Sistêmica Atividade do Avermectins Contra o Gato de Pulgas (Siphonaptera: Pulicidae)

Resumo

Ivermectina tem sistêmico potente atividade contra várias espécies de nematóides e artrópodes, mas existem algumas espécies importantes nestes dois grupos, tais como o gato pulga Ctenocephalides felis (Bouché), que parecem ser refratários a ela. Em um esforço para determinar se a falta de atividade sistêmica contra C. felis é específico para ivermectina, ou se é um fenômeno de toda a classe, 20 derivados de avermectina foram testados em um sistema de alimentação de pulgas de membrana artificial em concentrações de 20, 10 e 1 µg/ml. Os resultados mostraram que a ivermectina apresentou valores de LC90 e LC50 contra pulgas de 19,1 e 9,9 µg/ml, respectivamente. Apenas quatro dos outros 19 compostos avaliados possuíam valores LC90 e LC50 mais potentes que a ivermectina e, mesmo assim, a vantagem era modesta. Entre esses quatro compostos estava um aumento de duas vezes na potência em relação à ivermectina quando os valores de LC90 foram considerados (intervalo, 9,2–10.3 µg / ml) e um aumento de duas a oito vezes quando os valores de LC50 foram examinados (intervalo, 1,23–5,26 µg/ml). Nem a posse nem o número de açúcares oleandrosil na espinha dorsal macrocíclica foram relevantes para a atividade adicional da pulga, porque entre esses quatro compostos estavam dois dissacarídeos, um monossacarídeo e uma aglicona. Além disso, a disposição de ligação entre C-22 e 23 não contribuiu para o aumento da atividade porque essas moléculas compreendem membros com ligações simples ou duplas. Um desses análogos de avermectina foi ampliado e testado por via subcutânea em um cão em >100 vezes a dosagem comercial de ivermectina e eficácia zero foi observada contra a pulga. Concluímos que mesmo a melhor avermectina in vitro não tem o potencial in vivo de se tornar um tratamento comercial de pulgas oral ou subcutânea para animais de companhia.

a classe de endectocidas de avermectina tem potente atividade sistêmica contra inúmeras espécies de nematóides e artrópodes (Egerton et al. 1979, 1980). Particularmente impressionante, por exemplo, são quase absoluta eficácias contra helmintos, tais como imaturos dirofilariose, Dirofilaria immitis em cães em 6,0 µg/kg (Campbell, 1989) e contra os insetos, como as larvas do comum gado grub, Hypoderma lineatum (Villers), em bovinos de 0,2 µg/kg (Drummond, 1984). No entanto, apesar dessa tremenda potência, existem outros organismos dentro desses grupos que parecem ser refratários à ivermectina. A pulga do gato, Ctenocephalides felis (Bouché), é um exemplo clinicamente relevante. A ivermectina foi administrada por via oral semanalmente a 0,5 mg / kg ou diariamente a 0.05 mg/kg e observado ser inativo contra este parasita em cães (Blair et al. 1984). Banks et al. (2000) e Shoop et al. (2001) corroboraram independentemente esses resultados, mostrando que a ivermectina tem fraca atividade sistêmica contra a pulga do gato em ensaios de alimentação de pulgas de membrana artificial.

em um esforço para determinar se a falta de atividade sistêmica contra pulgas é específica da ivermectina, ou se é um fenômeno de toda a classe, 20 avermectinas foram testadas em um sistema de alimentação de pulgas de membrana artificial. A série estrategicamente selecionada de avermectinas testadas continha representantes da maioria dos sites quimicamente acessíveis que foram explorados em torno do macrociclo. O grupo compreende todas as avermectinas que ocorrem naturalmente, bem como membros semissintéticos das séries biologicamente importantes de aglicona, monossacarídeo e dissacarídeo. Os compostos comercializados Abamectina, ivermectina, milbemicina D e selamectina também foram incluídos. Neste artigo, apresentamos as potências relativas desses membros da família avermectina contra pulgas por meio de testes em um sistema de membrana artificial e mostramos resultados de eficácia in vivo de um cão administrado por via subcutânea com uma das avermectinas mais potentes testadas.

materiais e métodos

O Galgo.

o sistema de alimentação de pulgas de membrana artificial que usamos é uma modificação do” cão artificial ” fabricado por Jay R. Georgi (FleaData, Freeville, NY). Este artificiais membrana sistema foi projetado para trás pulgas, mas também foi sugerido que ele poderia testar os efeitos de inseticidas sistêmicos (Wade e Georgi 1988 e Pullen e Meola 1996) e tem sido usado para descobrir o romance indol terpênicos, nodulisporic Um ácido (Shoop et al. 2001). Em uma colaboração com Jay R. Georgi, modificamos o cão artificial. Este novo sistema (Fig. 1) recebeu a designação “Greyhound” porque foi projetado para ser mais eficiente, mais fácil de configurar e permitiu que um número maior de compostos fosse testado simultaneamente. Ao contrário do cão artificial, que contém apenas 25, gaiolas de 5 cm suspensas individualmente abaixo de um gabinete de Plexiglas aquecido, o novo sistema contém um coletor removível de 59 por 38 cm que contém gaiolas de 104, 2,5 cm. Também substituímos as mangas de alimentação de alumínio não disponíveis por Mangas de plástico CVC (Costar, Cambridge, MA). As mangas plásticas foram descartadas após cada uso para minimizar a probabilidade de contaminação por drogas.

Criação De Pulgas.

nossa colônia de pulgas foi mantida em Gatos alojados de acordo com nosso Comitê Institucional de cuidados e uso de animais. Os ovos coletados de gatos foram incubados a 28 ° C e 85% RH em um meio composto por oito partes de areia e uma parte de sangue bovino liofilizado (California Spray Dry Company, Stockton, CA). As pulgas usadas neste estudo emergiram de sua puparia dentro de 48 h.

preparação composta.

avermectinas foram testadas nas concentrações de 20, 10 e 1 µg/ml. Duas repetições de cada composto em cada nível foram testadas em uma comparação lado a lado usando dois de nossos sistemas de alimentação. O veículo utilizado foi o polietileno glicol 400 e o dimetilsulfóxido (2:1). Foram utilizados dez microlitros de veículo por mililitro de sangue bovino heparinizado. Todos os compostos foram fermentados ou modificados sinteticamente por químicos Merck, exceto selamectina.

a purificação preliminar da selamectina procedeu da seguinte forma. Seis ampolas de revolução (240 mg cada) foram diluídas em volumes mínimos de CH2Cl2 e carregadas em uma almofada de sílica gel (4 polegadas de altura). Eluição de gradiente,

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