a mikrolemezek mindegyik kútjába 100 ml (106 cfu/mL) táptalajban (Oxoid Limited, Egyesült Királyság) tenyésztett tesztbaktériumot adtunk. A fedett mikrolemezeket 37 6CC-on 24 órán át inkubáltuk. a növekedés jelzésére 30 ml 3-(4,5-dimetiltiazol-2-Il)-2,5-difeniltetrazolium-bromidot vízben oldottunk a mikrolemez kutakba, és 37 oc-on 30 percig inkubáltuk. Teszt gombaellenes szer (C. albicans) termesztették sabouraud dextróz húsleves (Oxoid Limited, Egyesült Királyság), majd inkubáltuk 3 napig 30 db-On C. A kal, KASB, SHL és SHR kivonatok Mic-jét a tesztgomba ellen a fonalas gombák klinikai laboratóriumi szabványainak nemzeti bizottságában leírt irányelvek szerint határoztuk meg. Az extraktumoknak a vizsgált organizmusokkal szembeni minimális gátló koncentrációját azon kivonatok minimális koncentrációjaként határoztuk meg, amelyek nem mutattak mikrobiális növekedést a táptalajhoz adott MTT hozzáadása és 37-20 percig tartó inkubálás után . A fenti kísérleteket háromszor megismételtük.

2.6. A szabad gyökök takarítási aktivitásának meghatározása

a kivonatok szabad gyökök takarítási aktivitását Chizzola és kollégái 1, 1-difenil-2-pikril-hidrazil (DPPH) módszerrel határozták meg. 0,1 mM-es DPPH-oldatot készítettünk metanolban, és ebből az oldatból 10 ml-t adtunk hozzá 100 MHz-es metanolkivonathoz, különböző koncentrációban, 96 lyukú mikrotiteres lemezeken. A lemezeket 30 másodpercig ráztuk, majd 30 perc elteltével az abszorbanciát 517 nm-en mértük. A radical scavenging gátlási százalékát ( % ) a következő egyenlet segítségével számítottuk ki. A gátlás, ahol a kontroll abszorbanciája, a minta abszorbanciája 517 nm-en és gátló koncentrációban, IC50 az abszorbanciát 50% – kal csökkentő mennyiség (~g/mL).

2.7. A sebgyógyulási tulajdonságok értékelése (kivágási seb modell)

2.7.1. Kísérleti állatok

harmincöt (nőstény Sprague Dawley) patkányt rozsdamentes acél ketrecekben tartottak, és normál kereskedelmi patkány étrenddel (GAFCO, Tema, Ghána) etettek, ad libitum vizet adtak, és laboratóriumi körülmények között tartották (hőmérséklet 28-30 C, Relatív páratartalom 60-70%, normál világos-sötét ciklus). Egy nappal a kísérlet előtt a patkányokat a laboratóriumba vitték, és hozzászoktak a kísérletező kezeléshez és a készülékhez, hogy minimalizálják a stressz és az újdonság hatását. Az ezekben a vizsgálatokban alkalmazott összes eljárás és technika összhangban volt a National Institute of Health Guidelines for the Care and Use of Laboratory Animals (NIH, Department of Health Services publication no.83-23, felülvizsgált 1985). A tanulmány jegyzőkönyveit az osztály Etikai Bizottsága hagyta jóvá.

2.7.2. Kivágási seb modell

a 115-120 g tömegű állatokat (Sprague Dawley nőstény patkányokat) subcutan 120 mg/ttkg ketaminnal érzéstelenítettük a sebek kialakulása előtt. Az állatok hátsó szőrzetét borotvapengékkel körülbelül 40 mm-es kör átmérőjűre borotválták, és a borotvált bőrön körvonalazták a seb várható területét. A területeket 70% – os etanollal megtisztítottuk, mielőtt a kivágási sebeket Bhakta et al. . A jelölések mentén bőrsebeket hoztak létre fogazott csipesszel, sebészeti pengékkel és hegyes ollóval. Az összes sebet nyitva hagyták, és az állatokat hét (7) csoportra osztották, egyenként öt állatból. Az első csoportot helyileg 1 tömegszázalékos ezüst-szulfadiazin kenőccsel (Arytons Drugs, Ghána) kezeltük referencia gyógyszerként . A második csoportot vizes krémmel (önmagában vivőanyaggal) kezeltük. A harmadik csoportot kezeletlenül hagyták, és lehetővé tették a normális sebgyógyulást. Az utolsó négy csoportot 7,5 tömeg% extraktum krémekkel (KAL, KASB, SHL, SHR) kezeltük. A sebkezelés a seb létrehozását követő 2.napon kezdődött. A kivonatokat és a referencia-gyógyszereket helyileg alkalmazták a sebekre 24 óránként 24 napon keresztül. A kezelés során a sebterületekről méretezett fényképeket készítettek (nagy felbontású digitális fényképezőgép segítségével), milliméteres skála mellett, 48 óránként, a sebkezelés első napjától kezdve. A sebterületeket kétnaponta határozták meg a 24.napig.

