Objective/background: Cell wall-deficient batterical forms (L-forms) may occur with resistance to factors that trigger their appearance. È interessante studiare la relazione tra la trasformazione della forma L del Mycobacterium Tuberculosis e l’esposizione della tolleranza ai farmaci all’etambutolo (EMB), un inibitore della sintesi della parete cellulare.
Metodi: L-forma variante è stata prodotta da un sensibile EMB ceppo di M. tuberculosis attraverso un criogenico stress protocollo di trattamento e, successivamente, fu coltivato in Middlebrook 7H9 semisolido medio, contenente EMB in una concentrazione inibitoria minima di 2 mg/L. Suscettibilità a EMB del ceppo parentale e la sua forma di L variante è stata valutata dal punto di vista fenotipico e utilizzando la reazione a catena della polimerasi-restrizione frammento lunghezza polimorfismo dosaggio di targeting una mutazione nel embB306 frammento di gene.
Risultati: In contrasto con la sensibilità a EMB del ceppo parentale, la sua variante a forma di L ha mostrato resistenza fenotipica ad alte concentrazioni di EMB (16 mg/L), ma la mutazione in embbb306 non è stata trovata. L’osservazione al microscopio elettronico della variante a forma di L ha mostrato una popolazione eterogenica di batteri, con diversi gradi di carenza della parete cellulare, nonché cellule di tipo protoplastico senza pareti cellulari. Di particolare interesse sono state le strutture simili a capsule osservate attorno alle cellule a forma di L e la matrice simile a biofilm prodotta dalla popolazione a forma di L.
Conclusione: Suggeriamo che l’espressione della resistenza fenotipica all’EMB in M. tuberculosis può essere associata ad alterazioni o perdita delle pareti cellulari nei batteri a forma di L, rispettivamente, il che si traduce in una mancanza di un bersaglio specifico per l’azione EMB. Inoltre, la produzione di strutture simili a capsule e matrice di biofilm da parte di forme L potrebbe contribuire alla loro resistenza e sopravvivenza in presenza di agenti antibatterici.