propriedades antimicrobianas, antioxidantes e cicatrizantes de Kigelia africana (Lam.) Beneth. e Strophanthus hispidus DC.

resumo

infecções microbianas de vários tipos de feridas são um desafio para o tratamento de feridas e cicatrização de feridas. O estudo teve como objetivo investigar as propriedades antimicrobianas e antioxidantes dos extratos de folhas de metanol e casca de caule de Kigelia africana e extratos de folhas e raízes de metanol de Strophanthus hispidus e também determinar as propriedades cicatrizantes dos extratos. As atividades antimicrobianas dos extratos de metanol foram determinadas contra duas bactérias Gram-positivas e duas gram-negativas e um fungo utilizando métodos de difusão e micro-diluição de ágar. A atividade antioxidante foi determinada usando o método 1,1-difenil-2–picril-hidrazil (DPPH). A influência dos extratos na taxa de fechamento da ferida foi investigada usando o modelo de excisão da ferida e a investigação histopatológica dos tecidos da ferida tratados e não tratados realizados. Os MICs do extrato foliar de K. africana contra organismos de teste foram de 2,5–7,5 mg / mL e o extrato da casca do caule foi de 2,25–7.5 mg / mL. O extrato foliar de S. hispidus apresentou intervalo MIC de 2,5–7,5 mg/mL e 2,5-10 mg/mL para extrato radicular. O IC50 dos extratos foliares e da casca do caule de K. africana foi de 56,9 e 13,7 µg/mL, respectivamente, e as folhas e raízes de S. hispidus foram de 49,8 e 45,1 µg/mL, respectivamente. Os extratos de K. africana (7,5% P/P) apresentaram contração significativa () da ferida no dia 7, com 72% do fechamento da ferida com contrações significativas () da ferida foram observadas no dia 11 para a casca do caule de K. africana, extratos foliares e radiculares de S. hispidus. Os tecidos da ferida tratados com os extratos mostraram melhor colagenação, re-epiteliazição e rápida formação de granulação em comparação com os tecidos da ferida não tratados. Os extratos foram encontrados para conter alcalóides, saponinas, taninos, flavonóides, carboidratos e glicosídeos sapogenéticos. A impressão digital HPLC dos extratos foi desenvolvida. A folha, a casca do caule e os extratos radiculares de K. africana E S. hispidus exibiram propriedades antimicrobianas, antioxidantes e aprimoradas de cicatrização de feridas, o que pode justificar o uso medicinal das plantas para o tratamento de infecções microbianas e feridas.

1. Introdução

a ferida é mais comumente usada quando se refere a lesões na pele ou tecidos ou órgãos subjacentes por um golpe, corte, míssil ou facada. A ferida também inclui lesões na pele causadas por produtos químicos, frio, fricção, calor, pressão e raios, e manifestação na pele de condições internas, por exemplo, úlceras de pressão e úlceras . As feridas têm um tremendo impacto na economia da saúde de cura. As feridas crônicas representam um grande fardo para a saúde e drenam os recursos de saúde do mundo, incluindo Gana .

Um grande problema com feridas é o alto risco de infecção; assim, se um agente ativo contra microorganismos que causam a infecção é utilizado no processo de cura, em seguida, ele irá ajudar a reduzir o risco de infecção e o tempo total para a cicatrização de feridas pode ser reduzido significativamente. Por exemplo, é muito fácil para as bactérias entrarem pela pele quebrada e penetrarem no resto do corpo. As bactérias colonizam feridas dentro de 48 horas após a lesão e bactérias como Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa e Streptococcus spp podem causar infecção e isso pode prolongar a fase inflamatória da cicatrização de feridas . Portanto, agentes antimicrobianos adequados podem ser usados topicamente ou sistematicamente para prevenir a infecção de feridas e acelerar o processo de cicatrização de feridas.

