Abstracte
Drie opeenvolgende patiënten met geen duidelijk immunodeficiëntie die had voorkomende intra-orale herpes simplex type 1 recidieven, een zeldzame complicatie van herpes simplex virus infecties, hebben een totaal tekort van de A-of B-isotype van het complement component C4 en homozygoot voor de bestudeerde HLA antigenen. Een combinatie van HLA-homozygositeit, die kan leiden tot verminderde t-celherkenning van virale peptiden, en deficiëntie in de klassieke complementweg, die virusneutralisatie in gevaar kan brengen, kan predisponeren voor ernstige en frequente herpes simplex-virusinfecties.
morbiditeit door infectie met het herpes simplex virus type 1 (HSV-1) komt voornamelijk voort uit het vermogen van HSV-1 om periodiek te reactiveren. Terugkerende herpes labialis komt voor bij 15% -40% van de seropositieve personen . Immunocompetente personen hebben zelden intraorale laesies. Van degenen die dat wel doen, ervaart 52% terugkerende episodes, vaak verkeerd gediagnosticeerd als afteuze stomatitis of erythema multiforme . Laesies komen voornamelijk voor in het harde gehemelte en tandvlees en kunnen effectief worden behandeld met langdurige antivirale profylaxe.
de efficiëntie van de vroege immuunrespons op heldere HSV-1 varieert sterk . Verschillen in IFN-γ en Specifieke antilichaamproductie en afwijkingen in macrofaag-of NK-celfunctie worden verondersteld verantwoordelijk te zijn voor de verschillen in recidiefpercentages en invasiviteit. HSV-1 heeft een complement evasion molecule die bijna volledig blokkeert de alternatieve complement weg en terminal complexe activering lokaal . Virusneutralisatie door de gastheer hangt waarschijnlijk af van antilichaam-geïnduceerde activering van de klassieke route. Toch heeft de rol van complementdeficiënties bij HSV-infecties weinig aandacht gekregen .
binnen 1 jaar werden 3 niet-verwante patiënten uit niet-bloedende huwelijken naar ons doorverwezen vanwege uitzonderlijk actieve intraorale herpes zonder duidelijke immunodeficiëntie. We bestudeerden complementfuncties en complementfactor C4 en HLA genen in deze kleine Kaukasische patiëntengroep. De resultaten wijzen op immunologische kenmerken die kunnen predisponeren voor actieve intraorale HSV-1 infectie.
methoden. Deze 3 vrouwelijke patiënten hadden een intraorale HSV-1-infectie met >10 recidieven per jaar, met terugkerende herpetische blaren voornamelijk in het harde gehemelte en tandvlees. Het recidiefpercentage bleef constant of nam in de loop van de tijd toe (tabel 1).
kenmerken van infecties met het herpes simplex virus (HSV) bij 3 vrouwen met recidiverende intraorale HSV-infecties en resultaten van virologisch en immunologisch onderzoek.
kenmerken van infecties met het herpes simplex virus (HSV) bij 3 vrouwen met recidiverende intraorale HSV-infecties en resultaten van virologisch en immunologisch onderzoek.
er werd bloed afgenomen in buisjes die heparine, EDTA (10 mM) of geen antistollingsmiddel bevatten. De monsters werden genomen terwijl de patiënten asymptomatisch waren.
Serumantilichamen tegen HSV-1 en HSV-2 werden gemeten met commerciële EIAs (HSV-1 ELISA IgG en HSV-2 ELISA IgG; MRL diagnostiek). De steekproeven voor HSV PCR, antigeendetectie, en isolatie werden genomen van de basissen van nieuw geperforeerde intraorale blaasjes. HSV-isolatie en typespecifieke PCR-analyses werden uitgevoerd . De monsters voor HSV-antigeendetectie werden bereid uit de swabs door cytocentrifugatie . Dia ‘ s werden gekleurd met polyclonal HSV anti-rabbit IgG gevolgd door fluoresceïne isothiocyanaat—gelabeld anti-rabbit IgG (Jackson ImmunoResearch Laboratories). In paraffine ingebedde weefselmonsters waren op dezelfde manier gekleurd. De niveaus van IgG, IgA en IgM en de concentraties van IgG-subklassen werden gekwantificeerd met nefelometrie met polyclonale antilichamen van Behringwerke.
