metoda Knott modificată este utilizată pentru concentrarea și identificarea microfilariilor, în special Dirofilaria immitis. Trebuie diferențiat de microfilaria nepatogenă a Dipetalonema reconditum („Dipet” pe scurt).
un frotiu direct de sânge se poate face în același timp. Este un test rapid, fără concentrație pentru microfilarie. Dirofilaria și Dipetul sunt diferențiate prin modelul lor de motilitate.
aceste teste trebuie efectuate întotdeauna ori de câte ori un pacient testează antigenul heartworm pozitiv sau există vreun motiv pentru a suspecta că câinele are sau a avut în prezent boala heartworm în trecut. Prezența Dirofilariei va avea impact asupra cursului și / sau alegerii tratamentului.
testul Knott se poate face fără a face un frotiu direct, dar nu face niciodată un frotiu direct fără a face un test Knott. Knott ‘ s este un test mai sensibil, deoarece concentrează microfilaria, astfel încât acestea sunt mai puțin susceptibile de a fi ratate în timpul examinării microscopice.
procedura pentru frotiu direct:
simplu. Așezați o picătură de sânge, de preferință dintr-un tub EDTA sau o seringă heparinizată, în centrul unui diapozitiv. Picătură o alunecare de acoperire peste partea de sus și să examineze sub microscop pe 10x putere. Dirofilaria va avea o mișcare staționară, zvârcolitoare; Dipetalonema va prezenta o mișcare mai rapidă, direcțională și va trage adesea chiar de pe teren.
procedura pentru tehnica Knott modificată:
asigurați-vă că purtați mănuși pentru protecție. Folosind un tub de centrifugă de 15 ml, adăugați aproximativ 10 ml de formalină 2% (Aceasta poate fi achiziționată comercial) la 1 ml de sânge anticoagulant. Așezați degetul mare peste partea superioară a tubului acoperit și inversați de mai multe ori pentru a amesteca bine. Centrifugați timp de 5 minute la 1000 până la 1500 rpm.
ar trebui să puteți vizualiza un dop albicios în partea de jos a tubului după rotire. Aruncați supernatantul în recipientul corespunzător pentru deșeuri periculoase.
folosind o pipetă lungă din sticlă sau plastic, adăugați o picătură de pată nouă de albastru de metilen
utilizați pipeta pentru a amesteca pata cu sedimentul
adăugați o picătură din acest amestec în centrul unui diapozitiv. Aruncați o alunecare de acoperire deasupra. Examinați la microscop sub 10x putere.
spre deosebire de frotiul direct, microfilaria se va prezenta ca staționară. Dirofilaria trebuie distinsă de Dipetalonema în funcție de dimensiune și formă. Utilizați următorul tabel pentru a vă ajuta să diferențiați:
|
parametru |
D. immitus |
D. reconditum |
|
lungime (microni) |
||
|
lățime (microni) |
||
|
forma (capătul anterior) |
Conic |
blunt |
|
forma (corpul) |
drept |
curbat |
|
forma (coada) |
drept |
cârlig buton |
|
număr prezent |
puțini la mulți |
puțini |
|
mișcare |
staționare |
se deplasează peste diapozitiv |
(Universitatea Cornell)
un alt test rece pentru microfilaria
umpleți un tub de microhematocrit și rotiți-vă ca și cum ați face un pcv.
așezați tubul pe un diapozitiv și puneți-l pe scena microscopului. Concentrați-vă pe haina buffy pe puterea 10x-dacă un câine este pozitiv și are microfilaria circulantă, puteți vedea microfilaria care se învârte în jurul hainei buffy!
