antimikrobiella, antioxidanta och sårläkande egenskaper hos Kigelia africana (Lam.) Beneth. och Strophanthus hispidus DC.

Abstract

mikrobiella infektioner av olika typer av sår är en utmaning för behandling av sår och sårläkning. Studien var att undersöka antimikrobiella och antioxidantiska egenskaper hos metanolblad och stambarksextrakt av Kigelia africana och metanolblad och rotextrakt av Strophanthus hispidus och även för att bestämma sårläkningsegenskaper hos extrakten. Metanolextraktens antimikrobiella aktiviteter bestämdes mot två Gram-positiva och två Gram-negativa bakterier och en svamp med användning av agardiffusion och mikroutspädningsmetoder. Antioxidantaktiviteten bestämdes med användning av 1,1-difenyl-2–picryl-hydrazyl (DPPH) – metoden. Påverkan av extrakten på sårförslutningshastigheten undersöktes med hjälp av excisionssårmodellen och histopatologisk undersökning av behandlade och obehandlade sårvävnader utförda. Mikrofonerna av bladextrakt av K. africana mot testorganismer var 2,5–7,5 mg/mL och stambarksextrakt var 2,25-7.5 mg / mL. Bladextraktet av S. hispidus hade MIC-intervall på 2,5–7,5 mg/mL och 2,5-10 mg/mL för rotextrakt. IC50 av blad-och stambarksextrakt av K. africana var 56,9 respektive 13,7 kg/mL respektive blad och rot av S. hispidus var 49,8 respektive 45,1 kg/mL. K. africana-extrakt (7.5% w/w) visade signifikant () sårkontraktion vid Dag 7 med 72% av sårförslutning whiles signifikanta () sårkontraktioner observerades på dag 11 för stambark av K. africana, blad-och rotextrakt av S. hispidus. Sårvävnader behandlade med extrakten visade förbättrad kollagenation, re-epitheliazition och snabb granuleringsbildning jämfört med obehandlade sårvävnader. Extrakten befanns innehålla alkaloider, saponiner, tanniner, flavonoider, kolhydrater och sapogenetiska glykosider. HPLC-fingerutskriften av extrakten utvecklades. Blad, stambark och rotextrakt av K. africana och S. hispidus uppvisade antimikrobiella, antioxidanta och förbättrade sårläkningsegenskaper och dessa kan motivera de medicinska användningarna av växterna för behandling av mikrobiella infektioner och sår.

1. Inledning

sår används oftast när man hänvisar till skada på huden eller underliggande vävnader eller organ genom ett slag, snitt, missil eller stick. Sår inkluderar också skada på huden orsakad av kemikalier, kyla, friktion, värme, tryck och strålar och manifestation i huden av inre förhållanden, till exempel trycksår och sår . Sår har en enorm inverkan på den helande vårdekonomin. Kroniska sår utgör en stor hälsobörda och dränerar på vårdresurserna i världen inklusive Ghana .

ett stort problem med sår är den höga risken för infektion; därför, om ett medel som är aktivt mot dessa mikroorganismer som orsakar infektionen används i läkningsprocessen, kommer det då att bidra till att minska risken för infektion och den totala tiden för sårläkning kan minskas avsevärt. Det är till exempel mycket lätt för bakterier att komma in genom den trasiga huden och tränga in i resten av kroppen. Bakterier koloniserar sår inom 48 timmar efter skada och bakterier som Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa och Streptococcus spp kan orsaka infektion och detta kan förlänga inflammatorisk fas av sårläkning . Därför kan lämpliga antimikrobiella medel användas antingen topiskt eller systematiskt för att förhindra infektion av sår och påskynda sårläkningsprocessen.

inflammationsprocessen leder normalt till frisättning av biologiskt aktiva mediatorer för att locka neutrofiler, leukocyter och monocyter till sårområdet och dessa attackerar främmande skräp och mikroorganismer genom fagocytos. Detta leder sedan till produktion av syrefria radikaler såsom väteperoxid, superoxidanjon och hydroxylanjon och överskott av dessa medel orsakar vävnadsskada hos människor eller djur om de överväldigar värdens naturliga antioxidanter såsom katalas, superoxiddismutas och glutationperoxidas. Därför förhindrar antioxidanter aktiviteten hos de fria radikalerna och därigenom förhindrar skador på celler och vävnader, vilket ger skydd för människor och djur, och förbättrar också läkning av infekterade och icke-infekterade sår .

