a módosított Knott módszerét mikrofiláriák, különösen a szívféreg Dirofilaria immitis koncentrálására és azonosítására használják. Meg kell különböztetni a Dipetalonema reconditum (röviden”Dipet”) nem patogén mikrofiláriumától.
egyidejűleg közvetlen vérkenet is elvégezhető. Ez egy gyors, nem koncentrációs teszt a mikrofilaria számára. A Dirofilaria és a Dipet motilitási mintázatuk alapján különböztethető meg.
ezeket a vizsgálatokat mindig akkor kell elvégezni, amikor a beteg szívféreg-antigént pozitívnak tesztel, vagy bármilyen ok van feltételezni, hogy a kutyának jelenleg szívféregbetegsége van vagy volt a múltban. A Dirofilaria jelenléte befolyásolja a kezelés lefolyását és / vagy választását.
a Knott-teszt elvégezhető közvetlen kenet elvégzése nélkül, de soha ne végezzen közvetlen kenetet Knott-teszt elvégzése nélkül. A Knott ‘ s érzékenyebb teszt, mert koncentrálja a mikrofiláriát, így kevésbé valószínű, hogy kimaradnak a mikroszkópos vizsgálat során.
közvetlen kenet eljárás:
egyszerű. Helyezzen egy csepp vért, lehetőleg egy EDTA csőből vagy heparinizált fecskendőből, a tárgylemez közepére. Dobjon le egy fedőlapot a tetejére, és vizsgálja meg a mikroszkóp alatt 10x teljesítményen. A Dirofilaria mozdulatlan, vonagló mozgást mutat; a Dipetalonema gyorsabb, irányított mozgást mutat, és gyakran közvetlenül a mezőről lő.
a módosított Knott-technika eljárása:
győződjön meg róla, hogy védőkesztyűt visel. 15 ml-es centrifugacsővel adjunk hozzá körülbelül 10 ml 2% formalint (ez kereskedelmi forgalomban megvásárolható) 1 ml antikoagulált vérhez. Helyezze a hüvelykujját a kupakkal ellátott cső tetejére, és fordítsa meg többször, hogy alaposan összekeveredjen. Centrifugáljuk 5 percig 1000-1500 fordulat / perc sebességgel.
centrifugálás után képesnek kell lennie egy fehéres dugó megjelenítésére a cső alján. Dobja ki a felülúszót a megfelelő veszélyes hulladéktartályba.
hosszú üveg vagy műanyag pipettával adjunk hozzá egy csepp új metilénkék foltot
a pipettával keverjük össze a foltot az üledékkel
adjunk hozzá egy cseppet ebből a keverékből a tárgylemez közepére. Dobjon le egy fedőlapot a tetejére. Vizsgálja meg a mikroszkóp alatt 10x teljesítmény.
a közvetlen kenettel ellentétben a mikrofilaria álló helyzetben jelenik meg. A Dirofilaria-t méret és forma alapján meg kell különböztetni a Dipetalonemától. Az alábbi táblázat segít megkülönböztetni:
paraméter |
D. immitus |
D. reconditum |
Hossz (mikron) |
||
Szélesség (mikron) |
||
alak (elülső vég) |
kúpos |
blunt |
alak (test) |
egyenes |
ívelt |
alak (farok) |
egyenes |
gomb horog |
szám jelen |
kevés a sok |
kevés |
mozgás |
helyhez kötött |
mozog a csúszdán |
(Cornell Egyetem)
egy másik hűvös teszt mikrofilaria
töltsön meg egy microhematocrit csövet, és forgassa le, mintha pcv-t csinálna.
helyezze a csövet egy tárgylemezre, és tegye a mikroszkóp színpadra. Fókuszban a buffy coat on 10x power-ha egy kutya heartworm pozitív és keringő microfilaria, láthatjuk a microfilaria vonaglik körül a buffy coat!