2.8. Kórszövettani vizsgálatok

kezeletlen és kezelt állatokból Sebszövetmintákat vettek a gyógyulási folyamat során a 14.napon. A keresztmetszeti teljes vastagságú sebheg, körülbelül 6 mm vastag szakaszok minden csoportból, a kísérlet végén összegyűjtöttük a hisztopatológiai változások értékelésére . A mintákat 10%-os pufferolt formalinban rögzítettük 24 órán keresztül, majd etanol-xilol sorozatúoldatok sorozatával dehidratáltuk, feldolgoztuk és paraffinnal blokkoltuk 40-60 ft-on, majd 5-6 mm vastag szakaszokra osztottuk. A részeket hematoxilin és eozin folttal, Van Gieson foltjával és toluidinkék folttal festették. Hematoxilin és eozin festett szakaszok és Van Gieson festett szakaszok ellenőrizték a kollagén lerakódást. A hízósejtek festésére toluidinkék festett szakaszokat használtunk .

2.9. Statisztikai elemzés

GraphPad Prism 5.0 verzió Windows (GraphPad Software, San Diego, CA, USA) minden statisztikai elemzéshez használták. Az adatokat átlag SEM ()-ként mutatjuk be, és egyirányú ANOVA-val elemezzük, majd Dunnet többszörös összehasonlítási tesztje. * , * * és * * * statisztikailag szignifikánsnak minősültek minden elemzésben. A grafikonokat a Sigma Plot for Windows 11-es verziójával ábrázoltuk.0 (Systat Software Inc., Németország).

3. Eredmények

3.1. Előzetes fitokémiai szűrés

a K. africana és a S. hispidus levél-és szárkéregében tanninokat (változó mennyiségben), szteroidokat, szaponinokat, szapogenetikus glikozidokat és szénhidrátokat találtak, míg a két növény levelei flavonoidokat tartalmaznak. Az alkaloidok mind a S. hispidus levelében, mind gyökerében jelen voltak (1.táblázat).

3.2. HPLC

kivonatok Ujjnyomtatása a kivonatok (KAL, KASB, SHL és SHR) HPLC ujjnyomtatását úgy határoztuk meg, hogy azonosítás és minőségellenőrzés céljából azonosítsuk a különböző kivonatokban található főbb csúcsokat (vegyületeket) (1., 2., 3. és 4. ábra).

ábra 1

A K. africana metanol levélkivonatának (KAL) HPLC-kromatogramja (ujjnyomtatás) 254 nm-en.

Figure 2

HPLC chromatogram (finger-printing) of methanol stem bark extract (KASB) of K. africana at 254 nm.

Figure 3

HPLC chromatogram (finger-printing) of methanol leaf extract (SHL) of S. hispidus at 254 nm.

ábra 4

az S. hispidus metanol gyökérkivonatának (SHR) HPLC-kromatogramja (ujjnyomtatás) 254 nm-en.

3.3. Antimikrobiális aktivitás

a metanolkivonatok (KAL, KASB, SHL és SHR) a vizsgált organizmusokkal (E. coli, P. aeruginosa, S. aureus, B. subtilis és C. albicans) szemben különböző átlagos gátlási zónákkal, míg a P. aeruginosa kevésbé érzékeny a kivonatokra. A K minimális gátló koncentrációtartománya. az africana kivonatok (KAL és KASB) a vizsgált organizmusokkal szemben 2,25-7,5 mg/mL, az S. hispidus kivonatoké (SHL és SHR) pedig 2,5-10 mg/mL volt (2.táblázat). Az agar diffúziós módszer tekintetében a 20 és 50 mg/mL koncentrációjú kivonatok (KAL, KASB, SHL és SHR) nagyobb gátlási zónákat mutatnak a vizsgált organizmusokkal szemben, mint a 10 mg/mL koncentráció (3.táblázat).

3.4. Antioxidáns aktivitás

az összes kivonat bizonyos szintű antioxidáns tulajdonságokat mutatott, a KASB-nek a legalacsonyabb IC50 és a Kal-nak a legalacsonyabb szabad takarító aktivitása volt (4.táblázat és 5. ábra).

