Os microarrays de DNA mostrou que o keratoacanthoma e cutânea de carcinoma de células são entidades distintas, com exclusivo assinaturas moleculares (Figura 2). Nosso estudo identificou genes diferencialmente expressos e vias moleculares enriquecidas quando o ceratoacantoma é comparado com carcinoma de células escamosas e pele normal, estabelecendo uma base forte para sua separação no nível molecular. Nossos dados mostraram 1449 genes diferencialmente expressos entre queratoacantoma e carcinoma de células escamosas (>5 FC: P<0,01). O grande número de genes expressos diferencialmente sugere que o queratoacantoma não é apenas uma lesão distinta, mas também é marcadamente diferente molecularmente do carcinoma de células escamosas. Nosso estudo anterior de microarray da lesão precursora intimamente relacionada, queratose actínica8 mostrou apenas nove genes que foram expressos diferencialmente do carcinoma de células escamosas (>2 FC: P <0,05). Entidades adicionais que são molecularmente distintas do carcinoma de células escamosas incluem pele normal8 e hiperplasia pseudoepiteliomatosa: 9 382 e 703 genes diferencialmente expressos, respectivamente (>2 FC: P<0,05) em nossos estudos anteriores de microarray.
outros estudos mostraram similarmente que o queratoacantoma e o carcinoma de células escamosas são molecularmente distintos. Um dos primeiros estudos moleculares utilizando perda de heterozigosidade mostrou múltiplas diferenças entre queratoacantoma e carcinoma de células escamosas.11, 12 A freqüência de perda de heterozigose para keratoacanthomas foi baixa, com isolados de perdas em 9p, 9q, e 10q. Esses resultados foram em contraste ao carcinoma de células escamosas, onde a perda de heterozigosidade foi comum no cromossomo braços 3p, 9p, 9q, 13q, 17p, e 17q.11, 12 Mais recentes CGH array estudos mostraram diferenças significativas entre keratoacanthoma e carcinoma de células escamosas na distribuição de números de aberrante clones e recorrente aberrações entre eles.13, 14 Li et al14 mostraram aberrações recorrentes em queratoacantomas nos cromossomos 17, 19, 20 e X em cerca de um terço dos casos. Aberrações recorrentes em carcinomas de células escamosas foram encontradas em 40% dos carcinomas de células escamosas nos cromossomos 7, 8, 10, 13, 17, e X, com perdas em determinadas regiões de 17P e 17Q recorrentes em 50% das amostras. Além disso, um peixe recente estudado mostrou que as aberrações do número de cópias do gene EGFR e MYC eram mais comuns no carcinoma de células escamosas do que no ceratoacantoma.15
tem havido muito debate sobre se o queratoacantoma é uma lesão reativa/hiperplásica ou neoplásica. Para obter informações sobre a patogênese do ceratoacantoma, focamos nas funções biológicas moleculares alteradas e nas vias canônicas na comparação do ceratoacantoma com a pele normal, e os resultados sugerem que o ceratoacantoma é neoplásico. Duas das três principais vias canônicas: mecanismos moleculares de câncer e sinalização de integrina são bem conhecidos por estarem envolvidos na neoplasia.8 revisamos anteriormente a via de sinalização da integrina e seu suposto papel na carcinogênese do carcinoma de células escamosas.Quatro das cinco vias biológicas moleculares mais significativas desreguladas no ceratoacantoma estão relacionadas à tumorigênese e incluem desenvolvimento celular, crescimento e diferenciação celular, ciclo celular e movimento celular. Em apoio adicional ao ceratoacantoma como lesão neoplásica, os estudos moleculares discutidos anteriormente mostraram aberrações moleculares, incluindo perda de heterozigosidade e aberrações do número de cópias por CGH que seriam esperadas em uma lesão neoplásica.11, 12, 13, 14 esses achados moleculares seriam incomuns em um processo reativo ou hiperplásico.
Alguns dos mais upregulated genes em comparação keratoacanthoma com a pele normal estão implicados na neoplasia e incluem MALAT-1, S100A8, e EHF (FCs=216.93, 156.65, e 69.28). MALAT-1 é um longo noncoding RNA que é pensado para induzir um tumor de migração e crescimento, possivelmente, através da modulação da caspase-3, -8, Bax, Bcl-2 e Bcl-xL.16 Sua sobreexpressão tem sido mostrado para ser significativamente associado a metástases e de mau prognóstico no câncer colorretal, nonsmall células do pulmão, próstata, pâncreas, cervical e carcinomas.16, 17, 18 O EHF faz parte da família ETS de fatores de transcrições que demonstraram participar de uma variedade de funções celulares, incluindo desenvolvimento, diferenciação, proliferação, apoptose, migração, remodelação tecidual, invasão e angiogênese.19 fusões de genes ETS com outros alvos foram descritas no sarcoma de Ewing, leucemia mielomonocítica crônica e carcinoma da próstata.20 O EHF demonstrou ser regulado diferencialmente em carcinomas de próstata, ovário seroso e mama.19, 20, 21 S100A8 é uma proteína de ligação ao cálcio que também foi regulada positivamente em nosso estudo comparando o carcinoma de células escamosas à hiperplasia pseudoepiteliomatosa e o carcinoma de células escamosas à pele normal.8, 9 está envolvido na regulação de vários processos celulares, e seu papel na tumorigênese foi discutido anteriormente.9
muitos acreditam que os queratoacantomas são neoplasias benignas de regressão. Foi hipotetizado que essas lesões podem ser derivadas do folículo e sofrer apoptose semelhante à involução catágena do folículo piloso.1, 2, 5, 6, 7 nossos dados sustentam essa hipótese, mostrando uma regulação positiva proeminente da via de morte/apoptose celular biológica molecular e da via canônica de sinalização de endocitose mediada por clatrina na comparação do ceratoacantoma com a pele normal (Tabela 3). Vários dos mais upregulated diferencialmente expressos genes (CALM1, TP63, YWHAZ, CALR, MMP1, S100A8, e ARHGEF12) são supostamente envolvidos na morte celular/apoptose. A regulação positiva dessas vias pode ser responsável pelo comportamento benigno do ceratoacantoma.