processo de inflamação, normalmente, conduz à liberação de mediadores biologicamente ativos para atrair neutrófilos, leucócitos e monócitos, para a área da ferida e ataque detritos e microorganismos através da fagocitose. Isso leva à produção de radicais livres de oxigênio, como peróxido de hidrogênio, ânion superóxido e ânion hidroxila e o excesso desses agentes causa danos aos tecidos no homem ou no animal se eles sobrecarregarem os antioxidantes naturais do hospedeiro, como catalase, superóxido dismutase e glutationa peroxidase. Portanto, os antioxidantes impedem a atividade dos radicais livres e, assim, evitam os danos às células e tecidos, proporcionando proteção a indivíduos humanos e animais, e também aumentam a cicatrização de feridas infectadas e não infectadas .

Kigelia africana (Lam.) Beneth. pertence à família Bignoniaceae. É conhecido como” Nufutene ” no local Asante-Twi em Gana. É comum em toda a África, incluindo Gana, Serra Leoa, Gâmbia, Sudão E Nigéria e é encontrado em Savana úmida e perto de corpos de rios, onde ocorre em abundância . É usado para tratar doenças de pele, incluindo infecções fúngicas, furúnculos, psoríase e eczema, hanseníase, sífilis e câncer. As raízes, a madeira e as folhas contêm kigelinona, ácido vernólico, kigelina, iridóides, luteolina e 6-hidroxiluteolina . Os iridóides têm efeito antibacteriano .

Strophanthus hispidus DC. pertence à família Apocynaceae e é chamado de “Maatwa” no local Asante-Twi. Pode ser encontrada nos seguintes países: Gana, Senegal, Sudão, Congo, Uganda e Tanzânia. Tem muitos usos medicinais, como antídoto para o veneno da cobra de pescoço preto, no tratamento de úlceras de sífilis, sífilis óssea e feridas e feridas de vermes da Guiné . A planta contém um glicosídeo amorfo (pseudo-estrofantina) com óleo pesado, dois alcalóides (trigonelina e Colina), resina, mucilagem e um açúcar ramnose . O objetivo do estudo é investigar as propriedades antimicrobianas, antioxidantes e cicatrizantes de extratos de folhas de metanol e casca de caule de K. africana e extratos de folhas e raízes de metanol de S. hispidus.

2. Materiais e métodos

2.1. Planta de Materiais e produtos Químicos

Tronco de casca e as folhas de K. africana e folhas e raízes de S. hispidus foram coletados em Maio de 2011 a partir de Krofrom no Atwima-Kwanwoma distrito da Região Ashanti e autenticado pelo Dr. A. Asase de Gana Herbário do Departamento de Botânica, Universidade de Gana. Espécimes de Voucher das plantas foram depositados no Herbário de Gana, Universidade de Gana, Gana. As várias partes da planta foram secas à temperatura ambiente (28-30°C) por duas semanas. As partes secas da planta foram então moídas em materiais em pó. Salvo indicação em contrário, todos os produtos químicos foram comprados da Sigma (Deisenhofen, Alemanha).

2.2. Preparação de Extratos

Vinte gramas de pó de K. africana folhas foram adicionados 300 mL de 70% de metanol e extraído com Ultra-Turrax T 50 (Janke & Kunkel, Labortenik, Alemanha) sob gelo-resfriamento a uma velocidade de 24000 rpm por 3 a 5 min. A mistura resultante foi então filtrada usando o papel de filtro Whatmann Nº 10. O evaporador rotativo foi então usado para concentrar o sobrenadante abaixo de 40°C e liofilizado. O procedimento foi repetido para todos os materiais vegetais em pó restantes (casca do caule de K. africana, folhas e raízes de S. hispidus). Os rendimentos do extrato de folha (KAL) e extrato de casca de caule (KASB) de K. africana e extrato de folha (SHL) e extrato de raiz (SHR) de S. hispidus foram 4,3, 12,8, 13,0 e 11,4% w/w (relacionado ao material seco), respectivamente.

