systemische activiteit van de avermectinen tegen de kattenvlo (Siphonaptera: Pulicidae)

Abstract

ivermectine heeft een krachtige systemische activiteit tegen talrijke soorten nematoden en geleedpotigen, maar er zijn enkele belangrijke soorten in deze twee groepen, zoals de kattenvlo, Ctenocephalides felis (bouché), die er ongevoelig voor lijken te zijn. In een poging om te bepalen of het gebrek aan systemische activiteit tegen C. felis is specifiek voor ivermectine, of als het een klasse-breed fenomeen is, zijn 20 avermectinederivaten getest in een kunstmatig vlooienvoedingssysteem met membranen in concentraties van 20, 10 en 1 µg / ml. De resultaten toonden aan dat ivermectine lc90-en LC50-waarden tegen vlooien had van respectievelijk 19,1 en 9,9 µg/ml. Slechts vier van de andere geëvalueerde 19 samenstellingen bezaten zowel lc90 als LC50-waarden machtiger dan ivermectin en zelfs toen was het voordeel bescheiden. Onder deze vier verbindingen was een tweevoudige verhoging van de sterkte ten opzichte van ivermectine wanneer de lc90–waarden werden overwogen (range, 9,2-10.3 µg/ml) en een twee – tot achtvoudige verhoging bij onderzoek van de LC50-waarden (bereik: 1,23–5,26 µg / ml). Noch het bezit, noch het aantal oleandrosylsuikers op de macrocyclische ruggengraat waren relevant voor extra vlooienactiviteit omdat onder deze vier verbindingen twee disacchariden, een monosaccharide en een aglycon waren. Ook droeg de bindingsverhouding tussen C-22 en 23 niet bij tot een toename van de activiteit omdat deze moleculen uit leden met enkele of dubbele bindingen bestaan. Een van deze avermectine-analogen werd opgeschaald en subcutaan getest bij een hond met >100 maal de commerciële dosis ivermectine en er werd geen werkzaamheid waargenomen tegen de vlo. We concluderen dat zelfs de beste in vitro avermectine niet het in vivo potentieel heeft om een commerciële orale of subcutane vlooienbehandeling voor gezelschapsdieren te worden.

de avermectineklasse van endectociden heeft een krachtige systemische activiteit tegen talrijke soorten nematoden en geleedpotigen (Egerton et al. 1979, 1980). Bijzonder opvallend zijn bijvoorbeeld de bijna absolute efficaten tegen wormen zoals onrijpe hartworm, Dirofilaria immitis, bij honden bij 6,0 µg/kg (Campbell 1989) en tegen insecten zoals de larven van de gewone rundermauw, Hypoderma lineatum (Villers), bij runderen bij 0,2 µg/kg (Drummond 1984). Nochtans, ondanks deze enorme potentie, zijn er andere organismen binnen deze groepen die om refractair aan ivermectin schijnen te zijn. De kattenvlo, Ctenocephalides felis (Bouché), is een klinisch relevant voorbeeld. Ivermectine werd wekelijks oraal toegediend bij 0,5 mg/kg of dagelijks bij 0.05 mg / kg en waargenomen inactief te zijn tegen deze parasiet bij honden (Blair et al. 1984). Banks et al. (2000) en Shoop et al. (2001) deze resultaten werden onafhankelijk bevestigd door aan te tonen dat ivermectine een zwakke systemische activiteit heeft tegen de kattenvlo in kunstmatige membraanvlo-voedingstests.

in een poging om te bepalen of het gebrek aan systemische activiteit tegen vlooien specifiek is voor ivermectine, of dat het een klasse-breed fenomeen is, werden 20 avermectines getest in een kunstmatig vlooienvoedingssysteem met membranen. De strategisch geselecteerde reeks geteste avermectinen bevatte vertegenwoordigers van de meeste chemisch toegankelijke locaties die zijn geëxploiteerd rond de macrocyclus. De groep bestaat uit alle van nature voorkomende avermectinen, evenals semisynthetische leden van de biologisch belangrijke aglycon, monosaccharide en disaccharide series. De gecommercialiseerde samenstellingen abamectin, ivermectin, milbemycin D, en selamectin waren ook inbegrepen. In dit artikel presenteren we de relatieve potenties van deze leden van de avermectine familie tegen vlooien door middel van testen in een kunstmatig membraansysteem en tonen in vivo werkzaamheidsresultaten van een hond gedoseerd subcutaan met een van de meest krachtige avermectines getest.

materialen en methoden

De Windhond.

het kunstmatige vlooienvoedersysteem dat we gebruikten is een aanpassing van de” kunstmatige hond ” van Jay R. Georgi (FleaData, Freeville, NY). Dit kunstmatige membraansysteem werd ontworpen om vlooien te kweken, maar er werd ook gesuggereerd dat het de effecten van systemische insecticiden kon testen (Wade en Georgi 1988 en Pullen en Meola 1996) en het is gebruikt om de nieuwe indoolterpeen, nodulisporic acid (Shoop et al. 2001). In samenwerking met Jay R. Georgi hebben we de kunstmatige hond aangepast. Dit nieuwe systeem (vijg. 1) kreeg de benaming “Greyhound” omdat het was ontworpen om efficiënter te zijn, gemakkelijker op te zetten, en grotere aantallen verbindingen tegelijkertijd konden worden getest. In tegenstelling tot de kunsthond, die slechts 25 kooien van 5 cm bevat die afzonderlijk onder een verwarmde plexiglas-behuizing zijn opgehangen, bevat het nieuwe systeem een afneembaar spruitstuk van 59 bij 38 cm dat 104 kooien van 2,5 cm bevat. We hebben ook de aluminium niet-disposable toevoerhulzen vervangen door kunststof CVC sleeves (Costar, Cambridge, MA). De plastic hulzen werden na elk gebruik weggegooid om de kans op besmetting met geneesmiddelen te minimaliseren.

Vlooienopfokken.

onze vlooienkolonie werd onderhouden op katten die gehuisvest waren volgens onze institutionele Animal Care and Use Committee. Bij katten verzamelde eieren werden bij 28°C en 85% rv geïncubeerd in een medium dat bestond uit acht delen zand en één deel gevriesdroogd runderbloed (California Spray Dry Company, Stockton, CA). Vlooien die in dit onderzoek werden gebruikt, waren binnen 48 uur uit hun puparia voortgekomen.

samengesteld preparaat.

Avermectinen werden getest in concentraties van 20, 10 en 1 µg / ml. Twee replicaties van elke verbinding op elk niveau werden getest in een side-by-side vergelijking met behulp van twee van onze voedingssystemen. Het gebruikte voertuig was polyethyleenglycol 400 en dimethylsulfoxide (2: 1). Tien microliter voertuig per milliliter heparinized runderbloed werd gebruikt. Alle verbindingen werden gefermenteerd of synthetisch gemodificeerd door Merck chemici behalve selamectine.De voorlopige zuivering van selamectine verliep als volgt. Zes ampules van Revolutie (240 mg elk) werden verdund in minimale volumes van CH2Cl2 en geladen op een pad van silicagel (4 duim hoog). Gradiënt-elutie,

.

,

.