objetivo/plano de fundo: formas bacterianas deficientes em Parede Celular (formas L) podem ocorrer junto com a resistência a fatores que desencadeiam sua aparência. É de interesse estudar a relação entre a transformação em forma de L de Mycobacterium tuberculosis e a exposição de tolerância a drogas ao etambutol (EMB), um inibidor da síntese da parede celular.
Métodos: L-forma variante foi produzido a partir de uma sensível EMB cepa de M. tuberculosis através de um criogênicos estresse protocolo de tratamento e, posteriormente, foi cultivada em Middlebrook 7H9 semi-sólido médio, contendo EMB em uma concentração inibitória mínima de 2mg/L. Susceptibilidade à EMB da estirpe parental e sua forma variante foi avaliada fenotipicamente e usando a reação em cadeia da polimerase-polimorfismo de comprimento de fragmentos de restrição do ensaio de segmentação de uma mutação no embB306 gene fragmento.
resultados: Em contraste com a sensibilidade ao EMB da cepa parental, sua variante em forma de L mostrou resistência fenotípica a altas concentrações de EMB (16mg/L), mas a mutação no embB306 não foi encontrada. A observação por microscopia eletrônica da variante da forma L mostrou uma população heterogênica de bactérias, com diferentes graus de deficiência da parede celular, bem como células do tipo protoplástico sem paredes celulares. De especial interesse foram as estruturas semelhantes a cápsulas observadas ao redor das células em forma de L e a matriz semelhante a biofilme produzida pela população em forma de L.
conclusão: Sugerimos que a expressão de resistência fenotípica ao EMB em M. tuberculosis pode estar associada a alterações ou perda de paredes celulares em bactérias em forma de L, respectivamente, o que resulta na falta de um alvo específico para a ação do EMB. Além disso, a produção de estruturas semelhantes a cápsulas e matriz de biofilme por formas L poderia contribuir para sua resistência e sobrevivência na presença de agentes antibacterianos.
