ヘモグロビンと相互作用するアロステリックエフェクターはヘモグロビン分子に結合し、酸素の取り込みと放出を調節する。 この反応を違法とする治療薬は、組織の酸素化の増加が運動能力を向上させるので、重大な乱用の可能性を有する。 新規アロステリックエフェクター myo-イノシトルトリスピロリン酸（ITPP）は、（OXY111Aの指定の下で）慢性心不全および癌用途のための第1相臨床試験に現在あ この混合物は競馬工業で性能の強化のために既に使用され、口頭栄養の補足および注射可能な解決の形でオンラインですぐに利用できます。 ITPPは世界アンチ-ドーピング機関の人間の運動選手のための物質の禁止されたリストに含まれています;但し、人間の尿のこの物質を検出する方法はまだ
このため、Görgens et al. (2014)は、ヒト尿中のITPPのための簡単で堅牢なスクリーニングおよび確認プロトコルを開発するために着手しました。1この化合物は本質的に極性が高く、逆相液体クロマトグラフィーには適していないため、チームはITPPと内部標準ITPP-d6でスパイクされたヒト尿の分析のために親水性相互作用液体クロマトグラフィー（HILIC）とタンデム質量分析（MS/MS）に目を向けた。 研究者らは、Accela1250quaternary pump、PAL autosampler、およびQ Exactive hybrid quadrupole-Orbitrap質量分析計（すべてThermo Scientific）を使用して、ITPPと内部標準（m/z301.9065および304）の両方の前駆体イオンを検出しました。9253、それぞれ）、ならびに診断生成物イオン（m/z78.9580、158.9243、および524.8550）。 また、弱陰イオン交換固相抽出法（WAX-SPE）を用いた疑わしい尿サンプルの確認プロトコルを開発しました。
チームは、その方法がスクリーニングと確認の両方に特異的であり、それぞれ50-500ng/mLおよび5-125ng/mLの濃度範囲で良好な精度を有することを決定した。 彼らは、スクリーニングおよび確認のために、検出の下限をそれぞれ15ng/mLおよび1ng/mLと推定した。 彼らはまた、強制的なドーピングコントロールの保存期間と一致して、貯蔵の三ヶ月後に尿マトリックス内のITPP濃度の有意な減少を報告していません。
Görgens et al. ヒト尿中のITPPの存在をスクリーニングし、確認するための敏感で信頼性の高いプロトコルとして、それらの方法を提示する。 彼らは、HILIC分離は、スクリーニング方法を迅速かつ時間効果的にし、実質的にサンプル調製を行わないことに注意しています。 固相抽出による確認の付加的な選択は総議定書の感受性そして多様性を高める。 チームはさらに、彼らのアプローチの柔軟な性質は、他のスクリーニングアプリケーション、特に高極性分析物を有するものに適している可能性があると
参考
1. Görgens,C.,et al. (2014,July)”Screening and confirmation of myo-inositol trispyrophosphate(ITPP)in human urine by親水性相互作用液体クロマトグラフィー high resolution/high accuracy mass spectrometry for doping control purposes,”Drug Testing and Analysis,doi:10.1002/dta.1700.
投稿者：メリッサJ.メイヤー。 メリッサは科学のジャーナリズムを専門にするフリーランス-ライターである。 彼女は、プロテオミクス、細胞/分子生物学、微生物学、生化学、免疫学の分野への情熱と経験を持っています。 メリッサはまた、バイリンガル（スペイン語）であり、生物学の裏書と教育証明書を保持しています。
