Kastle-Meyer e Hemastix reagentes são prováveis testes comumente utilizados em forense casework para a detecção de sangue, e a sua adequação tenha sido analisado em várias publicações. No entanto, estudos até o momento se concentraram na validação desses testes apenas no sangue humano, e nenhum trabalho publicado analisou a sensibilidade, especificidade e efeito na análise de DNA ao usar esses reagentes para testar presuntivamente o sangue animal. O objetivo deste estudo foi validar os dois reagentes para uso com sangue animal e comparar seu desempenho para escolher o melhor teste com base nas circunstâncias na investigação de crimes contra a vida selvagem.
a sensibilidade, especificidade, estabilidade e robustez dos métodos foram avaliadas por experimentos com diluições de sangue animal (de 1:4 a 1:65536) usando testes diretos e indiretos (rub), substâncias interferentes potenciais, fontes de sangue de diferentes espécies e sangue envelhecido. Os efeitos dos dois reagentes na análise de DNA subsequente também foram investigados.
durante os testes diretos, Kastle Meyer mostrou uma sensibilidade maior, detectando sangue até uma diluição de 1: 16.384, uma ordem de magnitude menor que Hemastix. No entanto, durante o teste de fricção, o Hemastix mostrou uma sensibilidade maior, detectando sangue até uma diluição de 1:64 em materiais porosos, enquanto Kastle Meyer foi positivo apenas até uma diluição de 1:16. Além disso, ao usar o mesmo swab para o teste presuntivo e extração de DNA, Hemastix testes permitiram a amplificação de uma quantidade suficiente de DNA para a identificação de espécies no seu limite de sensibilidade em materiais porosos (1:64), enquanto Kastle-Meyer inibida mais de amplificação de DNA em seus menos sensíveis limite de 1:16 a diluição. Por outro lado, o Hemastix mostrou uma especificidade muito menor, produzindo resultados falsos positivos quando exposto a tomate, batata, ferrugem, ácido úrico aviário, alvejante e podridão do dissipador, enquanto Kastle Meyer produziu apenas uma reação positiva fraca da batata. Ambos os testes realizaram igualmente bem a detecção de sangue fresco de diferentes espécies animais. O teste de estabilidade deu resultados comparáveis entre os testes, exceto para manchas de sangue de peixe envelhecido, onde o teste de Kastle Meyer teve um desempenho ruim.
devido à sua facilidade de Uso, maior sensibilidade e falta de interferência na análise de DNA a jusante, e apesar de sua especificidade reduzida em comparação com Kastle Meyer, o método Hemastix é mais apropriado para uso em investigações de crimes contra a vida selvagem. Resultados positivos sempre seriam confirmados com análise de DNA e a baixa interferência do reagente permitirá o uso de um único cotonete para testes presuntivos e amostragem de DNA.