Kigelia africana (Lam.) Beneth. tillhör familjen Bignoniaceae. Det är känt som” Nufutene ” i lokala Asante-Twi i Ghana. Det är utbrett i Afrika inklusive Ghana, Sierra Leone, Gambia, Sudan och Nigeria och det finns i våt savann och nära flodkroppar där det förekommer i överflöd . Det används för att behandla hudsjukdomar inklusive svampinfektioner, kokar, psoriasis och eksem, spetälska, syfilis och cancer. Rötterna, träet och bladen har visat sig innehålla kigelinon, vernolsyra, kigelin, iridoider, luteolin och 6-hydroxyluteolin . Iridoiderna har antibakteriell effekt .

Strophanthus hispidus DC. tillhör familjen Apocynaceae och det kallas ”Maatwa” i den lokala Asante-Twi. Det finns över hela Afrika och savannah skogar i Ghana, Senegal, Sudan, Kongo DR, Uganda och Tanzania. Det har många medicinska användningsområden som motgift mot giftet från den svarthalsade kobraen, vid behandling av syfilisår, bensyfilis och guinea-masksår och sår . Växten innehåller en amorf glykosid (pseudo-strofantin) med tung olja, två alkaloider (trigonellin och kolin), harts, mucilage och ett rhamnosocker . Syftet med studien är att undersöka de antimikrobiella, antioxidanta och sårläkande egenskaperna hos metanolblad och stambarksextrakt av K. africana och metanolblad och rotextrakt av S. hispidus.

2. Material och metoder

2.1. Växtmaterial och kemikalier

stambark och löv av K. africana och löv och rötter av S. hispidus samlades i maj 2011 från Krofrom i atwima-Kwanwoma-distriktet i Ashanti-regionen och autentiserades av Dr.A. Asase av Ghana Herbarium, Institutionen för botanik, University of Ghana. Kupongprover av växterna har deponerats vid Ghana Herbarium, University of Ghana, Ghana. De olika växtdelarna torkades vid rumstemperatur (28-30 kcal C) i två veckor. De torkade växtdelarna maldes sedan till pulverformiga material. Om inget annat anges köptes alla kemikalier från Sigma (Deisenhofen, Tyskland).

2.2. Framställning av extrakt

tjugo gram pulveriserad K. africana blad sattes 300 mL 70% metanol och extraherades med Ultra-Turrax T 50 (Janke & Kunkel, Labortenik, Tyskland) under iskylning med en hastighet av 24000 rpm för 3-5 min. Den resulterande blandningen filtrerades sedan med Whatmann filterpapper nr 10. Den roterande förångaren användes sedan för att koncentrera supernatanten under 40 kcal C och lyofiliserades. Förfarandet upprepades för alla återstående pulveriserade växtmaterial (K. africana stambark, S. hispidus löv och rötter). Utbytet av bladextraktet (KAL) och stambarkextraktet (KASB) av K. africana och bladextrakt (SHL) och rotextrakt (SHR) av S. hispidus var 4,3, 12,8, 13,0 och 11,4% w/w (relaterat till det torkade materialet) respektive.

2.3. Preliminär fytokemisk Screening

fytokemisk screening utfördes på metanolblad och stambark extrakt av K. africana och löv och rötter av S. hispidus för att fastställa närvaron av stärkelse, tanniner, glykosider (sapogenetisk, antracen och cyanogenetisk), flavonoider, steroider och alkaloider . Tanninhalten bestämdes enligt metoderna för Glasl och användning av pyrogallol (Merck, Darmstadt, Tyskland, renhet 99,5%, HPLC) som referensförening.

2.4. HPLC-Fingerutskrift av extrakt

HPLC-fingerutskriften av extrakten (KAL, KASB, SHL och SHR) utfördes på ett Thermo Finnigan HPLC-system med Hypersil Gold C18, omvänd fas kolonn ( mm). Koncentrationen av extrakt var 10 mg/mL. HPLC optimala förhållanden: Injektionsvolym: 10 oc, Detektionsvåglängd: 254 nm, mobil fas : metanol : vatten/50: 50 (isokratiskt tillstånd), temperatur: 22 oc C, pumptryck: 28 MPa, flöde: 1 mL/min och körtid: 10 min.