DNA-monsters werden gegenotypeerd voor HLA-A, -B, -C en-DR door middel van de commerciële kits van Pel-Freez (PF-ABC-SSP), één Lambda (SSP ABDR) of INNO-Lipa (LiPA HLA-DRB1) met lage tot intermediaire allelresoluties. Complement C4 allotypes werden elektroforetisch bepaald . De afwezigheid van een isotype werd bevestigd door isotype-specifieke PCR-amplificatie van de C4A-en C4B-genen .
serumwaarden C3 en C4 werden gekwantificeerd met nefelometrie met behulp van polyclonale antilichamen en referentiemonsters van Behringwerke. De klassieke en alternatieve pathway hemolytische complement activiteiten werden bepaald door gestandaardiseerde hemolysis-in-gel assays van bindingsplaats.
activiteiten van mononucleaire cellen uit perifeer bloed (PBMC) werden gemeten door integratie van thymidine na stimulatie van PBMC met fytohemagglutinine, concanavalin A en pokeweed mitogen en werden normaal bevonden (gegevens niet aangetoond) .
resultaten. Alle patiënten hadden > 10 jaarlijkse HSV-1 recidieven (tabel 1) die 5-10 dagen duurden, maar die volledig onderdrukt werden bij langdurige orale valacyclovir therapie. De symptomatische verlichting begon bij < 24 uur. de patiënten hadden meerdere kleine (1-3 mm diameter) blaasjes op plaatsen die kenmerkend zijn voor intraorale HSV-infectie (tabel 1) maar atypisch voor intraorale erythema multiforme of afteuze stomatitis. Patiënten 1 en 3 vertoonden vaak gelijktijdig voorkomende typische herpes labialis (tabel 1). HSV-1-infectie kwam vaker voor tijdens de zwangerschap bij patiënt 1 en in de puberteit bij patiënt 3. Beide hadden ook tekenen van meningeale irritatie met nekstijfheid en myalgie, fotofobie en invaliderende hoofdpijn op hetzelfde moment als herpetische laesies. Er werd geen verhoogd eiwitgehalte of pleiocytose in de liquor aangetoond en de PCR-test voor HSV in de liquor was negatief voor patiënt 1. Patiënten 1 en 3 hadden frequente bovenste luchtweginfecties en patiënt 1 had recidiverende sinusitis.
de patiënten hadden geen cytopenieën of antilichamen tegen HIV-of hepatitis-B-of hepatitis-C-virussen. De resultaten van virologisch en immunologisch onderzoek zijn weergegeven in Tabel 1 en 2. Alle patiënten waren seropositief voor HSV-1. Histologische diagnose voor patiënt 2 was gebaseerd op typische HSV blistermorfologie en bevestigd door HSV-specifieke immunostaining. Alle patiënten hadden aanhoudende intraorale HSV-1-infecties (tabel 1) en verminderde klassieke complementweg hemolytische activiteiten en spiegels van serum C4 (tabel 1). C4 fenotypering toonde een volledig gebrek aan het C4A (1 patiënt) of het C4B (2 patiënten) eiwit. Patiënten waren homozygoot voor de HLA klasse I en II allelen (tabel 2). Patiënt 2, die homozygoot was voor A1, B8, DR3, had een laag serum IgA-gehalte (0,47 g/L).
resultaten van ernstige histocompatibiliteit complexe typering bij 3 vrouwen met recidiverende intraorale herpes simplex virus (HSV) infecties.
resultaten van ernstige histocompatibiliteit complexe typering bij 3 vrouwen met recidiverende intraorale herpes simplex virus (HSV) infecties.
discussie. In onze geselecteerde groep van 3 patiënten hadden alle uitzonderlijk actieve intraorale HSV-1 infecties, waren homozygote voor hun belangrijkste histocompatibiliteitscomplex (MHC) haplotypes, en hadden een totaal gebrek aan C4A of C4B eiwit van de klassieke complementweg (tabel 2) . De patiënten hebben dus een combinatie van subtiele stoornissen in hun MHC-eiwitten die de immuunafweer tegen exacerbaties van HSV-1 in de orofarynx in gevaar kunnen brengen.