2.3. Triagem fitoquímica preliminar

a triagem Fitoquímica foi realizada nos extratos de folhas de metanol e casca de caule de K. africana e folhas e raízes de S. hispidus para verificar a presença de amido, taninos, glicosídeos (sapogenético, antraceno e cianogenético), flavonóides, esteróides e alcalóides . O teor de taninos foi determinado de acordo com os métodos de Glasl e usando pirogallol (Merck, Darmstadt, Alemanha, Pureza 99,5%, HPLC) como composto de referência.

2.4. A impressão digital HPLC dos extratos

a impressão digital HPLC dos extratos (KAL, KASB, SHL e SHR) foi realizada em um sistema Thermo Finnigan HPLC usando Hypersil Gold C18, coluna de fase reversa ( mm). A concentração de extratos foi de 10 mg / mL. HPLC condições ideais: volume de injeção: 10 µL, comprimento de onda de detecção: 254 nm, fase móvel : metanol : água/50: 50 (condição isocrática), temperatura: 22°C, Pressão Da Bomba: 28 MPa, vazão: 1 mL/min e tempo de funcionamento: 10 min.

2.5. Determinação da atividade antimicrobiana dos extratos

2.5.1. Teste de sensibilidade antimicrobiana

As atividades antimicrobiana dos extratos (KAL, KASB, SHL e SHR) e fazem referência a drogas (cloranfenicol e clotrimazole (Sigma, Deisenhofen, Alemanha) foram determinadas de acordo com o método descrito por Agyare e seus colegas . Os meios de ágar nutriente (Oxoid Limited, Reino Unido) e ágar sabouraud (Oxoid Limited, Reino Unido) foram utilizados para ambas as determinações de atividades antibacterianas e antifúngicas, respectivamente. Cem microlitro (106 ufc/mL) dos organismos de teste (Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Bacillus subtilis NCTC 10073 e clínica de fungos agente Candida albicans) foram utilizados para sementes de agar nutriente e placas de agar sabouraud, respectivamente. Em cada uma dessas placas, quatro (4) eqüidistantes poços com diâmetro de 8 mm foram cortadas usando estéril de cortiça borer e poços preenchidos com diferentes concentrações de extratos de referência e medicamentos dissolvidos em dimetil sulfóxido (DMSO) e permitiu a se difundir em temperatura ambiente (28-30°C) por 1 h. As zonas de inibição do crescimento foram medidas após 24 h de incubação a 37°C (para as bactérias) e 3 dias a 30°C (para o fungo). A atividade do DMSO foi determinada e não apresentou atividade contra os organismos de teste.

2.5.2. Método de microdiluição

os MICs dos extratos (KAL, KASB, SHL e SHR) contra as bactérias de teste foram determinados usando a técnica de microdiluição modificada, conforme descrito por Agyare et al. e o Eloff . As soluções de teste (100 mg/mL) dos extratos foram preparadas com DMSO e a solução de teste (25-100 µL) foi diluída em série para 100 µg/mL e 100 µL (106 ufc/mL) das bactérias de teste cultivadas em caldo de nutrientes (Oxoid Limited, Reino Unido) adicionado a cada poço nas microplacas. As microplacas Cobertas foram incubadas a 37°C por 24 h. Para indicar crescimento, 30 µL de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazólio brometo dissolvido em água foi adicionado aos poços de microplacas e incubado a 37°C por 30 min. Teste agente fúngico (C. albicans) foi cultivado em caldo Sabouraud dextrose (Oxoid Limited, Reino Unido) e depois incubado por 3 dias a 30°C. Os microfones dos extratos KAL, KASB, SHL e SHR contra o fungo teste foram determinados de acordo com as diretrizes descritas no Comitê Nacional de padrões de Laboratório Clínico para fungos filamentosos. As concentrações inibitórias mínimas dos extratos contra os organismos de teste foram detectadas como a concentração mínima de extratos que não apresentaram crescimento microbiano após a adição de MTT ao meio e incubação a 37°C por 20 min . Os experimentos acima foram repetidos três vezes.

