dyskusja
średnia liczba pałeczek kwasu mlekowego w niektórych badaniach była podobna do naszego badania, z odpowiednio 8 log CFU/mL, 7,2 log CFU/mL i 1,2×107 CFU / mL pałeczek kwasu mlekowego w kefirze (14,15,16). W próbce kefiru stwierdzono liczbę 5×107 CFU/mL jednostek tworzących kolonię laboratoryjną jako całkowitą średnią liczbę w naszym badaniu.
w niniejszym badaniu L. pentosus, L. brevis, L. plantarum, L. fermentum, L. kefiri i L. lindneri izolowano od kefiru. Najczęstsze Lactobacillus wyizolowane z ziaren kefiru, jak opisano w innych badaniach, to: L. brevis, L. kefir, Lactobacillus acidophilus, L. plantarum, L. kefiranofaciens, Lactobacillus kefirgranum i Lactobacillus parakefiri. Laboratorium wyizolowane z kefiru w naszym badaniu były takie same jak w następujących badaniach: L. fermentum Witthuhn et al. (16); L. kefiri Bosch et al. (17), Kesmen i Kacmaz (19) oraz Magalhaes i in. (20); L. plantarum Garrote et al. (18) oraz Witthuhn et al. (16) oraz L. brevis Simova i wsp. (21). i Witthuhn et al. (16).
wyizolowaliśmy L. kefiri z kefiru. Pintado et al. wyizolowano L. kefiri z kefiru portugalskiego, stosując jako to samo API 50. Chen et al. zidentyfikowano również L. kefiri z kefiru na Tajwanie (22,23).
nasze dane wskazują, że wybrane szczepy LK 9 L. kefiri zostały skolonizowane w jelitach tego badania pacjentów. Podobnie jak w badaniu przeprowadzonym przez Toscano et al., po 1 miesiącu podawania L. kefiri LKF01, szczep Lactobacillus wykryto w kale wszystkich osób uczestniczących w naszym badaniu z obciążeniem bakteryjnym 105-106 CFU/g. zgodnie z tym samym badaniem, L. kefiri wykazał silną zdolność do modulowania składu mikroflory jelitowej, co prowadziło do znaczącej redukcji kilku rodzajów bakterii bezpośrednio zaangażowanych w wystąpienie odpowiedzi prozapalnej i chorób przewodu pokarmowego (24).
według Braata i wsp., stwierdzono zmniejszenie liczby poziomów CRP u pacjentów z CD spożywających L. lactis przez 1 tydzień(25). W naszym badaniu poziom CRP zmniejszył się po 28-dniowym spożyciu kefiru u pacjentów z CD i był statystycznie istotny (p=0,015). Rośnie liczba badań oceniających właściwości immunomodulujące probiotyków. Właściwości immunomodulujące kefiru mogą wynikać z bezpośredniego działania środka bakteriobójczego lub mogą być pośrednie poprzez różne związki bioaktywne wytwarzane podczas procesu fermentacji (25). Immunomodulujące działanie kefiru można przypisać jego zdolności do zmniejszania lub naprawy przepuszczalności jelit tych probiotyków. W ten sposób kontakt między antygenami w gospodarzu a światłem jelitowym jest zmniejszony, co może zmniejszyć odpowiedź zapalną (26). IBD jest związany z mikroflorą jelitową. U ludzi z IBD, istnieje mała liczba lactobacilli i bifidobacteria i duża liczba bakterii beztlenowych. Leczenie przeprowadza się przy użyciu probiotyków, aby pomóc pacjentowi utrzymać okres remisji (27). W jelitach osób z IBD liczba Lactobacillus i Bifidobacterium jest niższa, a beztlenowce są wyższe. Probiotyki nie leczą choroby, jednak po pewnym czasie mogą przedłużyć okres remisji. Zwiększa to jakość życia pacjentów (25). Według danych z naszego badania zaobserwowano statystycznie istotną różnicę w skali bólu brzucha (p = 0,049) i dobrego samopoczucia (P=0,019) u pacjentów, którzy spożywali kefir zawierający probiotyki. Mają pozytywny wpływ na choroby spowodowane brakiem równowagi mikroflory jelitowej (28).
niektóre badania wykazują, że probiotyki mają wpływ na pacjentów z UC i CD (29). Według Tursi et al. (2010), wzmocnienie mieszaniny probiotycznej VSL # 3 jest bezpieczne i może zmniejszyć wskaźnik aktywności choroby UC (UCDAI) u pacjentów dotkniętych łagodnym do umiarkowanego UC leczonych kwasem 5-aminosalicylowym i/lub lekami immunosupresyjnymi. Ponadto poprawia krwawienie z odbytnicy i regeneruje remisję u pacjentów z nawracającym UC po 8 tygodniach leczenia. Parametry te nie osiągają jednak istotności statystycznej (30).