2.5. Bestämning av antimikrobiell aktivitet hos extrakt

2.5.1. Antimikrobiellt känslighetstest

extraktens antimikrobiella aktiviteter (KAL, KASB, SHL och SHR) och referensläkemedel (kloramfenikol och klotrimazol (Sigma, Deisenhofen, Tyskland) bestämdes enligt den metod som beskrivits av Agyare och hans kollegor . Nutrient agar (Oxoid Limited, Storbritannien) och sabouraud agar (Oxoid Limited, Storbritannien) media användes för både bestämningar av antibakteriella respektive antifungala aktiviteter. Hundra mikroliter (106 cfu/mL) av testorganismerna (Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Bacillus subtilis NCTC 10073 och kliniskt svampmedel Candida albicans) användes för att utsäde näringsagar respektive sabouraud agarplattor. I var och en av dessa plattor skars fyra (4) ekvidistanta brunnar med en diameter av 8 mm ut med användning av steril korkborrare och brunnar fyllda med olika koncentrationer av extrakt och referensläkemedel upplösta i dimetylsulfoxid (DMSO) och fick diffundera vid rumstemperatur (28-30 CCB) under 1 h. Zonerna för tillväxthämning mättes efter 24 timmars inkubation vid 37 CCB (för bakterierna) och 3 dagar vid 30 CCB (för svampen). Aktiviteten av DMSO bestämdes och befanns inte uppvisa någon aktivitet mot testorganismerna.

2.5.2. Mikrodilutionsmetod

mikrofonerna för extrakten (KAL, KASB, SHL och SHR) mot testbakterierna bestämdes med användning av den modifierade mikrodilutionstekniken som beskrivs av Agyare et al. och Eloff . Testlösningar (100 mg/mL) av extrakten bereddes med DMSO och testlösning (25-100 oc) späddes seriellt till 100 oc/mL och 100 oc (106 cfu/mL) av testbakterierna odlade i näringsbuljong (Oxoid Limited, Storbritannien) tillsattes till varje brunn i mikroplattorna. De täckta mikroplattorna inkuberades vid 37 kcal C i 24 timmar.för att indikera tillväxt tillsattes 30 kg 3-(4,5-dimetyltiazol-2-yl)-2,5-difenyltetrazoliumbromid upplöst i vatten till mikroplattbrunnarna och inkuberades vid 37 kg C i 30 minuter. Test svampmedel (C. albicans) odlades i sabouraud-dextrosbuljong (Oxoid Limited, Storbritannien) och inkuberades sedan i 3 dagar vid 30 kcal C. mikrofonerna för Kal -, KASB -, SHL-och SHR-extrakt mot testsvampen bestämdes enligt riktlinjerna som beskrivs i National Committee for Clinical Laboratory Standards for filamentous fungi. De minsta hämmande koncentrationerna av extrakten mot testorganismerna detekterades som den minsta koncentrationen av extrakt som inte uppvisade mikrobiell tillväxt efter tillsatsen av MTT till mediet och inkubation vid 37 kcal C under 20 min . Ovanstående experiment upprepades tre gånger.

2.6. Bestämning av Friradikalrensningsaktivitet

extraktens friradikalrensningsaktiviteter bestämdes enligt metoden för Chizzola och hans kollegor med användning av 1, 1-difenyl-2-picryl-hydrazyl (DPPH). Lösning (0,1 mM) av dpph i metanol framställdes och 10 occl av denna lösning sattes till 100 occl av metanolextrakt tillsammans med occl-tokoferol vid olika koncentrationer i 96-brunns mikrotiterplattor. Plattorna skakades i 30 SEK och efter 30 min mättes absorbansen vid 517 nm. Hämningsprocenten ( % ) av radikal rensning beräknades med användning av följande ekvation. Inhibering, där är absorbansen av kontrollen, är absorbansen av provet vid 517 nm och hämmande koncentration, IC50 är mängden (kg/mL) som minskar absorbansen med 50%.

2.7. Utvärdering av sårläkningsegenskaper (Excision Sårmodell)

2.7.1. Försöksdjur

trettiofem (kvinnliga Sprague Dawley) råttor var inrymda i burar av rostfritt stål och matas med normal kommersiell råttor diet (GAFCO, Tema, Ghana), ges vatten Ad libitum och underhålls under laboratorieförhållanden (temperatur 28-30 CCB, relativ fuktighet 60-70%, och normal ljus-mörk cykel). En dag före experimentet fördes råttorna till laboratoriet och vana vid experimenterhantering och apparaten för att minimera effekten av stress och nyhet. Alla procedurer och tekniker som användes i dessa studier överensstämde med National Institute of Health Guidelines för vård och användning av laboratoriedjur (NIH, Department of Health Services publication No.83-23, reviderad 1985). Protokollen för studien godkändes av institutionens Etikutskott.