2.6. Determinação da atividade de eliminação de radicais livres

as atividades de eliminação de radicais livres dos extratos foram determinadas de acordo com o método de Chizzola e seus colegas usando 1, 1-difenil-2-picril-hidrazil (DPPH). Solução (0,1 mM) de DPPH em metanol foi preparada e 10 µL desta solução foram adicionados a 100 µL de extratos de metanol juntamente com α-tocoferol em diferentes concentrações em placas de microtitre de 96 poços. As placas foram agitadas por 30 seg e após 30 min a absorbância foi medida a 517 nm. A porcentagem de inibição (%) da eliminação de radicais foi calculada usando a seguinte equação. A inibição, onde está a absorvância do controle, é a absorvância da amostra a 517 nm e a concentração inibitória, IC50 é a quantidade (µg/mL) reduzindo a absorvância em 50%.

2.7. Avaliação das propriedades cicatrizantes (modelo de excisão de feridas)

2.7.1. Animais experimentais

trinta e cinco ratos (Sprague Dawley fêmea) foram alojados em gaiolas de aço inoxidável e alimentados com dieta normal de ratos comerciais (Gafco, Tema, Gana), dada água ad libitum e mantida em condições laboratoriais (temperatura 28-30°C, Umidade Relativa 60-70% e ciclo normal claro-escuro). Um dia antes do experimento, os ratos foram levados ao laboratório e habituados ao manuseio do experimentador e ao aparelho para minimizar o efeito do estresse e da novidade. Todos os procedimentos e técnicas utilizados nesses estudos estavam de acordo com as diretrizes do Instituto Nacional de saúde para o cuidado e uso de animais de laboratório (NIH, publicação do Departamento de Serviços de Saúde nº 83-23, revisada em 1985). Os protocolos para o estudo foram aprovados pelo Comitê de Ética departamental.

2.7.2. Modelo de ferida de excisão

os animais (ratos Sprague Dawley fêmeas) pesando 115-120 g foram anestesiados com cetamina a 120 mg / kg de peso corporal por via subcutânea antes da criação das feridas. O pêlo dorsal dos animais foi raspado até um diâmetro circular de cerca de 40 mm por meio de lâminas de barbear e a área prevista da ferida a ser criada foi delineada na pele raspada. As áreas foram limpas com etanol a 70% antes que as feridas de excisão fossem criadas de acordo com o método modificado de Bhakta et al. . Feridas na pele foram criadas ao longo das marcações usando fórceps dentados, lâminas cirúrgicas e tesouras pontiagudas. Todas as feridas foram deixadas abertas e os animais divididos em sete (7) grupos de cinco animais cada. O primeiro grupo foi tratado topicamente com 1% de pomada de sulfadiazina de prata (Arytons Drugs, Gana) como medicamento de referência . O segundo grupo foi tratado com creme aquoso (veículo sozinho). O terceiro grupo não foi tratado e permitiu a cicatrização normal de feridas. Os últimos quatro grupos foram tratados com cremes de extrato de 7,5% P/P (KAL, KASB, SHL e SHR), respectivamente. O tratamento da ferida começou no 2º dia após a criação da ferida. Os extratos e medicamentos de referência foram aplicados topicamente nas feridas 24 horas por 24 dias. No decorrer do tratamento, fotografias em escala das áreas da ferida foram tiradas (por meio de Câmera Digital de alta resolução) ao lado de uma medição em escala milimétrica a cada 48 h a partir do primeiro dia de tratamento da ferida. As áreas da ferida foram determinadas a cada dois dias até o 24º dia.