W porównaniu z 10 pacjentami leczonymi inaktywowanymi bakteriami, którym podawano żywe L. plantarum 299v, 6 z 9 pacjentów osiągnęło remisję (31).
pacjenci z nawrotami choroby o nasileniu łagodnym do umiarkowanego byli leczeni probiotykiem Saccharomyces boulardii w dawce 3×250 mg/dobę przez 4 tygodnie. Obserwowano 68% odsetek remisji (32).
pacjenci z UC, którzy byli w remisji w badaniu kontrolowanym placebo z użyciem sfermentowanych tabletek zawierających 1×1010 CFU Bifidobacterium breve, Bifidobacterium bifidum i L. acidophilus otrzymywali 100 mL mleka przez 12 miesięcy. Pod koniec okresu badania 73% pacjentów w grupie otrzymującej mleko fermentowane pozostawało w remisji, podczas gdy liczba ta wynosiła 10% w grupie placebo i stwierdzono istotną różnicę w remisji klinicznej; jednak nie stwierdzono żadnej różnicy po 1 roku po kolonoskopii (33).
jedno z pozostałych badań było tym, w którym czterdziestu pacjentów z remisją kliniczną i endoskopową uczestniczyło w randomizowanym badaniu kontrolowanym placebo. VSL # 3 był zakażony 6 g / dzień przez 9 miesięcy. Próbki kału wykazały znamienne zwiększenie stężenia Lactobacillus, bifidobacteria i Streptococcus thermophilus po wstępnej obróbce i leczeniu (p<0,01) tylko w poziomach wyjściowych w grupie leczonej VSL # 3 (34).
odkryliśmy również, że ilość Lactobacillus w kale pacjentów pod koniec 1 miesiąca spożycia kefiru wynosiła między 104 A 109 jtk/g dla wszystkich pacjentów. W przypadku L. kefiri stwierdzono, że U 17 pacjentów stężenie wynosiło od 104 do 106 jtk/g, a zmiana ilości bakterii Lactobacillus była znacząca.
w jednym badaniu związanym z nietolerancją laktozy grupie osób podawano mleko niskotłuszczowe, a innej grupie kefir. Badani mają nietolerancję laktozy. Nietolerancja laktozy jest spowodowana niską aktywnością β-galaktozydazy (laktazy) w jelitach. Biegunka i ból brzucha obserwowano w grupie mleka, ale tych skutków nie obserwowano w grupie kefiru (35). W nietolerancji laktozy osoby mają działanie osmotyczne poprzez fermentację laktozy, która nie jest trawiona z powodu niedoboru enzymów, a laktoza i metan, wodór i kwasy organiczne pojawiają się, co powoduje dyskomfort. Produkty mleczne mogą powodować gaz i wzdęcia u pacjentów z CD i UC. Niemniej jednak, ponieważ kefir ma Lactobacillus, który rozkłada laktozę w jelitach, w naszym badaniu nikt nie narzekał na objawy nietolerancji laktozy, takie jak ból brzucha i gaz (36). Pacjenci z CD i UC, którzy nie mogą spożywać produktów mlecznych, mogą łatwo spożywać kefir i nie czują się nieswojo i nie mogą trzymać się z dala od źródła wapnia.
w eksperymencie na 10 pacjentach z IBD podawano pacjentom mieszaninę probiotyczną VSL # 3 przez 2 miesiące, a stolec analizowano metodą PCR. W rezultacie stwierdzono, że kolonizacja szczepów S. thermophilus, Bifidobacterium infantis Y1 I B. breve Y8 jest podobna do zdrowych osób (37).
przeprowadzono jedno badanie w celu bezpośredniego wykrycia S. termofilny w kale ludzkim, z wyjątkiem technik opartych na hodowli lub procedur izolacji i oczyszczania DNA z niezależnym od kultury protokołem PCR. Przebadano trwałość S. thermophilus w jelitach 10 zdrowych osób, którym podawano VSL # 3 lub jogurt. Bakterie poszukiwane po 3 dniach podawania były wykrywane i nadal były wykrywane 6 dni po zawieszeniu leczenia.
