(nota: na descrição A seguir, o formato do ensaio é imobilizar o ligante para medir o receptor livre na amostra. Por outro lado, o receptor pode ser imobilizado para medir o ligante livre na amostra, dependendo dos materiais utilizados.)
a medição do receptor livre é realizada expondo brevemente a mistura da amostra a uma fase sólida na qual o ligante é imobilizado. O tempo de exposição é crítico porque manter o tempo de Interação da amostra para a fase sólida bastante curto resulta em uma situação em que a única ligação significativa à fase sólida é do receptor livre. O ensaio de exclusão cinética está em contraste com um ensaio de competição em que a solução equilibrada está em contato com a fase sólida por tempo suficiente para que o ligante de fase sólida concorra ao receptor da solução.
a vantagem do KinExA é que o sinal do receptor capturado representa apenas a concentração que está livre na solução. Conhecer a concentração de equilíbrio do receptor permite a determinação das constantes de ligação, conforme descrito na página de ligação reversível.
os instrumentos comercialmente disponíveis para a realização de ensaios KinExA (Sapidyne KinExA 4000, 3200 e 3100) utilizam uma pequena coluna de partículas através da qual a amostra e outros reagentes são passados. O tempo de contato de qualquer porção da amostra com a fase sólida é então o tempo de trânsito através da coluna e pode ser controlado pela taxa de fluxo escolhida (de cerca de 50 milissegundos a cerca de um segundo).
sistemas com ligantes de alcance nM ou mais apertados estarão no modo de ensaio de exclusão cinética (modo KinExA). Ligantes mais fracos ainda podem ser medidos, mas podem exigir cuidados extras para evitar perturbações da amostra a partir da medição. O KinExA é particularmente adequado para medir afinidade e cinética e também funciona como uma plataforma de imunoensaio aprimorada. Uma explicação mais detalhada das medições KinExA está incluída abaixo.