2.8. Estudos histopatológicos

amostras de tecido da ferida de animais não tratados e tratados foram tomadas durante o processo de cicatrização no dia 14. A cicatriz da ferida de espessura total da seção transversal, de cerca de 6 mm de espessura de cada grupo, foi coletada ao final do experimento para avaliar as alterações histopatológicas . As amostras foram fixadas em formalina tamponada a 10% por 24 h e desidratadas com uma sequência de soluções de etanol-xileno, processadas e bloqueadas com parafina a 40-60°C e depois seccionadas em seções de 5-6 µm de espessura. As seções foram coradas com hematoxilina e mancha de eosina, mancha de Van Gieson e mancha azul de toluidina. Os cortes corados de hematoxilina e eosina e os cortes corados de Van Gieson foram verificados quanto à deposição de colágeno. Seções coradas de azul de toluidina foram usadas para manchar mastócitos .

2.9. Análise estatística

GraphPad Prism versão 5.0 Para Windows (Software GraphPad, San Diego, CA, EUA) foi utilizado para todas as análises estatísticas. Os dados são apresentados como SEM médio () e analisados por ANOVA unidirecional, seguido pelo teste de comparação múltipla de Dunnet. * , * * e * * * foram considerados estatisticamente significativos em todas as análises. Os gráficos foram plotados usando Sigma Plot Para Windows Versão 11.0 (Systat Software Inc., Alemanha).

3. Resultados

3.1. Triagem fitoquímica preliminar

tanto a casca da folha quanto a casca do caule de K. africana E S. hispidus continham taninos (com quantidades variáveis), esteróides, saponinas, glicosídeos sapogenéticos e carboidratos, enquanto as folhas das duas plantas contêm flavonóides. Alcalóides estavam presentes tanto na folha quanto na raiz de S. hispidus (Tabela 1).

3.2. HPLC Dedo-Impressão de Extratos

HPLC dedo-impressão de extratos (KAL, KASB, SHL e SHR) foi determinado para identificar os principais picos (compostos), nos diversos extratos para fins de identificação e controlo de qualidade (Figuras 1, 2, 3 e 4).

Figura 1

cromatograma de HPLC (dedo-impressão) de metanol do extrato da folha (KAL) de K. africana em 254 nm.

Figure 2

HPLC chromatogram (finger-printing) of methanol stem bark extract (KASB) of K. africana at 254 nm.

Figure 3

HPLC chromatogram (finger-printing) of methanol leaf extract (SHL) of S. hispidus at 254 nm.

Figura 4

cromatograma de HPLC (dedo-impressão) de metanol extrato de raiz de (SHR) de S. hispidus a 254 nm.

3.3. Atividade antimicrobiana

O metanol extratos (KAL, KASB, SHL e SHR) foram encontrados para ser ativo contra os organismos de teste (E. coli, P. aeruginosa, S. aureus, B. subtilis e C. albicans), com variação média de zonas de inibição e a P. aeruginosa foi encontrado para ser menos suscetíveis aos extratos. A concentração inibitória mínima varia de K. os extratos africanos (KAL e KASB) contra os organismos de teste foram de 2,25 a 7,5 mg/mL e os extratos de S. hispidus (SHL e SHR) foram de 2,5 a 10 mg/mL (Tabela 2). No que diz respeito ao método de difusão de ágar, todos os extratos (KAL, KASB, SHL e SHR) com concentrações de 20 e 50 mg/mL apresentam zonas de inibição mais elevadas contra os organismos de ensaio do que a concentração de 10 mg/mL (Tabela 3).

3.4. Atividade antioxidante

todos os extratos apresentaram algum nível de propriedades antioxidantes com KASB tendo menor IC50 e KAL com menor atividade de eliminação livre (Tabela 4 e Figura 5).

Figura 5

eliminação de radicais Livres actividades de metanol do extrato da folha (KAL) e extrato da casca do caule (KASB) de K. africana e extrato de folha (SHL), extrato de raiz de (SHR) de S. hispidus e-tocoferol (antioxidante de referência) determinado pelo método DPPH.

