az avermektinek szisztémás aktivitása a Macskabolha ellen (Siphonaptera: Pulicidae)

absztrakt

az Ivermektinnek erős szisztémás aktivitása van számos fonálféreg és ízeltlábú faj ellen, de van néhány fontos faj ebben a két csoportban, mint például a macskabolha, Ctenocephalides felis (Bouch), hogy úgy tűnik, hogy refrakter rá. Annak megállapítása érdekében, hogy a hiánya szisztémás aktivitás ellen C. a felis specifikus az ivermektinre, vagy ha ez egy osztály egészére kiterjedő jelenség, akkor 20 avermektin származékot vizsgáltunk egy mesterséges membrán bolha etetőrendszerben 20, 10 és 1 6G/ml koncentrációban. Az eredmények azt mutatták, hogy az ivermektin LC90 és LC50 értéke a bolhákkal szemben 19,1, illetve 9,9 6G/ml volt. A többi 19 vizsgált vegyület közül csak négy rendelkezett mind az LC90, mind az LC50 értékekkel, amelyek erősebbek voltak, mint az ivermektin, és még akkor is az előny szerény volt. E négy vegyület között az ivermektinhez viszonyított hatékonyság kétszeres növekedése volt, amikor az LC90 értékeket figyelembe vettük (tartomány, 9,2–10.Az LC50 értékek vizsgálatakor (tartomány: 1,23 – 5,26 6G/ml) két-nyolcszoros növekedés következett be. Sem a makrociklusos gerincen lévő oleandrozil cukrok birtoklása, sem száma nem volt releváns a bolha további aktivitása szempontjából, mivel e négy vegyület között volt két diszacharid, egy monoszacharid és egy aglikon. A C-22 és 23 közötti kötés diszpozíciója nem járult hozzá az aktivitás növekedéséhez, mivel ezek a molekulák egy-vagy kettős kötésű tagokat tartalmaznak. Az egyik ilyen avermektin analógot felnagyították és szubkután tesztelték egy kutyán a kereskedelmi forgalomban kapható ivermektin dózis >100-szorosával, és a bolhával szemben nulla hatékonyságot figyeltek meg. Megállapítottuk, hogy még a legjobb in vitro avermektin sem rendelkezik in vivo potenciállal arra, hogy kereskedelmi orális vagy szubkután bolhakezeléssé váljon társállatok számára.

az endektocidok avermektin osztálya erős szisztémás aktivitással rendelkezik számos fonálféreg és ízeltlábú faj ellen (Egerton et al. 1979, 1980). Különösen szembetűnőek például a helminták, például az éretlen szívférgesség, a Dirofilaria immitis elleni szinte abszolút hatékonyság 6,0 Ft/kg-os kutyáknál (Campbell 1989), valamint olyan rovarok ellen, mint a közönséges szarvasmarha grub, a Hypoderma lineatum (Villers) lárvái, szarvasmarháknál 0,2 Ft/kg-nál (Drummond 1984). Ennek a hatalmas hatásnak ellenére azonban ezeken a csoportokon belül vannak más organizmusok, amelyek úgy tűnik, hogy refrakter az ivermektinnel szemben. A macska bolha, Ctenocephalides felis (Bouch), klinikailag releváns példa. Az ivermektint orálisan hetente 0,5 mg/kg vagy naponta 0 adagban adták be.05 mg / kg, és megfigyelték, hogy inaktív a parazita ellen kutyákon (Blair et al. 1984). Banks et al. (2000) és Shoop et al. (2001) függetlenül megerősítette ezeket az eredményeket azzal, hogy kimutatta, hogy az ivermektin gyenge szisztémás aktivitással rendelkezik a macska bolha ellen Mesterséges membrán bolha etetési vizsgálatokban.

annak megállapítása érdekében, hogy a bolhák elleni szisztémás aktivitás hiánya specifikus-e az ivermektinre, vagy az egész osztályra kiterjedő jelenségről van szó, 20 avermektint teszteltek egy mesterséges membrán bolha etetési rendszerben. A vizsgált avermektinek stratégiailag kiválasztott sorozata a legtöbb kémiailag hozzáférhető hely képviselőit tartalmazta, amelyeket a makrociklus körül kihasználtak. A csoport magában foglalja a természetben előforduló avermektineket, valamint a biológiailag fontos aglikon, monoszacharid és diszacharid sorozat félszintetikus tagjait. A kereskedelmi forgalomba hozott vegyületek abamectin, ivermectin, milbemycin D, és a selamectin is szerepelnek. Ebben a cikkben bemutatjuk az avermectin család ezen tagjainak bolhákkal szembeni relatív hatékonyságát mesterséges membránrendszerben végzett teszteléssel, és in vivo hatékonysági eredményeket mutatunk be egy kutyától, amelyet szubkután adagoltak az egyik leghatásosabb tesztelt avermektinnel.

anyagok és módszerek

az agár.

az általunk használt mesterséges membrán bolha etetési rendszer A Jay R. Georgi (FleaData, Freeville, NY) által gyártott “mesterséges kutya” módosítása. Ezt a mesterséges membránrendszert a bolhák tenyésztésére tervezték, de azt is javasolták, hogy tesztelje a szisztémás rovarölő szerek hatásait (Wade and Georgi 1988 and Pullen and Meola 1996), és az új indol terpén, a nodulisporinsav a (Shoop et al. 2001). Jay R. Georgi-val együttműködve módosítottuk a mesterséges kutyát. Ez az új rendszer (Fig. 1) azért kapta az “agár” elnevezést, mert úgy tervezték, hogy hatékonyabb, könnyebben beállítható legyen, és lehetővé tegye nagyobb számú vegyület egyidejű tesztelését. A műkutyától eltérően, amely csak 25, 5 cm-es ketreceket tartalmaz, külön-külön felfüggesztve egy fűtött plexiüveg burkolat alatt, az új rendszer egy eltávolítható 59 x 38 cm-es elosztót tartalmaz, amely 104, 2,5 cm-es ketreceket tart. Az alumínium, eldobható adagolóhüvelyeket műanyag CVC hüvelyekre is cseréltük (Costar, Cambridge, MA). A műanyag hüvelyeket minden használat után ártalmatlanítottuk, hogy minimalizáljuk a kábítószerekkel való szennyeződés valószínűségét.

Bolha Tenyésztés.

bolhakolóniánkat macskákon tartottuk fenn az intézményi állatgondozási és-Felhasználási Bizottságunk szerint. A macskáktól begyűjtött tojásokat 28 6CC és 85% RH értéken inkubáltuk nyolc rész homokból és egy rész fagyasztva szárított szarvasmarha vérből álló táptalajban (California Spray Dry Company, Stockton, CA). Az ebben a vizsgálatban használt bolhák 48 órán belül megjelentek a kölyökkutyáikból.

összetett készítmény.

az Avermektineket 20, 10 és 1 6G/ml koncentrációban vizsgálták. Az egyes vegyületek két replikációját minden szinten egymás melletti összehasonlításban teszteltük két etetési rendszerünk segítségével. A használt vivőanyag polietilénglikol 400 és dimetil-szulfoxid (2:1) volt. Tíz mikroliter vivőanyagot használtunk milliliter heparinizált szarvasmarha-vérre. A szelamektin kivételével az összes vegyületet fermentálták vagy szintetikusan módosították a Merck vegyészei.

a szelamektin előzetes tisztítása a következőképpen történt. Hat Revolution ampullát (egyenként 240 mg) minimális mennyiségű CH2Cl2-vel hígítottunk, és egy szilikagél (4 hüvelyk magas) párnára töltöttük. Gradiens elúció,

.

,

.