2.7.2. Excision Sårmodell

djuren (kvinnliga Sprague Dawley-råttor) som väger 115-120 g bedövades med ketamin vid 120 mg/kg kroppsvikt subkutant före skapandet av såren. Djurens dorsala päls rakades till en cirkulär diameter på cirka 40 mm med hjälp av rakblad och det förväntade området av såret som skulle skapas skisserades på den rakade huden. Områdena rengjordes med 70% etanol innan excisionssåren skapades enligt den modifierade metoden för Bhakta et al. . Hudsår skapades längs markeringarna med tandade pincett, kirurgiska blad och spetsiga saxar. Hela såren lämnades öppnade och djuren delades in i sju (7) grupper om fem djur vardera. Den första gruppen behandlades topiskt med 1% vikt/vikt silversulfadiazinsalva (Arytons Drugs, Ghana) som referensläkemedel . Den andra gruppen behandlades med vattenhaltig grädde (fordon ensam). Den tredje gruppen lämnades obehandlad och fick normal sårläkning att äga rum. De sista fyra grupperna behandlades med 7,5% vikt/vikt extraktkrämer (KAL, KASB, SHL respektive SHR). Sårbehandling påbörjades den 2: a dagen efter sårbildning. Extrakten och referensläkemedlen applicerades topiskt på såren 24 timmar i 24 dagar. Under behandlingen togs skalade fotografier av sårområdena (med hjälp av högupplöst digitalkamera) tillsammans med en millimeterskalmätning var 48: e timme från och med den första dagen av sårbehandling. Sårområdena bestämdes varannan dag till den 24: e dagen.

2.8. Histopatologiska studier

Sårvävnadsprover från obehandlade och behandlade djur togs under läkningsprocessen dag 14. Tvärsnitts sårärr med full tjocklek, av cirka 6 mm tjocka sektioner från varje grupp, samlades i slutet av experimentet för att utvärdera de histopatologiska förändringarna . Proverna fixerades i 10% buffrad formalin för 24 h och dehydratiserades med en sekvens av etanol-xylenserier av lösningar, bearbetades och blockerades med paraffin vid 40-60 kg C och sektionerades sedan i 5-6 kg tjocka sektioner. Sektionerna färgades med hematoxylin och eosin-fläck, Van Giesons fläck och toluidinblå fläck. Hematoxylin-och eosin-färgade sektioner och Van Giesons färgade sektioner kontrollerades för kollagenavsättning. Toluidinblå färgade sektioner användes för att fläcka mastceller .

2.9. Statistisk analys

GraphPad Prism Version 5.0 för Windows (GraphPad Software, San Diego, CA, USA) användes för alla statistiska analyser. Data presenteras som mean SEM () och analyseras av envägs ANOVA följt av Dunnets multipeljämförelsestest. * , * * och * * * ansågs statistiskt signifikanta i alla analyser. Graferna plottades med Sigma Plot för Windows Version 11.0 (Systat Software Inc., Tyskland).

3. Resultat

3.1. Preliminär fytokemisk Screening

både blad-och stambarken av K. africana och S. hispidus befanns innehålla tanniner (med varierande mängder), steroider, saponiner, sapogenetiska glykosider och kolhydrater medan bladen på de två växterna innehåller flavonoider. Alkaloider var närvarande i både blad och rot av S. hispidus (Tabell 1).

3.2. HPLC fingertryck av extrakt

HPLC fingertryck av extrakten (KAL, KASB, SHL och SHR) bestämdes för att identifiera de viktigaste topparna (föreningar) i de olika extrakten för identifiering och kvalitetskontroll (figurerna 1, 2, 3 och 4).

Figur 1

HPLC-kromatogram (fingertryck) av metanolbladsextrakt (KAL) av K. africana vid 254 nm.

Figure 2

HPLC chromatogram (finger-printing) of methanol stem bark extract (KASB) of K. africana at 254 nm.

Figure 3

HPLC chromatogram (finger-printing) of methanol leaf extract (SHL) of S. hispidus at 254 nm.