klasse I—beperkte CD8 + T-cellen worden verondersteld verantwoordelijk te zijn voor de clearing van HSV. De variabele snelheid van afstoten en recidief en de variatie in de effectiviteit van de vroege immuunrespons is het nettoresultaat van een complex samenspel tussen de immuunontwijkingsmoleculen van HSV en de immuunrespons van de patiënt . Het is waarschijnlijk dat naast T-cellen, snel werkende armen van de immuunrespons tot dit vroege stadium van Defensie bijdragen.
NK -, mononucleaire en CD4+ T-cellen, immunoglobulinen, complementfactoren en voornamelijk th1-type cytokines worden aangetroffen in vroege HSV-laesies. De eerste lymfocyten die in HSV-laesies migreren zijn CD4 + T-cellen en NK-cellen, die verantwoordelijk zijn voor de lokaal verhoogde cytokineproductie. Producten van de HLA-A-en-B-loci van MHC-klasse I bevatten peptiden voor cytotoxische T-en NK-T-cellen en die van de loci van klasse II voor CD4 + T-cellen. HSV-1 kan zich met antigeenpresentatie door Klasse I en II MHC molecules mengen en CD8+ en CD4+ T celherkenning beà nvloeden . Zoals bij andere virale infecties wordt gesuggereerd , kan de expressie van virale peptiden op cytotoxische CD8+ T-cellen vroeg tijdens een recidief worden belemmerd door HLA-homozygositeit, mogelijk door verminderde variabiliteit in het HLA-antigeenrepertoire van de patiënten, bijvoorbeeld op mucosale epitheliale cellen. Uiteindelijk zullen de effecten van cytokineproductie de remming van HLA klasse I expressie door HSV overwinnen, waardoor de CD8+ T cellen de virus geïnfecteerde cellen kunnen wissen . MHC homozygositeit is gekoppeld aan een versnelde ziekteprogressie bij virale infecties . Dit is, voor zover bekend, de eerste studie die een associatie rapporteert tussen HLA homozygositeit en symptomatische HSV recidieven.
zowel de B8 -, DR3-en B35 -, CW4-bevattende MHC haplotypes zijn betrokken bij herclasserende HSV-ziekte en suggereren dat ze leiden tot een agressieve ziekte veroorzaakt door omhulde virussen . De haplotypes die de antigenen A3,B35, A1,B8 en B15 omvatten, komen in homozygote vorm voor in de Finse populatie met frequenties van respectievelijk 0,8%, 0,3% en 2%. De haplotypes van de patiënten zijn vaak C4-verwijderingen.
C4-eiwit heeft 2 ISO-types, C4A en C4B, waarvan de genen gecodeerd zijn in het MHC klasse III-gebied. Na verstoring van hun interne thiolesterbindingen, binden de C4A-en C4B-eiwitten covalent aan amino-of hydroxylgroepen op doelmoleculen en fungeren ze als subeenheden in de klassieke route C3-convertase, C4b2a. C4 heeft een complex structureel polymorfisme met >40 eiwitallotypes herkend. C4-deficiëntie wordt veroorzaakt door segmentale deleties, duplicaties, genconversies of puntmutaties die resulteren in “null” (Q0) allelen. Deze komen met hoge frequentie voor. Ongeveer 35% van de personen van alle rassen ontbreekt 1 van de 4 C4A of C4B allelen . Totale C4A-en C4B-deficiënties, dat wil zeggen 2 null-allelen in de respectieve C4A-of C4B-genloci, komen voor bij respectievelijk 3% en 8% van de Finse populatie .