Manichanh i in. (38) stwierdzono znaczące zmniejszenie liczby bakterii z rodziny Clostridium u pacjentów z CD przy użyciu metody analizy opartej na mikromacierzy DNA, ale nie stwierdzono znaczących różnic w rodzinie Bacteroides.
w badaniu Gophna et al. zastosowano metodę 16S rDNA-column library index. (39) do analizy mikrobioty jelitowej IBD. Podsumowując, zaobserwowano zmniejszenie liczby Bacteroidetes i Proteobacteria w CD, ale zmniejszenie rodziny Clostridium.
ogólny skład jelita jest uważany za najbardziej istotny w etiologii i patogenezie IBD. Jednak analizy mikrobioty są długie i pracochłonne, w wyniku czego tylko uprawna bakteria może wykryć 20% -30% mikrobioty. Ze względu na złożone wymagania środowiska beztlenowego, reszta nie może być hodowana. W związku z tym metody molekularne są szeroko stosowane do analizy mikrobioty (40).
w badaniu badającym, czy mikrobiom kału u pacjentów z UC i CD różnił się od zdrowych osób, badania z wykorzystaniem analizy polimorfizmu długości fragmentu końcowego wykazały różnice. Jednak Mikrobiologia jelitowa pacjentów z nieaktywnym UC jest podobna do tej u osób zdrowych. Identyfikacja mechanizmów jelitowych tych pacjentów i zmiany w strukturze mikrobioty mogą przyczynić się do opracowania nowych możliwości leczenia pacjentów z UC i CD (40).
podczas ciągłego spożywania pałeczki kwasu mlekowego w kefirze osadzają się w jelitach i wytwarzają kwaśne składniki, które korygują mikroflorę przeciwko chorobotwórczym bakteriom, dzięki czemu chore bakterie mogą zostać usunięte (41).
chociaż bakterie chorobotwórcze, takie jak Salmonella i Shigella, były związane z obecnością startera kefiru, patogeny te nie zostały rozwinięte (42). Ponadto laboratorium i drożdże obecne w mikroflorze mają działanie hamujące na mikroorganizmy jelitowe kefiru (43). Kefir skraca czas tranzytu, umożliwiając łatwe wyrzucanie kału. Zastosowanie antybiotykoterapii poprawia nieregularną florę jelitową (41).
pacjenci z UC i CD, którzy zaczęli stosować kefir w naszym badaniu, zostali skolonizowani przez probiotyki kefirowe zgodnie z pierwszym tygodniem i ostatnimi 2 tygodniami, kiedy zaczęli ustalać dodatni bilans w jelitach. Ponieważ wyniki w literaturze są w większości uzyskiwane za pomocą różnych metod oceny objawów, nie jesteśmy w stanie dokonać bezpośredniego porównania z danymi z naszego badania.
w naszym badaniu spadek liczby bólów brzucha i wzdęć w grupie IBD w porównaniu z grupą kontrolną był podobny do Nagendry i Shah (44).
efekt S. boulardii badano również w badaniu nad wpływem CD. Pacjenci, którzy byli w remisji z CD byli leczeni lekami idiopatycznymi. W tym leczeniu mezalaminę podawano grupie 3×g/dobę. Drugą grupą była S. boulardii przez 1 miesiąc i mezalamina 2×1 g/dobę przez 6 miesięcy. Odsetek remisji w grupie otrzymującej tylko mezalaminę wynosił 38%. Wskaźnik remisji dla mezalaminy i S. boulardii wynosił 94% (32).
u pacjentów z CD istnieją doświadczenia z Lactobacillus salivarius UCC118 i Lactobacillus GG jako probiotykami. Wyniki uzyskane dla tych pacjentów nie są wystarczające, ale obiecują przyszłą pracę.
w metaanalizie zaleca się stosowanie preparatów probiotycznych zawierających mieszaninę Lactobacillus, Escherichia coli lub Saccharomyces (45), które nie zapobiegały remisji w CD i zapobiegały nawrotom klinicznym i endoskopowym.
badanie pilotażowe przeprowadzone przez Guptę i wsp. wykazano, że Lactobacillus GG może zwiększać funkcję bariery jelitowej u dzieci z łagodnym do umiarkowanego aktywnym CD (46).
w podwójnie zaślepionym, randomizowanym, kontrolowanym badaniu z zastosowaniem Lactobacillus GG, dzieci z CD nie wydłużały czasu nawrotu (47).
stwierdzono, że Saccharomyces boulardii z mezalazyną są skuteczne tylko w grupie kontrolnej nawrotów po podaniu mesalazyny (32).
w badaniu przeprowadzonym przez Steed et al. w 2010, dokonując przeglądu pacjentów z aktywną CD, podano im symbiotyk zawierający Bifidobacterium longum i w rezultacie stwierdzono, że jest skuteczny w porównaniu z placebo. W leczeniu CD, randomizowane, kontrolowane badania dowiodły skuteczności probiotyków (48).