Figur 4

HPLC-kromatogram (fingertryck) av metanolrotextrakt (SHR) av S. hispidus vid 254 nm.

3.3. Antimikrobiell aktivitet

metanolextrakten (KAL, KASB, SHL och SHR) befanns vara aktiva mot testorganismerna (E. coli, P. aeruginosa, S. aureus, B. subtilis och C. albicans) med varierande medelzoner för hämning och P. aeruginosa befanns vara mindre mottagliga för extrakten. De minsta hämmande koncentrationsområdena för K. africana-extrakt (KAL och KASB) mot testorganismerna var från 2,25 till 7,5 mg/mL och S. hispidus-extrakt (SHL och SHR) var 2,5 till 10 mg/mL (Tabell 2). Med avseende på agardiffusionsmetoden uppvisar alla extrakt (KAL, KASB, SHL och SHR) med koncentrationer på 20 och 50 mg/mL högre inhiberingszoner mot testorganismerna än 10 mg/mL koncentration (tabell 3).

3.4. Antioxidantaktivitet

alla extrakt visade en viss nivå av antioxidantegenskaper med KASB som hade lägsta IC50 och KAL med den lägsta fria rensningsaktiviteten (Tabell 4 och figur 5).

Figur 5

fri radikal rensning aktiviteter av metanol blad extrakt (KAL) och stam bark extrakt (KASB) av K. africana och blad extrakt (SHL), rot extrakt (SHR) av S. hispidus och-tokoferol (referens antioxidant) bestäms av dpph-metoden.

3.5. Sårläkningsaktivitet (Sårförslutningshastighet)

alla extrakten ( KAL, KASB, SHL och SHR) behandlade grupper uppvisade betydande aktiviteter på sårförslutningshastigheterna jämfört med det obehandlade och fordonet ensamt med KAL och SHL med betydande influenser (och, resp. 7: e till 15: e dagen efter behandlingen (figurerna 6 och 8, Tabell 5) och KASB och SHR uppvisar signifikanta liknande effekter på sårläkning från 10: e till 18: e dagen efter behandlingen (figurerna 7 och 9, Tabell 5).

3.6. Histopatologiska studier

histologiska studier avslöjade riklig proliferation av fibroblaster med varierande grad av fibros. Proverna visade 70 till 80% tät och förtjockad fibros för de sår som behandlades med extrakten medan 1% w/w silver sulfadiazinsalva (positiv kontroll) visade 60 till 70% fibros. Fibroblastceller och kollagenfibrer var framträdande närvarande i referens-och extraktbehandlade grupper jämfört med obehandlad kontroll. Det fanns riklig angiogenes, förbättrad kollagenation och reepitelialisering, bevis på markerade behandlingssvar bland ihållande inflammation med sårvävnader behandlade med extrakten jämfört med de obehandlade sårvävnaderna (Figur 10).

(a)

(b)

(c)

(d)

(e)

(f)

(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)

Figur 10

histopatologisk undersökning av sårvävnader behandlade med vehikel, extrakt och obehandlade vävnader. Representativa bilder färgade med hematoxylin och eosin fläck, Van Giesons fläck och toluidin blå fläck behandlas dagligen med 7,5% w/W krämer av metanol blad extrakt (KAL) av K. africana (a), metanol stam bark extrakt (KASB) av K. africana (b), metanol blad extrakt (SHL) grädde av S. hispidus (c) och metanol rot extrakt (SHR) grädde av S. hispidus (d) och obehandlade sårvävnader (e) för 14 dagar. (a) KAL: riklig angiogenes, förbättrad kollagenation och reepitelialisering, uppenbart av markerade behandlingssvar mitt i ihållande inflammation. B) KASB: märkbar angiogenes och granulationsvävnadsbildning med bevis på apoptos efter vävnadsnekros med mindre intensiv kollagenering och reepitelisering. (c) SHL: med märkbar intensiv kollagenation och reepitelialisering. (D) SHR: med märkbar granulationsvävnadsbildning manifesterad som vävnadspåfyllning. Kollagenering och återepitelisering var också på allvar jämfört med den obehandlade sårvävnaden. (e) obehandlade sårvävnader med ihållande inflammation med ofullständigt sårområde; bevis på dålig granulationsvävnadsbildning, kollagenation och reepitelialisering men riklig angiogenes. (f) behandlade sårvävnader med 1% vikt/vikt silversulfadiazin visade snabb granuleringsvävnadsbildning, kollagenering, uppenbar av förbättrad sårläkning och ojämn keratinös såryta uppenbar reepitelialisering. Legend: AG: angiogenes, CO: kollagenation, DS: dött utrymme efter nekros, GR: granulationsvävnad efter apoptos, IC: ofullständigt sårområde, om: inflammerad vävnad, KE: keratinöst epitel, ND: nekrotisk skräp av ihållande inflammation. RE: reepithelialisering.