de prevalentie van intraorale herpes is onbekend. We schatten het voorzichtig op < 0,5%. Bij de Finse bevolking is de prevalentie van HLA-homozygositeit voor de 9 meest voorkomende haplotypes 3% en voor totaal C4A-of C4B-deficiëntie 11%. De prevalentie van al deze gecombineerde zou dus 1 zijn.65 per 100.000 personen, maar HLA haplotypes en C4 tekortkomingen zijn niet onafhankelijk, maar gekoppeld. De kans dat 3 opeenvolgende patiënten met intraorale herpes deze gecombineerd zou hebben is minimaal. Als voorbeeld, onder 10.000 opeenvolgende gehospitaliseerde patiënten, zou de kans op het vinden van 3 Concordante patiënten, volgens de verdeling van Poisson, 0,00064 zijn.
specifieke antilichamen en complement werken samen om HSV direct te neutraliseren en opsoniseren en om antilichaam-afhankelijke cellulaire cytotoxiciteit te vergroten. Om deze snelwerkende immuniteitsarmen te ontwijken, codeert HSV-1 voor specifieke eiwitten. Eerst, remmen IgFc-bindende proteã nen IgG activiteit en laten het virus en besmette cellen toe om antilichaamaanval te ontsnappen . Ten tweede beschermt de HSV-1 transmembrane glycoproteïne gC-1 de virion en de met HSV geïnfecteerde cellen tegen complementneutralisatie, waardoor lokale verspreiding wordt vergemakkelijkt . Hoewel het virus in staat lijkt te zijn om met de alternatieve complementweg om te gaan, lijkt de weerstand van de gastheer van de klassieke weg af te hangen. Deficiënties in het middel, of in antilichamen die het activeren, kunnen een diepgaande invloed hebben op de lokale verspreiding en de mate van herhaling van HSV-1.
samenvattend suggereert onze studie dat een deficiëntie van een van de 2 C4-eiwitten belangrijk kan zijn bij het bepalen van de gevoeligheid voor chronisch actieve HSV-1-ziekte. Bovendien lijkt HLA-homozygositeit ook een gevoeligheidsfactor te zijn. Gevoeligheid voor een uitzonderlijk ernstige virale infectie kan dus worden gedicteerd door een combinatie van subtiele defecten in meerdere armen van het immuunsysteem.
,
,
,
.
,
,
, vol.
(pg.
–
)
.
,
,
, vol.
(pg.
–
)
,
,
Jr
.
,
,
, vol.
(pg.
–
)
,
,
.
,
,
, vol.
(pg.
–
)
,
,
.
,
,
, vol.
(pg.
–
)
,
,
.
,
,
, vol.
(pg.
–
)
,
,
, et al.
,
,
, vol.
(pg.
–
)
,
.
,
,
, vol.
(pg.
–
)
,
,
,
.
,
,
, vol.
(pg.
–
)
,
,
,
,
.
,
,
, vol.
(pg.
–
)
,
,
.
,
,
, vol.
(pg.
–
)
,
.
,
,
.
,
,
3d ed
(pg.
–
)
,
,
,
.
,
,
, vol.
(pg.
–
)
,
,
,
.
,
,
, vol.
(pg.
–
)
,
,
.
,
,
, vol.
(pg.
–
)
,
.
,
,
, vol.
(pg.
–
)
,
,
,
.
,
,
, vol.
(pg.
–
)
,
,
,
,
.
,
,
, vol.
(pg.
–
)
,
,
, et al.
,
,
, vol.
(pg.
–
)
,
.
,
,
, vol.
(pg.
–
)
,
,
. Erfelijke deficiëntie van de vierde component van het menselijk complement
,
,
, vol.
(pg.
–
)
,
,
,
,
.
,
,
, vol.
(pg.
–
)
van alle patiënten werd schriftelijke geïnformeerde toestemming verkregen. Het studieprotocol werd goedgekeurd door de Ethische Commissie van de afdeling Geneeskunde, ziekenhuis District van Helsinki en Uusimaa en de richtlijnen voor menselijke experimenten van de instellingen van de auteur werden gevolgd bij de uitvoering van klinisch onderzoek.
financiële steun: Universiteit van Helsinki, Helsinki University Central Hospital Funds, Finse Rode Kruis bloedtransfusie dienst, Sigrid Jusélius Foundation, Academie van Finland.