Kastle Meyer and Hemastix reagentia zijn vermoedelijke tests die vaak worden gebruikt in forensische zaken voor de detectie van bloed, en de geschiktheid ervan is beoordeeld in talrijke publicaties. De studies tot nu toe waren echter gericht op de validatie van deze tests op menselijk bloed alleen, en geen gepubliceerd werk heeft gekeken naar de gevoeligheid, specificiteit en het effect op DNA-analyse bij het gebruik van deze reagentia om vermoedelijk op dierlijk bloed te testen. Het doel van deze studie was om de twee reagentia te valideren voor gebruik met dierlijk bloed, en hun prestaties te vergelijken om de beste test te kiezen op basis van de omstandigheden in wildlife crime investigation.
de gevoeligheid, specificiteit, stabiliteit en robuustheid van de methoden werden beoordeeld door experimenten met verdunningen van dierlijk bloed (van 1:4 tot 1:65536) met behulp van directe en indirecte (rub) tests, mogelijke storende stoffen, bloedbronnen van verschillende diersoorten en oud bloed. De effecten van de twee reagentia op de daaropvolgende DNA-analyse werden ook onderzocht.
tijdens de directe tests toonde Kastle Meyer een hogere gevoeligheid, waarbij bloed werd gedetecteerd tot een verdunning van 1: 16.384, een orde van grootte lager dan Hemastix. Tijdens de rub test toonde Hemastix echter een hogere gevoeligheid, waarbij bloed werd gedetecteerd tot een verdunning van 1: 64 op poreuze materialen, terwijl Kastle Meyer alleen positief was tot een verdunning van 1: 16. Bovendien, bij het gebruik van hetzelfde swab voor vermoedelijke testen en DNA-extractie, Hemastix testen toegestaan amplificatie van een voldoende hoeveelheid DNA voor soortidentificatie op de grens van gevoeligheid op poreuze materialen (1:64) terwijl Kastle Meyer remde de meeste amplificatie van DNA op de minder gevoelige limiet van 1:16 verdunning. Aan de andere kant, Hemastix toonde een veel lagere specificiteit, het produceren van vals positieve resultaten bij blootstelling aan tomaat, aardappel, roest, avian uric acid, bleekmiddel en sink rot, terwijl Kastle Meyer alleen een zwakke positieve reactie van aardappel. Beide tests zijn even goed uitgevoerd om vers bloed van verschillende diersoorten op te sporen. De stabiliteitstest gaf vergelijkbare resultaten bij de tests, behalve voor oude visbloedvlekken, waar de Kastle Meyer-test slecht presteerde.
vanwege het gebruiksgemak, de hogere gevoeligheid en het gebrek aan interferentie met downstream DNA-analyse, en ondanks de verminderde specificiteit in vergelijking met Kastle Meyer, is de Hemastix-methode geschikter voor gebruik in onderzoeken naar wildlifecriminaliteit. De positieve resultaten zouden altijd met DNA-analyse worden bevestigd en de lage interferentie van het reagens zal het gebruik van één enkel zwabber voor veronderstelde tests en DNA-bemonstering toestaan.
