Walidacja testów wstępnych na obecność krwi innej niż ludzka przy użyciu odczynników Kastle Meyer i Hemastix

odczynniki Kastle Meyer i Hemastix są testami wstępnymi powszechnie stosowanymi w kryminalistyce do wykrywania krwi, a ich przydatność została zweryfikowana w licznych publikacjach. Jednak dotychczasowe badania koncentrowały się na walidacji tych testów na samej ludzkiej krwi, a żadne opublikowane prace nie przyjrzały się wrażliwości, swoistości i wpływowi na analizę DNA podczas stosowania tych odczynników do przypuszczalnego testowania krwi zwierzęcej. Celem tego badania była Walidacja obu odczynników do stosowania z krwią zwierzęcą i porównanie ich wydajności w celu wyboru najlepszego testu w oparciu o okoliczności w śledztwie dotyczącym przestępstw przeciwko dzikiej przyrodzie.

czułość, swoistość, stabilność i wytrzymałość metod oceniano w eksperymentach z rozcieńczeniem krwi zwierzęcej (od 1: 4 do 1: 65536) z wykorzystaniem testów bezpośrednich i pośrednich (rub), potencjalnych substancji zakłócających, źródeł krwi różnych gatunków i krwi w wieku. Badano również wpływ obu odczynników na późniejszą analizę DNA.

podczas bezpośrednich testów Kastle Meyer wykazał większą czułość, wykrywając krew w rozcieńczeniu 1: 16,384, o jeden rząd wielkości niższy niż Hemastix. Jednak podczas testu rub, Hemastix wykazał większą czułość, wykrywając krew do rozcieńczenia 1:64 na materiałach porowatych, podczas gdy Kastle Meyer był pozytywny tylko do rozcieńczenia 1: 16. Co więcej, przy użyciu tego samego wymazu do badań domniemanych i ekstrakcji DNA, badanie Hemastix umożliwiło amplifikację wystarczającej ilości DNA do identyfikacji gatunku przy granicy czułości na materiałach porowatych (1:64), podczas gdy Kastle Meyer hamował większość amplifikacji DNA przy jego mniej czułym granicy rozcieńczenia 1:16. Z drugiej strony Hemastix wykazywał znacznie mniejszą specyficzność, dając fałszywie dodatnie wyniki pod wpływem kontaktu z pomidorami, ziemniakami, rdzą, ptasim kwasem moczowym, wybielaczem i zgnilizną zlewu, podczas gdy Kastle Meyer wywoływał jedynie słabą pozytywną reakcję z ziemniaka. Oba testy przeprowadzone równie dobrze wykrywały świeżą krew różnych gatunków zwierząt. Test stabilności dał porównywalne wyniki wśród badań, z wyjątkiem postarzanych plam krwi ryb, gdzie Test Kastle ’ a Meyera wypadł słabo.

ze względu na łatwość użycia, większą czułość i brak ingerencji w dalszą analizę DNA i pomimo mniejszej swoistości w porównaniu z Kastle ’ em Meyerem, metoda Hemastix jest bardziej odpowiednia do stosowania w dochodzeniach dotyczących przestępczości dzikiej przyrody. Pozytywne wyniki zawsze będą potwierdzone analizą DNA, a niska interferencja odczynnika pozwoli na użycie pojedynczego wymazu do wstępnego badania i pobierania próbek DNA.

Dodaj komentarz

Twój adres e-mail nie zostanie opublikowany.