3.5. Atividade de cicatrização de feridas(taxa de fechamento da ferida)

todos os grupos tratados com extratos (Kal, KASB, SHL e SHR) exibiram atividades significativas nas taxas de fechamento da ferida em comparação com o não tratado e o veículo sozinho com KAL e SHL tendo influências significativas ( e, resp.) sobre a taxa de fechamento da ferida do 7º ao 15º dia após o tratamento (figuras 6 e 8, Tabela 5) e KASB e SHR exibindo efeitos semelhantes significativos na cicatrização de feridas do 10º ao 18º dia após o tratamento (figuras 7 e 9, Tabela 5).

3.6. Estudos histopatológicos

estudos histológicos revelaram proliferação profusa de fibroblastos com grau variável de fibrose. Os espécimes apresentaram 70 a 80% de fibrose densa e espessada para as feridas tratadas com os extratos, enquanto a pomada de sulfadiazina de prata de 1% (controle positivo) mostrou 60 a 70% de fibrose. Células de fibroblastos e fibras de colágeno estavam proeminentemente presentes nos grupos de referência e extratos tratados em comparação com o controle não tratado. Houve angiogênese profusa, colagenação aprimorada e reepitelização, evidência de respostas marcadas ao tratamento em meio a inflamação persistente com tecidos da ferida tratados com os extratos em comparação com os tecidos da ferida não tratados (Figura 10).

(um)

(b)

(c)

(d)

(e)

(f)

(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)

Figura 10

exame Histopatológico das feridas tecidos são tratados com veículo, extratos, e os tecidos não tratados. Imagens representativas coradas com hematoxilina e eosina, Van Gieson da mancha e toluidina azul mancha tratados diariamente com 7,5% w/w cremes de metanol do extrato da folha (KAL) de K. africana (a), metanol tronco extrato da casca (KASB) de K. africana (b), metanol do extrato da folha (SHL) de creme de S. hispidus (c) e metanol extrato de raiz de (SHR) de creme de S. hispidus (d) e a ferida não tratada tecidos (e) por 14 dias. (a) KAL: angiogênese profusa, colagenação aprimorada e reepitelização, evidente de respostas marcadas ao tratamento em meio a inflamação persistente. B) KASB: angiogênese apreciável e formação de tecido de granulação com evidência de apoptose após necrose tecidual com colagenação e reepitelização menos intensas. (C) SHL: com colagenação intensa apreciável e reepitelização. (D) SHR: com formação de tecido de granulação apreciável manifestada como reabastecimento de tecido. Colagenação e reepitelização também foram a sério em comparação com o tecido da ferida não tratada. (e) tecidos da ferida não tratados com inflamação persistente com área incompleta da ferida; evidência de má formação de tecido de granulação, colagenação e reepitelização, mas angiogênese profusa. (f) Os tecidos da ferida tratados com sulfadiazina de prata de 1% w/w apresentaram rápida formação de tecido de granulação, colagenação, evidente de cicatrização de feridas aprimorada e reepitelização evidente da superfície da ferida queratinosa irregular. Legenda: AG: angiogênese, CO: colagenação, DS: espaço morto após necrose, GR: tecido de granulação após apoptose, IC: área incompleta da ferida, se: tecido inflamado, KE: epitélio queratinoso, ND: detritos necróticos de inflamação persistente. RE: reepitelização.