ábra 5

A K. africana metanollevélkivonatának (KAL) és a K. africana törzskéregkivonatának (KASB) és az S. levélkivonatának (SHL), gyökérkivonatának (SHR) szabadgyök-takarítási tevékenysége. hispidus és-tokoferol (referencia antioxidáns) DPPH módszerrel meghatározva.

3.5. Sebgyógyulási aktivitás (Sebzárási sebesség)

az összes kivonattal (KAL, KASB, SHL és SHR) kezelt csoport szignifikáns aktivitást mutatott a sebzárási sebességre, összehasonlítva a kezeletlenekkel és a vivőanyaggal , egyedül a Kal-val és az SHL-vel, amelyek jelentős hatással voltak ( és, ill.) a sebzáródás sebességéről a kezelést követő 7.és 15. napon (6. és 8. ábra, 5. táblázat), valamint a sebgyógyulásra jelentős hasonló hatást mutató KASB és SHR a kezelést követő 10. és 18. napon (7. és 9. ábra, 5. táblázat).

3.6. Hisztopatológiai vizsgálatok

a szövettani vizsgálatok a fibroblasztok bőséges proliferációját mutatták ki, különböző fokú fibrózissal. A minták 70-80% – os sűrű és megvastagodott fibrózist mutattak az extraktumokkal kezelt sebeknél, míg az 1% – os ezüst-szulfadiazin kenőcs (pozitív kontroll) 60-70% – os fibrózist mutatott. A fibroblaszt sejtek és a kollagén rostok kiemelkedően jelen voltak a referencia-és kivonatokkal kezelt csoportokban a kezeletlen kontrollcsoportokhoz képest. Volt bőséges angiogenezis, fokozott kollagenáció és reepithelializáció, bizonyíték a markáns kezelési válaszokra a tartós gyulladás közepette az extraktumokkal kezelt sebszövetekkel összehasonlítva a kezeletlen sebszövetekkel (10. ábra).

(a)

(b)

(c)

(d)

(e)

(f)

(a)
b)
c)
d)
e)
f)

ábra 10

A vivőanyaggal kezelt sebszövetek, kivonatok és a kezeletlen szövetek kórszövettani vizsgálata. Reprezentatív képek festett hematoxilin és eozin folt, Van Gieson folt és toluidin kék folt kezelt naponta 7,5 tömeg% krémek metanol levél kivonat (KAL) a K. africana (a), metanol szár kéreg kivonat (KASB) a K. africana (b), metanol levél kivonat (SHL) krém S. hispidus (c) és metanol gyökér kivonat (SHR) krém S. hispidus (d) és a kezeletlen sebszövetek (e) 14 napig. (A) KAL: bőséges angiogenezis, fokozott kollagenáció és reepithelializáció, a tartós gyulladás közepette kifejezett kezelési válaszok nyilvánvalóak. b) KASB: észrevehető angiogenezis és granulációs szövetképződés, a szövetelhalást követő apoptózis bizonyítékával, kevésbé intenzív kollagenációval és reepithelializációval. (C) SHL: jelentős intenzív kollagénezéssel és reepithelializációval. (d) SHR: észrevehető granulációs szövetképződéssel, amely szövet utántöltésként nyilvánul meg. A kollagenáció és a re-epithelializáció szintén komoly volt a kezeletlen sebszövethez képest. e) kezeletlen sebszövetek tartós gyulladással, hiányos sebterülettel; gyenge granulációs szövetképződés, kollagenáció és reepithelializáció bizonyítéka, de bőséges angiogenezis. (f) az 1% m/m ezüst-szulfadiazinnal kezelt sebszövetek gyors granulációs szövetképződést, kollagenációt, fokozott sebgyógyulást és egyenetlen keratinos sebfelületet mutattak, amely nyilvánvaló reepithelializációt mutatott. Jelmagyarázat: AG: angiogenezis, CO: kollagenáció, DS: Holt tér nekrózist követően, GR: granulációs szövet apoptózist követően, IC: hiányos sebterület, ha: gyulladt szövet, KE: keratinos hám, ND: a tartós gyulladás nekrotikus törmeléke. RE: reepithelializáció.

