KinExA Technology-Sapidyne

(Obs: i följande beskrivning är analysens format att immobilisera liganden för att mäta fri receptor i provet. Omvänt kan receptorn immobiliseras för att mäta fri ligand i provet, beroende på vilka material som används.)
mätning av den fria receptorn åstadkommes genom att kort exponera provblandningen till en fast fas på vilken liganden immobiliseras. Exponeringstiden är kritisk eftersom att hålla samspelstiden för provet till den fasta fasen ganska kort resulterar i en situation där den enda signifikanta bindningen till den fasta fasen är från den fria receptorn. Den kinetiska Uteslutningsanalysen står i kontrast till en tävlingsanalys där den jämviktade lösningen är i kontakt med den fasta fasen tillräckligt länge för att den fasta fasliganden ska konkurrera om lösningsreceptorn.
fördelen med KinExA är att signalen från den fångade receptorn endast representerar den koncentration som är fri i lösningen. Att känna till jämviktskoncentrationen av receptorn möjliggör bestämning av bindningskonstanterna som beskrivs på den reversibla Bindningssidan.
de kommersiellt tillgängliga instrumenten för att utföra KinExA-analyser (Sapidynes KinExA 4000, 3200 och 3100) använder en liten kolonn av partiklar genom vilka provet och andra reagenser passeras. Kontakttiden för någon del av provet med den fasta fasen är sedan transittiden genom kolonnen och kan styras av den valda flödeshastigheten (från cirka 50 millisekunder till ungefär en sekund).

system med nM-intervall bindemedel eller stramare kommer att vara i kinetic exclusion assay-läge (KinExA-läge). Svagare bindemedel kan fortfarande mätas men kan kräva extra försiktighet för att undvika störning av provet från mätningen. KinExA är särskilt väl lämpad för mätning av affinitet och kinetik och fungerar också som en förbättrad immunanalysplattform. En mer detaljerad förklaring av KinExA-mätningarna ingår nedan.

Lämna ett svar

Din e-postadress kommer inte publiceras.