(notă: în următoarea descriere, formatul testului este de a imobiliza ligandul pentru a măsura receptorul liber din eșantion. În schimb, receptorul poate fi imobilizat pentru a măsura ligandul liber din probă, în funcție de materialele utilizate.)
măsurarea receptorului liber se realizează prin expunerea scurtă a amestecului de probă la o fază solidă pe care ligandul este imobilizat. Timpul de expunere este critic, deoarece menținerea timpului de interacțiune al probei la faza solidă are ca rezultat destul de scurt o situație în care singura legare semnificativă la faza solidă este de la receptorul liber. Testul de excludere cinetică este în contrast cu un test de concurență în care soluția echilibrată este în contact cu faza solidă suficient de lungă pentru ca ligandul de fază solidă să concureze pentru receptorul soluției.
avantajul KinExA este că semnalul receptorului capturat reprezintă doar concentrația care este liberă în soluție. Cunoașterea concentrației de echilibru a receptorului permite determinarea constantelor de legare așa cum este descris pe pagina de legare reversibilă.
instrumentele disponibile în comerț pentru efectuarea testelor KinExA (KinExA 4000, 3200 și 3100 de la Sapidyne) utilizează o coloană mică de particule prin care sunt trecute proba și alți reactivi. Timpul de contact al oricărei porțiuni a eșantionului cu faza solidă este apoi timpul de tranzit prin coloană și poate fi controlat de debitul ales (de la aproximativ 50 de milisecunde la aproximativ o secundă).
sistemele cu lianți de gamă nM sau mai strânși vor fi în modul de testare a excluderii cinetice (modul KinExA). Lianții mai slabi pot fi încă măsurați, dar pot necesita o atenție suplimentară pentru a evita perturbarea eșantionului din măsurare. KinExA este deosebit de potrivit pentru măsurarea afinității și cineticii și funcționează, de asemenea, ca o platformă îmbunătățită de testare imunologică. O explicație mai detaliată a măsurătorilor KinExA sunt incluse mai jos.