4. Discussão

a presente investigação descreve algumas das atividades biológicas, incluindo propriedades antimicrobianas e cicatrizantes das folhas, casca do caule e extratos de raízes das plantas tropicais K. africana e S. hispidus. Os Produtos vegetais são potenciais agentes cicatrizantes e amplamente preferidos por causa de sua ampla disponibilidade, menos ou nenhum efeito colateral e eficácia como preparações brutas . A triagem fitoquímica das folhas secas e raiz de S. hispidus revelou a presença de taninos, alcalóides, saponinas, esteróides, carboidratos e glicosídeos sapogenéticos e flavonóides nas folhas. Os alcalóides estavam ausentes nas folhas secas e na casca do caule de K. africana e saponinas, esteróides, carboidratos e glicosídeos sapogenéticos estavam presentes em ambos os materiais vegetais. Flavonóides também foram encontrados nas folhas de K. africana (Tabela 1). A impressão digital HPLC dos extratos (KAL, KASB, SHL e SHR) também foi desenvolvida para fins de identificação e controle de Qualidade (Figuras 1, 2, 3 e 4).

os constituintes fitoquímicos de uma planta geralmente determinam a ação fisiológica no corpo humano. Os antioxidantes são agentes que protegem as células contra danos causados por moléculas conhecidas como radicais livres. As atividades antioxidantes dos extratos se devem principalmente à presença de compostos fenólicos, como flavonóides, ácidos fenólicos, taninos e diterpenos fenólicos . Assim, os constituintes dos extratos, como taninos e flavonóides, desempenham um papel importante na cicatrização de feridas, prevenindo e protegendo o dano oxidativo dos radicais livres .

A atividade antimicrobiana do metanol extratos de K. africana folhas e caule casca e S. hispidus folhas e raízes foi determinada contra quatro bactérias, duas bactérias Gram-positivas (S. aureus e B. subtilis), duas bactérias Gram-negativas (E. coli e P. aeruginosa), e um fungo (C. albicans), usando a copa do prato método de difusão em agar. Os extratos de metanol das duas plantas foram ativos contra todos os organismos testados (Tabela 2). A mínima concentração inibitória (MIC) foi determinado como a menor concentração do extrato bruto em que não há crescimento microbiano e Microfones de KAL contra S. aureus, B. subtilis, E. coli, P. aeruginosa e C. albicans foram 5, 2.5, 5.5, 7,5 e 2,5 mg/mL, respectivamente, e que de KASB foram 5, 5.5, 5.25, 7.5, e 2,25 mg/mL, respectivamente. Os extratos SHL e SHR também apresentaram atividade antimicrobiana semelhante e seus microfones estavam na mesma faixa dos extratos K. africana (Tabelas 2 e 3). As atividades antibacterianas e antifúngicas dos extratos (KAL, KASB, SHL e SHR) foram semelhantes à atividade exibida pelos extratos foliares de Kigelia pinnata (Jacq.) C. conforme relatado por Binutu et al. . A ação antimicrobiana dos extratos pode ser atribuída à natureza adstringente dos constituintes fenólicos, incluindo taninos e outros polifenóis presentes nos extratos .

a habitação de bactérias patogênicas como estafilococos, estreptococos e Pseudomonas em feridas normalmente pode levar à infecção de feridas que podem resultar na formação de feridas crônicas . A partir deste estudo, percebeu-se que os extratos de K. africana e S. hispidus exibiram atividade antimicrobiana forte e de amplo espectro contra esses patógenos. Como a maioria dos MICs dos extratos contra os organismos de teste estava abaixo de 8 mg/mL, pode-se inferir que os extratos exibiram atividade antimicrobiana potente de acordo com Fabry e seus colegas . A aplicação tópica de agentes antimicrobianos ou extratos é um método de terapia eficiente para destruir populações microbianas devido à disponibilidade dos agentes ativos no local da ferida, o que leva a uma maior atividade de cicatrização de feridas .

os valores de IC50 dos extratos (KAL, KASB, SHL e SHR) foram 1,5, 56,9, 13,7, 49,8 e 45,1 µg/mL, respectivamente (Tabela 4). Esses resultados sugerem que esses extratos possuem propriedades antioxidantes, com exceção dos extratos de S. hispidus, e isso pode facilitar a cicatrização de feridas . Isso pode indicar que os usos tradicionais de S. hispidus como agente cicatrizante pode não ser necessariamente devido à sua atividade antioxidante, mas sim baseado em outros efeitos biológicos. Os valores de IC50 de folhas e casca de caule de K. africana foram semelhantes aos achados de Gathirwa e seus colegas .

