KinExAの技術-Sapidyne

(注:以下の説明では、アッセイの形式は、試料中の遊離受容体を測定するためにリガンドを固定化することである。 逆に、受容体は、使用される材料に応じて、試料中の遊離リガンドを測定するために固定化されてもよい。)
遊離受容体の測定は、試料混合物をリガンドが固定化されている固相に短時間曝露することによって達成される。 固相へのサンプルの相互作用時間を非常に短くすると、固相への唯一の有意な結合が遊離受容体からのものである状況になるため、曝露時間は重 速度論的排除アッセイは、平衡化された溶液が固相リガンドが溶液受容体に対して競合するのに十分な長さの固相と接触している競合アッセイとは対照的である。
KinExAの利点は、捕捉された受容体からのシグナルが溶液中で遊離している濃度のみを表すことである。 受容体の平衡濃度を知ることは、可逆的結合ページに記載されているように結合定数の決定を可能にする。<930>市販のKinExAアッセイを行うための器具(SapidyneのKinExA4000、3200、および3100)は、試料および他の試薬を通過させる小さな粒子カラムを使用する。 試料の任意の部分と固相との接触時間は、カラムを通る通過時間であり、選択された流量(約5 0ミリ秒から約1秒)によって制御することができる。

nM範囲の結合剤またはより緊密なシステムは、キネティック排除アッセイモード(KinExAモード)になります。 より弱い結合剤は依然として測定することができるが、測定からの試料の摂動を避けるために余分な注意を必要とする場合がある。 KinExAは測定の類縁および動力学のために特にうってつけ、また改良された免疫学的検定のプラットホームとして働く。 KinExA測定のより詳細な説明は、以下に含まれています。

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