w naszym badaniu analizy mikrobiologicznej kału Grupa leczona kefirem wykazała znacznie większą liczbę bakterii mlekowych w kale niż grupa kontrolna. Przypisywano to ich zdolności do przetrwania przy niskim pH i wysokim stężeniu żółci, jak w doświadczeniach in vitro. Te potencjalnie probiotyczne bakterie kolonizujące błonę śluzową jelit stanowią barierę dla patogenów poprzez różne mechanizmy, konkurencję o składniki odżywcze i produkcję środków przeciwdrobnoustrojowych.
według Toscane et al. (24), L. kefiri wydaje się być skutecznym i bezpiecznym w utrzymaniu remisji u pacjentów z UC i może być dobrą opcją leczenia zapobiegającą nawrotom w tej grupie pacjentów. L. kefiri LKF01 wykazał silną zdolność do modulowania składu mikrobioty jelitowej, co prowadzi do znacznego spadku w kilku pokoleniach bakterii na początku bezpośredniej odpowiedzi prozapalnej i zaburzeń przewodu pokarmowego.
chociaż etiologia CD jest niepewna, dowody sugerują udział bakterii jelitowych, a badania wykazały, że bakterie, fusobacteria, enterokoki, E. coli i mniej bifidobacteria, lactobacilli, eubakteria, Clostridium coccoides i Clostridium leptum wykazały wyższe stężenia u pacjentów z CD. W przypadku Faecalibacterium prausnitzii i remisji u osób zdrowych, populacje bakterii kału uległy zmianie (48).
probiotyki mogą skutecznie chronić remisję UC, ale niewiele wiadomo o ich zdolności do wywoływania remisji. Dorośli pacjenci z łagodnym do umiarkowanego ZC zostali losowo przydzieleni do grupy otrzymującej 3, 6×1012 CFU VSL # 3 (n=77) dwa razy na dobę przez 12 tygodni oraz do grupy otrzymującej placebo (N=70). W badaniu UCDAI redukcję o 50% uzyskano po 6 tygodniach leczenia. UCDAI jest miarą stopnia występowania kału, krwawienia z odbytnicy, wyglądu błony śluzowej i aktywności choroby lekarza. Odsetek pacjentów z >50% poprawą wyniku UCDAI w 6. tygodniu porównywano z grupą otrzymującą placebo (10%; 0,001) w grupie otrzymującej VSL # 3 (25% vs.32,5%). W 12 tygodniu 33 (42.9%) pacjentów otrzymujących VSL # 3, którzy osiągnęli remisję porównywano z 11 (15, 7%) pacjentami otrzymującymi placebo (p<0, 001). Ponadto zaobserwowano, że liczba pacjentów otrzymujących VSL # 3 (40%; 51,9%) zmniejszyła się o 3 punkty w UCDAI w porównaniu z placebo (13%; 18,6%) (p<0,001). Grupa VSL # 3 wykazała znamiennie większe zmniejszenie punktacji UCDAI i objawów po 6 i 12 tygodniach w porównaniu z grupą placebo (49).
inne badania potwierdziły, że bakterie probiotyczne mogą zwiększać integralność szczelnych połączeń między komórkami nabłonka jelita podczas infekcji lub stanów zapalnych. Z tego powodu kolonizacja bakteriami probiotycznymi może powodować ekspozycję komórek odpornościowych na antygeny bakteryjne, które prawdopodobnie indukują IBD. Eksperymentalne zapalenie jelita grubego wykazało, że ochronne działanie mikroorganizmów probiotycznych (VSL # 3) w modelu sodowym siarczanu dekstranu pośredniczy w DNA, rozpoznanym przez receptor 9 błon śluzowych. Interakcja ta doprowadziła następnie do zwiększenia endogennej produkcji przetrwalnikowej beta-defenzyny i peptydów przeciwbakteryjnych. Ponadto donoszono, że leczenie wyhodowanych komórek nabłonka jelita VSL # 3 prowadzi do zwiększenia przezbłonkowego oporu elektrycznego, zmiany związanej ze zmniejszoną przepuszczalnością. W niniejszym badaniu inkubacja komórek nabłonka jelitowego z tym konsorcjum probiotycznym również indukowała ekspresję różnych mucyny, co skutkowało zmniejszoną adhezją mikroorganizmów i składników do powierzchni nabłonka (50). Zgodnie z naszym badaniem probiotyki zostały ocenione w modelach zwierzęcych oraz w niektórych badaniach klinicznych. Wykazano, że doustne podawanie probiotyków z VSL # 3 normalizuje funkcję bariery interleukiny 10 u myszy IBD. VSL # 3 to probiotyczny koktajl składający się z ośmiu różnych organizmów Gram-dodatnich. Wiele badań