Tecnica di Knott modificata e striscio di sangue diretto

Il metodo di Knott modificato viene utilizzato per la concentrazione e l’identificazione delle microfilarie, in particolare la dirofilaria immitis. Deve essere differenziato dalla microfilaria non patogena di Dipetalonema reconditum (“Dipet” in breve).

È possibile eseguire contemporaneamente uno striscio di sangue diretto. È un test rapido e senza concentrazione per microfilaria. Dirofilaria e Dipet sono differenziati dal loro modello di motilità.

Questi test dovrebbero essere sempre fatto ogni volta che un paziente test filariosi antigene positivo, o non vi è alcun motivo di sospettare che il cane attualmente ha o ha avuto la malattia filariosi in passato. La presenza di Dirofilaria influenzerà il corso e / o la scelta del trattamento.

Il test di Knott può essere fatto senza fare uno striscio diretto, ma non fare mai uno striscio diretto senza fare un test di Knott. Il Knott’s è un test più sensibile perché concentra le microfilarie, quindi è meno probabile che vengano perse durante l’esame microscopico.

Procedura per striscio diretto:

Semplice. Posizionare una goccia di sangue, preferibilmente da un tubo EDTA o una siringa eparinizzata, al centro di un vetrino. Cadere un coperchio scivolare sopra la parte superiore ed esaminare sotto il microscopio su 10x potenza. Dirofilaria avrà un movimento stazionario e contorcente; Dipetalonema mostrerà un movimento più rapido e direzionale e spesso sparerà direttamente dal campo.

Procedura per la tecnica di Knott modificata:

Assicurarsi di indossare guanti per protezione. Utilizzando una provetta da centrifuga da 15 ml, aggiungere circa 10 ml di formalina al 2% (acquistabile commercialmente) a 1 ml di sangue anticoagulante. Posizionare il pollice sopra la parte superiore del tubo tappato e invertire più volte per mescolare accuratamente. Centrifugare per 5 minuti a 1000-1500 giri / min.

Si dovrebbe essere in grado di visualizzare un tappo biancastro nella parte inferiore del tubo dopo la filatura. Gettare il surnatante nell’apposito contenitore per rifiuti pericolosi.

Utilizzando una pipetta di vetro o plastica lunga, aggiungere una goccia di nuova macchia blu di metilene

Utilizzare la pipetta per mescolare la macchia con il sedimento

Aggiungere una goccia di questa miscela al centro di un vetrino. Cadere una copertura scivolare sulla parte superiore. Esamini sul microscopio sotto potere 10x.

A differenza dello striscio diretto, la microfilaria si presenterà come stazionaria. Dirofilaria deve essere distinto da Dipetalonema in base alle dimensioni e alla forma. Usa la seguente tabella per aiutarti a differenziare:

(Cornell University)

un Altro fresco di test per microfilaria

Riempire un microhematocrit tubo e spin-down, come se dovessi fare una cpv.

Posare il tubo su un vetrino e metterlo sul palco del microscopio. Concentrati sul buffy coat su 10x power-se un cane è filariosi positiva e ha microfilaria circolante, puoi vedere la microfilaria che si contorce nel buffy coat!