4. Diskussion

den aktuella undersökningen beskriver några av de biologiska aktiviteterna, inklusive antimikrobiella och sårläkande egenskaper hos löv, stambark och rotextrakt från de tropiska växterna K. africana och S. hispidus. Växtprodukter är potentiella sårläkningsmedel och föredras till stor del på grund av deras utbredda tillgänglighet, mindre eller inga biverkningar och effektivitet som råa preparat . Den fytokemiska screening av de torkade blad och rot av S. hispidus avslöjade närvaron av tanniner, alkaloider, saponiner, steroider, kolhydrater och sapogenetiska glykosider och flavonoider i bladen. Alkaloider var frånvarande i de torkade bladen och stambarken av K. africana och saponiner, steroider, kolhydrater och sapogenetiska glykosider var närvarande i båda växtmaterialen. Flavonoider hittades också i bladen av K. africana (Tabell 1). HPLC-fingerutskriften av extrakten (KAL, KASB, SHL och SHR) utvecklades också för identifierings-och kvalitetskontrolländamål (figurerna 1, 2, 3 och 4).

de fytokemiska beståndsdelarna i en växt bestämmer ofta den fysiologiska verkan på människokroppen. Antioxidanter är medel som skyddar celler mot skador orsakade av molekyler som kallas fria radikaler. Antioxidantaktiviteterna av extrakt beror huvudsakligen på närvaron av fenolföreningar såsom flavonoider, fenolsyror, tanniner och fenolditerpener . Följaktligen spelar beståndsdelarna i extrakten, såsom tanniner och flavonoider, en viktig roll i sårläkning genom att förebygga och skydda oxidativ skada från fria radikaler .

den antimikrobiella aktiviteten hos metanolextrakten av K. africana-blad och stambark och S. hispidus-blad och rötter bestämdes mot fyra bakterier, två grampositiva bakterier (S. aureus och B. subtilis), två gramnegativa bakterier (E. coli och P. aeruginosa) och en svamp (C. albicans), med användning av koppplattans agardiffusionsmetod. Metanolextrakten från de två växterna var aktiva mot alla testade organismer (Tabell 2). Den minsta hämmande koncentrationen (MIC) bestämdes som den lägsta koncentrationen av råextrakt vid vilken ingen mikrobiell tillväxt och Mic av KAL mot S. aureus, B. subtilis, E. coli, P. aeruginosa och C. albicans var 5, 2,5, 5,5, 7,5 respektive 2,5 mg/mL respektive KASB var 5, 5,5, 5,25, 7,5 respektive 2,25 mg/mL. SHL-och SHR-extrakt uppvisade också liknande antimikrobiell aktivitet och deras mikrofoner var i samma intervall som K. africana-extrakten (tabellerna 2 och 3). De antibakteriella och antifungala aktiviteterna i extrakten (KAL, KASB, SHL och SHR) liknade aktivitet som uppvisades av bladextrakt av Kigelia pinnata (Jacq.) DC. som rapporterats av Binutu et al. . Extraktens antimikrobiella verkan kan hänföras till de fenoliska beståndsdelarnas sammandragande natur inklusive tanniner och andra polyfenoler som finns i extrakten .

bebor patogena bakterier såsom Staphylococcus, Streptococcus och Pseudomonas i sår normalt kan leda till infektion av sår som kan leda till bildandet av kroniska sår . Från denna studie insåg man att K. africana och S. hispidus-extrakten uppvisade stark och bredspektrum antimikrobiell aktivitet mot dessa patogener. Eftersom de flesta mikrofonerna av extrakten mot testorganismerna var under 8 mg/mL kunde man dra slutsatsen att extrakten uppvisade potent antimikrobiell aktivitet enligt Fabry och hans kollegor . Topisk applicering av antimikrobiella medel eller extrakt är en effektiv terapimetod för att förstöra mikrobiella populationer på grund av tillgängligheten av de aktiva medlen på sårstället vilket leder till förbättrad sårläkningsaktivitet .