4. Discussion

a jelen vizsgálat a K. africana és S. hispidus trópusi növényekből származó levelek, szárkéreg és gyökérkivonatok antimikrobiális és sebgyógyító tulajdonságait is magában foglalja. A növényi termékek potenciális sebgyógyító szerek, és nagyrészt előnyösek széles körű hozzáférhetőségük, kevesebb vagy semmilyen mellékhatásuk, valamint nyers készítményként való hatékonyságuk miatt . Az S. szárított leveleinek és gyökereinek fitokémiai szűrése. a hispidus tanninok, alkaloidok, szaponinok, szteroidok, szénhidrátok és szapogenetikus glikozidok, valamint flavonoidok jelenlétét mutatta ki a levelekben. Az alkaloidok hiányoztak a K. africana szárított leveleiben és szárkéregében, és szaponinok, szteroidok, szénhidrátok és szapogenetikus glikozidok voltak jelen mindkét növényi anyagban. Flavonoidokat találtak a K. africana leveleiben is (1.táblázat). A kivonatok (KAL, KASB, SHL és SHR) HPLC ujjlenyomatát szintén azonosítási és minőségellenőrzési célokra fejlesztették ki (1., 2., 3. és 4. ábra).

a növény fitokémiai összetevői gyakran meghatározzák az emberi test fiziológiai hatását. Az antioxidánsok olyan szerek, amelyek megvédik a sejteket a szabad gyököknek nevezett molekulák által okozott károsodásoktól. A kivonatok antioxidáns aktivitása elsősorban fenolos vegyületek, például flavonoidok, fenolos savak, tanninok és fenolos diterpének jelenlétének köszönhető . Ezért a kivonatok összetevői, mint például a tanninok és a flavonoidok, fontos szerepet játszanak a sebgyógyulásban azáltal, hogy megakadályozzák és megvédik a szabad gyökök oxidatív károsodását .

a K. africana levelek és szárkéreg, valamint a S. hispidus levelek és gyökerek metanol kivonatainak antimikrobiális aktivitását négy baktérium, két Gram-pozitív baktérium (S. aureus és B. subtilis), két Gram-negatív baktérium (E. coli és P. aeruginosa) és egy gomba (C. albicans) ellen határoztuk meg csészelemez-agardiffúziós módszerrel. A két növény metanolkivonata az összes vizsgált organizmussal szemben aktív volt (2.táblázat). A minimális gátló koncentrációt (mic) a nyers extraktum legalacsonyabb koncentrációjaként határoztuk meg, amelynél a Kal mikrobiális növekedése és Mic-je a S. aureus, a B. subtilis, az E. coli, a P. aeruginosa és a C. albicans ellen sorrendben 5, 2,5, 5,5, 7,5 és 2,5 mg/mL volt, a KASB-é pedig 5, 5,5, 5,25, 7,5 és 2,25 mg/mL volt. Az SHL és az SHR kivonatok szintén hasonló antimikrobiális aktivitást mutattak, és Mic-jük ugyanabban a tartományban volt, mint a K. africana kivonatok (2.és 3. táblázat). A kivonatok (KAL, KASB, SHL és SHR) antibakteriális és gombaellenes hatása hasonló volt a kigelia pinnata (Jacq) levélkivonat aktivitásához.) DC. amint arról Binutu et al. . A kivonatok antimikrobiális hatása a fenolos összetevők, köztük a tanninok és a kivonatokban található egyéb polifenolok összehúzó jellegének tulajdonítható .

a patogén baktériumok, például a Staphylococcus, a Streptococcus és a Pseudomonas előfordulása a sebekben általában a sebek fertőzéséhez vezethet, ami krónikus sebek kialakulását eredményezheti . Ebből a vizsgálatból kiderült, hogy a K. africana és az S. hispidus kivonatok erős és széles spektrumú antimikrobiális aktivitást mutattak ezekkel a kórokozókkal szemben. Mivel a vizsgált organizmusokkal szembeni kivonatok mikrofonjainak többsége 8 mg/mL alatt volt, arra lehet következtetni, hogy Fabry és kollégái szerint a kivonatok erős antimikrobiális aktivitást mutattak . Az antimikrobiális szerek vagy kivonatok helyi alkalmazása hatékony terápiás módszer a mikrobiális populációk elpusztítására, mivel a hatóanyagok rendelkezésre állnak a seb helyén, ami fokozott sebgyógyulási aktivitáshoz vezet .