vários estudos imuno-histoquímicos também mostraram que a apoptose tem um papel na regressão do ceratoacantoma. Um estudo distinguiu o queratoacantoma do carcinoma de células escamosas, mostrando que o queratoacantoma expressou marcadores associados ao início (o receptor citolítico P2X7) e fases de conclusão de (TUNEL) da apoptose.Outros 22 mostraram que o ceratoacantoma expressa fortemente as proteínas bax e bak, que são consideradas essenciais para a execução da apoptose.23 outro estudo examinado ceratoacantomas mostrou menor expressão da proteína anti-apoptótica Bcl-xL que é consistente com um possível papel da apoptose na regressão do ceratoacantoma.24 BCL-2 é um proto-oncogene envolvido em proteger pilhas de submeter-se à apoptose e foi mostrado para ter a expressão diminuída em regredir keratoacanthomas.23, 25
hipotetizamos que o enriquecimento proeminente da via de sinalização da endocitose mediada por clatrina pode ser devido à apoptose mediada por granzima. As células T citotóxicas e as células assassinas naturais utilizam proteínas efetoras líticas de perforina e granzimas para eliminar as células-alvo. As células T citotóxicas demonstraram desempenhar um papel importante na regressão do ceratoacantoma.26 Thiery et al.27 mostraram que a perforina liberada pelas células T citotóxicas ativa a endocitose dependente de clatrina e dinamina para facilitar a internalização da perforina e granzima pelas células – alvo após sua liberação. Esta é a primeira etapa crítica que inicia a apoptose das células-alvo e pode explicar a regulação positiva da sinalização da endocitose mediada pela clatrina.
o modelo de apoptose mediada por granzima também pode ser responsável pela regulação positiva proeminente das proteínas de ligação ao cálcio CALM1 (FC=73,16). CALM1 codifica calmodulin, que é um membro da família de proteínas de ligação ao cálcio EF-hand. Ele codifica uma proteína de ligação ao cálcio que é uma das quatro subunidades da fosforilase quinase. No modelo de apoptose mediada por granzima, a ação da perforina cria poros na membrana plasmática das células-alvo, permitindo transitoriamente Ca2 na célula. O influxo de Ca2 leva a uma resposta de reparo de membrana ferida, onde lisossomos e endossomos se fundem à membrana plasmática para selar novamente a membrana danificada. Essa resposta protege as células-alvo da necrose e permite que elas sofram o processo mais lento e dependente de ATP da apoptose mediada por granzima.A calmodulina é uma proteína de ligação ao cálcio que pode ter um papel nesta resposta. O aumento do cálcio intracelular em conjunto com apoptose mediada por Fas associada à calmodulina foi demonstrado na linha de células B humana FMO, células Jerkat, osteoclastos e células de colangiocarcinoma.28
o papel do S100A8 na tumorigênese foi discutido anteriormente. No entanto, s100a8 através de um complexo com S100A9 também demonstrou ter um papel na apoptose tumoral em linfoma de camundongo e linhas celulares de leucemia humana, linhas celulares de carcinoma cervical e linhas de células de carcinoma de cólon.29, 30, 31 O complexo S100A8/A9 demonstrou induzir efeitos inibitórios na proliferação e invasividade de células tumorais30 através da exclusão do zinco das células-alvo e através da ligação aos receptores de superfície das células-alvo.31
acreditamos que o queratoacantoma é uma entidade distinta, separada do carcinoma de células escamosas. Nós e outros mostramos que o queratoacantoma e o carcinoma de células escamosas têm assinaturas moleculares únicas.11, 12, 13, 14 Além disso, há uma preponderância de evidências de que o queratoacantoma e o carcinoma de células escamosas têm características clinicopatológicas distintas.1, 2, 5, 6, 7 os genes diferencialmente expressos e as vias biológicas moleculares enriquecidas que separam o queratoacantoma da pele normal sugerem que o queratoacantoma é uma neoplasia que pode regredir devido à regulação positiva na Via morte/apoptose celular. Além disso, acreditamos que os queratoacantomas actínicos devem ser tratados de forma conservadora e esperamos que nossos achados ajudem a prevenir tratamentos radicais, incluindo excisão ampla, radioterapia e dissecção do pescoço para essa neoplasia escamosa envolvente benigna.
