Technologia KinExA-Sapidyne

(Uwaga: w poniższym opisie format testu polega na unieruchomieniu ligandu w celu pomiaru wolnego receptora w próbce. Odwrotnie, receptor może być unieruchomiony w celu pomiaru wolnego ligandu w próbce, w zależności od użytych materiałów.)
pomiar wolnego receptora jest dokonywany przez krótkotrwałe wystawienie mieszaniny próbki na fazę stałą, na której ligand jest unieruchomiony. Czas ekspozycji jest krytyczny, ponieważ utrzymywanie czasu interakcji próbki z fazą stałą dość krótko prowadzi do sytuacji, w której jedynym znaczącym wiązaniem z fazą stałą jest wolny receptor. Test wykluczenia kinetycznego jest przeciwieństwem testu konkurencji, w którym równoważony roztwór ma kontakt z fazą stałą wystarczająco długo, aby ligand fazy stałej mógł konkurować o receptor roztworu.
zaletą preparatu KinExA jest to, że sygnał z wychwytywanego receptora reprezentuje jedynie stężenie wolne w roztworze. Znajomość stężenia równowagi receptora pozwala na określenie stałych wiązania opisanych na stronie wiązania odwracalnego.
dostępne na rynku przyrządy do wykonywania testów KinExA (Kinexa 4000, 3200 i 3100 Sapidyne) wykorzystują małą kolumnę cząstek, przez którą przechodzi próbka i inne odczynniki. Czas kontaktu dowolnej części próbki z fazą stałą jest wtedy czasem tranzytu przez kolumnę i może być kontrolowany przez wybrane natężenie przepływu (od około 50 milisekund do około sekundy).

układy ze spoiwami zakresu nM lub ciaśniejszymi będą w trybie testu wykluczenia kinetycznego (tryb KinExA). Słabsze spoiwa mogą być nadal mierzone, ale mogą wymagać dodatkowej ostrożności, aby uniknąć zakłóceń próbki z pomiaru. KinExA szczególnie dobrze nadaje się do pomiaru powinowactwa i kinetyki, a także działa jako ulepszona Platforma testów immunologicznych. Bardziej szczegółowe wyjaśnienie pomiarów KinExA znajduje się poniżej.

Dodaj komentarz

Twój adres e-mail nie zostanie opublikowany.