a kivonatok IC50 értékei (KAL, KASB, SHL és SHR) sorrendben 1,5, 56,9, 13,7, 49,8, illetve 45,1 6G/mL voltak (4.táblázat). Ezek az eredmények azt sugallják, hogy ezek a kivonatok antioxidáns tulajdonságokkal rendelkeznek, kivéve a S. hispidus kivonatait, és ez megkönnyítheti a sebek gyógyulását . Ez azt jelezheti, hogy az S hagyományos felhasználása. a hispidus mint sebgyógyító szer nem feltétlenül antioxidáns aktivitásának köszönhető, hanem más biológiai hatásokon alapulhat. A K. africana leveleinek és fakéregének IC50 értékei hasonlóak voltak Gathirwa és kollégái eredményeihez .

a kivonatok (KAL, KASB, SHL és SHR) jelentősen befolyásolták a sebzáródás sebességét a sebek különböző kezelési napjai alapján a kivonatokkal összehasonlítva a kezeletlenekkel. Az SHL kivonat szignifikánsan fokozott hatást mutatott a sebgyógyulási folyamatra a 11. napon () 90 százalékos sebzárással.13 (8. ábra) a kezeletlen sebekkel összehasonlítva. Az SHL hatása a sebekre hasonló volt, mint az SHR kivonaté, a seb összehúzódásának szignifikáns növekedése a 11. napon () és a sebzáródás 91,72% volt (9.ábra). A KASB kivonat hatása (7.ábra) hasonló volt az SHL és SHR kivonatokhoz. A KAL kivonat azonban jelentősen javította a seb összehúzódását a 7. naptól () 85,1% – os sebzárással (6.ábra) a 17. napig. A sebszövetek kórszövettani vizsgálata a kezeletlen sebekhez képest bőséges angiogenezist, fokozott kollagenációt és reepithelializációt tárt fel (10.ábra). A kivonatok ezen biológiai aktivitása a fibroblasztok és keratinociták fokozott proliferációjának és a patogén baktériumok kivonatok általi sikeres csökkentésének tudható be, és ezek a kivonatok fitokémiai összetevőinek tulajdoníthatók.

a csak krémmel kezelt és a kezeletlen sebeknél megfigyelt hatások statisztikailag nem voltak szignifikánsak a kivonatokkal vagy az ezüst-szulfadiazinnal (referencia) kezelt sebekkel összehasonlítva. Ez azt is jelezheti, hogy a vizes krém összetevői nem befolyásolták a kivonatok aktivitását, ezért a kivonatok fokozott hatása kizárólag az ezekben a kivonatokban jelen lévő bioaktív elveknek tudható be. A kivonatok sebgyógyító hatása a bennük lévő különböző fitokémiai összetevőknek köszönhető. A tanninok, mint például a proantocianidinek és más tanninok, beleértve a csersavat, a geraniint és a furozint, ismert, hogy megkönnyítik a sebgyógyulást . Megállapították, hogy a kivonatok flavonoidokat és szaponinokat tartalmaznak, és ezek a másodlagos metabolitok fokozzák a sebgyógyulást, ezért a kivonatok fokozott sebgyógyító hatása a fitokémiai összetevőknek tulajdonítható.

a fenti megállapítások alátámaszthatják azt az állítást, hogy a növényi kivonatokkal kezelt sebek gyorsabban és jobban gyógyulnak, mint a kezeletlen sebek, és ezeknek a növényeknek a használata mikrobiális fertőzések kezelésére. Az ezen farmakológiai tulajdonságokért felelős bioaktív vegyület(ek) izolálását és jellemzését azonban el kell végezni.

5. Következtetés

a K. africana metanol levele és szár kérge, valamint az S. hispidus metanol levele és gyökérkivonata antioxidáns, antimikrobiális hatást mutatott, MIC-tartománya 2,25-7,5 mg/mL, illetve 2,5-10 mg/mL volt a vizsgált organizmusokkal szemben, a fokozott sebgyógyító tulajdonságok és ezek a farmakológiai tulajdonságok indokolhatják e növények gyógyászati felhasználását mikrobiális fertőzések és sebek kezelésére. A biológiai tevékenységekért felelős bioaktív vegyületek bioaktivitással irányított frakcionálását és izolálását végeznék.

összeférhetetlenség

a szerzők kijelentik, hogy nincs összeférhetetlenségük.

Köszönetnyilvánítás

a szerzők szeretnék kifejezni hálájukat Mr.Thomas Ansah a Department of Pharmacology, KNUST, Kumasi, Ghána az ő technikai segítséget és Nana Yaw Atefah a gyűjtemény a növények. Azt is elismerte, Dr. Paul Ossei a Department of Pathology, Komfo Anokye Oktató Kórház, Kumasi, Ghána az ő hozzájárulása a kóros értékelése sebszövetek.