nad biologiczną aktywnością kefiru wykazało, że kefir ma działanie przeciwzapalne, immunomodulujące i przeciwbakteryjne i jest żywnością funkcjonalną (51). Regularne spożywanie kefiru wiąże się z nietolerancją laktozy i tolerancją; działanie antybakteryjne; działanie hipocholesterolemiczne; kontrola stężenia glukozy w osoczu; działanie przeciwnadciśnieniowe i przeciwzapalne; działanie przeciwutleniające, przeciwnowotworowe i przeciwalergiczne; i działanie lecznicze. Znaczna część prac wspierających te odkrycia została wykonana in vitro lub na modelach zwierzęcych (52). Wszystkie badania pokazują, że probiotyki mogą odgrywać ważną rolę w zarządzaniu IBD w przyszłości, pomimo faktu, że obecne badania kliniczne nie mają mocy statystycznej, prawdopodobnie ze względu na ograniczone dane. Dostępność nowych technik w celu lepszego zrozumienia interakcji bakterii i gospodarza oraz lepszego zdefiniowania modyfikacji mikrobioty w różnych podklasach klinicznych może być kluczem do sukcesu skutecznej terapii probiotycznej u pacjentów z IBD (50).
wady i Ograniczenia badania
nasze badanie ma pewne ograniczenia. Ponadto literatura dotycząca danych IBD jest niewystarczająca do wyciągnięcia jednoznacznych wniosków na temat zmian w jakości życia. Krótkotrwałe spożycie kefiru i zmiany w jakości życia w naszym badaniu mogły nie zostać ujawnione przez pacjentów. Niewystarczająca liczba pacjentów może uniemożliwić statystyczną istotność zmian.
mała wielkość próby i krótki czas są głównymi słabymi punktami niniejszego badania; jednak pacjentom z UC i CD bardzo trudno jest spożywać cokolwiek z powodu choroby. Szczególnie chcą poznać efekt objawów chorób przed spożyciem innego pokarmu. Brak badań nad kefirem był również kwestionowany przez pacjentów. Innym ograniczeniem naszego badania było to, że kwestionariusze były podawane samodzielnie przez pacjentów.
jedną z zalet naszych badań było to, że wykonywaliśmy zarówno analizę kału, jak i jednoczesną ocenę wzdęć, konsystencji defekacji, defekacji i dobrego samopoczucia z parametrami biochemicznymi w tym samym czasie. Mierzyliśmy też nasilenie objawów.
według danych z naszego badania regularne stosowanie kefiru może poprawić zarówno objawy, jak i jakość życia w krótkim okresie u pacjentów z IBD. Rzeczywisty wpływ probiotyków na ekologię jelit jest nadal do omówienia, ponieważ różnice w szczepach drobnoustrojów mają wiele czynników do zbadania, takich jak ich stężenie i preparaty.
Kefir ma cierpki, kremowy smak i oprócz wysokiej wartości odżywczej, wiadomo również, że ma działanie probiotyczne (53). Bakterie probiotyczne powinny być wytwarzane jako alternatywa dla probiotyków przemysłowych poprzez mikroorganizmy nie transgeniczne wyizolowane z naturalnych produktów spożywczych, takich jak kefir (54).
w kefirze jest wiele przydatnych mikroorganizmów probiotycznych. Jest łatwy do znalezienia i jest tani. Zbadaliśmy nieokreślone działanie kefiru u pacjentów z IBD, Lactobacillus i L. kefiri flory kału oraz parametry biochemiczne i objawy choroby. Konieczne są dalsze badania w celu oceny najlepszego efektu kefiru w stosunku do dawki, w tym monitorowanie pacjentów w celu oceny utrzymywania się potencjalnych korzystnych efektów u pacjentów z CD i UC po interwencji kefiru. Niestety niezliczone ludzkie badania prowadzone z kefirem są często źle zaprojektowane. Należy przeprowadzić więcej badań na ludziach w celu wykazania wpływu spożycia kefiru i zmniejszenia ryzyka choroby. Ponadto należy zbadać rzeczywisty wpływ probiotyków wpływających na ekologię jelit, a zaawansowane badania powinny być prowadzone na specyficznych dla choroby preparatach produktów spożywczych z niestandardowymi badaniami nad szczepami drobnoustrojów w dobrze zaprojektowanych randomizowanych badaniach klinicznych. Badania powinny być kontynuowane na większych populacjach pacjentów.
