(nota: In de volgende beschrijving moet het formaat van de analyse ligand immobiliseren om vrije receptor in de steekproef te meten. Omgekeerd kan de receptor worden geà mmobiliseerd om vrije ligand in de steekproef te meten, afhankelijk van de gebruikte materialen.)
de vrije receptor wordt gemeten door het monstermengsel kort bloot te stellen aan een vaste fase waarin het ligand wordt geïmmobiliseerd. De blootstellingstijd is kritiek omdat het houden van de interactie tijd van de steekproef aan de vaste fase vrij korte resultaten in een situatie waar de enige significante band aan de vaste fase van de vrije receptor is. De kinetische Uitsluitingstest is in tegenstelling tot een wedstrijdtest waarbij de equilibrated oplossing lang genoeg in contact is met de vaste fase voor de vaste fase ligand om te concurreren voor de oplossingsreceptor.
het voordeel van KinExA is dat het signaal van de gevangen receptor alleen de concentratie vertegenwoordigt die vrij is in de oplossing. Het kennen van de evenwichtsconcentratie van receptor maakt het mogelijk de bindingsconstanten te bepalen zoals beschreven op de reversibele Bindingspagina.
de in de handel verkrijgbare instrumenten voor het uitvoeren van KinExA-tests (Sapidyne ‘ s KinExA 4000, 3200 en 3100) gebruiken een kleine kolom deeltjes waarlangs het monster en andere reagentia worden doorgegeven. De contacttijd van een deel van het monster met de vaste fase is dan de transit tijd door de kolom en kan worden geregeld door het gekozen debiet (van ongeveer 50 milliseconden tot ongeveer een seconde).
systemen met nM – bereikbinders of strakker zullen in de kinetische uitsluitingstestmodus (KinExA-modus) worden gebruikt. Zwakkere bindmiddelen kunnen nog worden gemeten, maar kunnen extra zorg vereisen om verstoring van het monster van de meting te voorkomen. KinExA is bijzonder geschikt voor het meten van affiniteit en kinetiek en werkt ook als een verbeterd immunoassay platform. Hieronder volgt een meer gedetailleerde uitleg van de KinExA-metingen.