IC50-värdena för extrakten (KAL, KASB, SHL och SHR) var 1,5, 56,9, 13,7, 49,8 respektive 45,1 kg/mL (Tabell 4). Dessa resultat tyder på att dessa extrakt har antioxidantegenskaper med undantag av extrakt av S. hispidus och detta kan underlätta läkning av sår . Detta kan tyda på att de traditionella användningarna av S. hispidus som sårläkningsmedel kan inte nödvändigtvis bero på dess antioxidantaktivitet utan snarare baseras på andra biologiska effekter. IC50-värdena för löv och stambark av K. africana liknade resultaten från Gathirwa och hans kollegor .

extrakten (KAL, KASB, SHL och SHR) hade signifikant inflytande på sårförslutningshastigheten baserat på de olika dagarna för behandling av såren med extrakten jämfört med de obehandlade. SHL-extrakt uppvisade signifikant förbättrad effekt på sårläkningsprocessen vid dag 11 () med procentuell sårstängning av 90.13 (figur 8) jämfört med de obehandlade såren. Påverkan av SHL på såren liknade den för SHR-extrakt med signifikant ökad sårkontraktion på dag 11 () och sårförslutning på 91,72% (Figur 9). Påverkan av KASB-extrakt (Figur 7) liknade SHL-och SHR-extrakt. KAL-extrakt förbättrade emellertid signifikant sårkontraktion från dag 7 () med sårstängning av 85,1% (Figur 6) till den 17: e dagen. Histopatologisk undersökning av sårvävnaderna avslöjade riklig angiogenes, förbättrad kollagenering och reepitelisering jämfört med de obehandlade såren (Figur 10). Dessa biologiska aktiviteter av extrakten kan bero på den förbättrade proliferationen av fibroblaster och keratinocyter och framgångsrik reduktion av patogena bakterier genom extrakten och dessa kan hänföras till de fytokemiska beståndsdelarna i extrakten.

de effekter som observerades i kräm som endast behandlades och de obehandlade såren var inte statistiskt signifikanta jämfört med extrakten eller silversulfadiazin (referens) behandlade sår. Detta kan också indikera att komponenterna i den vattenhaltiga grädden inte störde extraktens aktivitet och följaktligen kan de förbättrade effekterna av extrakten enbart bero på de bioaktiva principerna som finns i dessa extrakt. De sårläkande effekterna av extrakten kan bero på de olika fytokemiska beståndsdelarna som finns i dem. Tanniner som proanthocyanidiner och andra tanniner inklusive garvsyra, geraniin och furosin är kända för att underlätta sårläkning . Extrakten befanns innehålla flavonoider och saponiner och dessa sekundära metaboliter har visat sig förbättra sårläkning och därmed kan de förbättrade sårläkningseffekterna av extrakten tillskrivas deras fytokemiska beståndsdelar.

ovanstående fynd kan stödja påståenden om att sår behandlade med växtextrakt läker snabbare och bättre än obehandlade sår och användningen av dessa växter för behandling av mikrobiella infektioner. Isolering och karakterisering av bioaktiva föreningar som är ansvariga för dessa farmakologiska egenskaper måste emellertid utföras.

5. Slutsats

metanolbladet och stambarken av K. africana och metanolblad och rotextrakt av S. hispidus uppvisade antioxidant, antimikrobiella aktiviteter med MIC-intervall på 2,25 till 7,5 mg/mL respektive 2,5 till 10 mg/mL mot testorganismerna, förbättrade sårläkningsegenskaper och dessa farmakologiska egenskaper kan motivera de medicinska användningarna av dessa växter för behandling av mikrobiella infektioner och sår. Bioaktivitetsstyrd fraktionering och isolering av de bioaktiva föreningarna som är ansvariga för de biologiska aktiviteterna skulle utföras.

intressekonflikt

författarna förklarar att de inte har någon intressekonflikt.

bekräftelser

författarna vill uttrycka sin tacksamhet till Thomas Ansah vid Institutionen för farmakologi, KNUST, Kumasi, Ghana för hans tekniska hjälp och Nana Yaw Atefah för insamling av växterna. De erkände också Dr. Paul Ossei vid Institutionen för patologi, Komfo Anokye Teaching Hospital, Kumasi, Ghana för hans bidrag till den patologiska bedömningen av sårvävnader.