extratos (KAL, KASB, SHL e SHR) teve influência significativa sobre a taxa de fechamento da ferida com base nos diferentes dias de tratamento das feridas com os extratos em comparação com os não tratados. O extrato de SHL exibiu efeito aprimorado significativo no processo de cicatrização de feridas no dia 11 () com fechamento percentual da ferida de 90.13 (Figura 8) em comparação com as feridas não tratadas. A influência do SHL nas feridas foi semelhante à do extrato de SHR com aumento significativo da taxa de contração da ferida no dia 11 () e fechamento da ferida de 91,72% (Figura 9). A influência do extrato de KASB (Figura 7) foi semelhante aos extratos de SHL e SHR. No entanto, o extrato de KAL melhorou significativamente a contração da ferida do dia 7 () com fechamento da ferida de 85,1% (Figura 6) ao 17º dia. O exame histopatológico dos tecidos da ferida revelou angiogênese profusa, colagenização aprimorada e reepitelização em comparação com as feridas não tratadas (Figura 10). Essas atividades biológicas dos extratos podem ser devidas ao aumento da proliferação de fibroblastos e queratinócitos e à redução bem-sucedida de bactérias patogênicas pelos extratos e podem ser atribuídas aos constituintes fitoquímicos dos extratos.

os efeitos observados no creme apenas tratados e as feridas não tratadas não foram estatisticamente significativos em comparação com os extratos ou as feridas tratadas com sulfadiazina de prata (referência). Isso também pode indicar que os componentes do creme aquoso não interferiram na atividade dos extratos e, portanto, os efeitos aprimorados dos extratos podem ser devidos apenas aos princípios bioativos presentes nesses extratos. Os efeitos cicatrizantes dos extratos podem ser devidos aos vários constituintes fitoquímicos presentes neles. Taninos como proantocianidinos e outros taninos, incluindo ácido tânico, geraniina e furosina, são conhecidos por facilitar a cicatrização de feridas . Os extratos foram encontrados para conter flavonóides e saponinas e esses metabólitos secundários foram encontrados para melhorar a cicatrização de feridas e, portanto, os efeitos de cicatrização de feridas aprimorados dos extratos podem ser atribuídos aos seus constituintes fitoquímicos.

os achados acima podem apoiar as alegações de que as feridas tratadas com extratos vegetais cicatrizam mais rapidamente e melhor do que as feridas não tratadas e o uso dessas plantas para o tratamento de infecções microbianas. No entanto, o isolamento e caracterização de compostos bioativos responsáveis por essas propriedades farmacológicas precisam ser realizados.

5. Conclusão

metanol de folha e caule casca de K. africana e metanol de folha e raiz de extratos de S. hispidus exibiu antioxidante, antimicrobiana atividades com MICROFONE intervalos de 2,25 para 7,5 mg/mL e 2,5 a 10 mg/mL, respectivamente, contra os organismos de teste, reforçada a cicatrização de feridas propriedades e estas propriedades farmacológicas podem justificar os usos medicinais destas plantas para o tratamento de infecções microbianas e feridas. O fracionamento guiado pela bioatividade e o isolamento dos compostos bioativos responsáveis pelas atividades biológicas seriam realizados.

conflito de interesses

os autores declaram que não têm conflito de interesses.

agradecimentos

os autores desejam expressar sua gratidão ao Sr. Thomas Ansah do Departamento de Farmacologia, KNUST, Kumasi, Gana por sua assistência técnica e Nana Yaw Atefah pela coleta das plantas. Eles também reconheceram o Dr .. Paul Ossei, do Departamento de patologia do Hospital Universitário Komfo Anokye, Kumasi, Gana, por sua contribuição na avaliação patológica dos tecidos das feridas.