um Knockin mouse define um modelo animal no qual uma sequência genética de interesse é alterada por uma substituição por um transgene, ou adicionando sequências genéticas que não são encontradas dentro do locus.
a inserção de um transgene é normalmente feita em loci específicos. Essa abordagem “direcionada” causa menos distúrbios do ambiente genético ativo da transcrição.
os ratos Knockin são adequados para uma ampla gama de aplicações, desde o estudo de elementos reguladores, como promotores, até a produção de anticorpos humanizados terapeuticamente úteis.
Nossa Knockin modelo de mouse soluções
Além do convencional Knockins onde uma sequência de gene de interesse é adicionado a um endógena locus, oferecemos um conjunto de soluções de uso comum:
- Rápido Knockin™ (Rosa26 e Hprt)
controle Total de sua expressão gênica visando o melhor estudada permissivo loci Rosa26 e Hprt.
- Ponto de mutação Knockin mouse
Afetam a função de uma determinada proteína (ganho ou perda de função) por um ou mais nucleotídeos mutantes
- Repórter do mouse
Monitor de eventos genéticos, proteína de função, localização e célula de tráfico de
- Modelos de camundongos humanizados
Substituir um mouse sequência de gene, com o ser humano contrapartida
Condicional de ativação do gene inserções ou substituições
Todos os Knockin projetos podem suportar condições que permitam o seu gene de inserção ou substituição de estar activado: A) em tipos de células específicas em um determinado tecido, enquanto outros tipos e tecidos de células exibem uma expressão gênica funcional não modificada e / ou B) temporalmente em um determinado momento em animais embrionários, pós-natais ou adultos.
Duas abordagens comuns são normalmente utilizadas:
lox-STOP-lox
A Cre recombinase reconhece os loci de recombinação loxP que faz com que uma eliminação da seqüência de PARADA entre os dois loxP sites, permitindo a transcrição de sua mutação do gene de interesse.
FLEx
Ambos loxP e lox511 são reconhecidos pelo Cre recombinase mas lox511 sites só podem se recombinar com outros lox511 sites, não com loxP sites.
quando a sequência de DNA é flanqueada por locais lox em orientações opostas, o Cre inverterá a sequência entre os locais. Se a sequência de DNA for flanqueada por locais lox na mesma orientação, o Cre excluirá a sequência.Ao combinar o tipo de sites lox, número e orientação de sites lox que cercam seus genes de interesse, uma poderosa ferramenta FLEx pode ser criada para suas necessidades científicas específicas.
quanto à abordagem lox-STOP-lox, expressar a recombinase Cre em um tipo ou tecido de célula específico leva a uma expressão gênica mutada específica do tecido, e usar uma recombinase CRE ativada por indutor leva a uma expressão gênica mutada temporalmente na presença de um indutor como o tamoxifeno.
