mål/bakgrund: cellväggsbristande bakterieformer (L-former) kan förekomma tillsammans med resistens mot faktorer som utlöser deras utseende. Det är av intresse att studera förhållandet mellan l-formtransformationen av Mycobacterium tuberculosis och utställningen av läkemedelstolerans mot etambutol (EMB), en hämmare av cellväggssyntes.
metoder: l-formvariant framställdes från en känslig EMB-stam av M. tuberculosis genom ett kryogent stressbehandlingsprotokoll och odlades därefter i Middlebrook 7H9 halvfast medium, innehållande EMB i en minimal hämmande koncentration av 2 mg/L. känslighet för EMB av föräldrastammen och dess l-formvariant utvärderades fenotypiskt och med användning av polymorfismanalys med polymeraskedjereaktion-restriktionsfragmentlängd riktad mot en mutation i embB306-genfragmentet.
resultat: I motsats till känsligheten för EMB hos föräldrastammen visade dess l-formvariant fenotypisk resistens mot höga koncentrationer av EMB (16 mg/L), men mutationen i embB306 hittades inte. Elektronmikroskopiobservation av L-formvarianten visade en heterogen population av bakterier, med olika grader av cellväggbrist, såväl som celler av protoplastisk typ utan cellväggar. Av särskilt intresse var de observerade kapselliknande strukturerna runt L-formcellerna och den biofilmliknande matrisen som producerades av L-formpopulationen.
slutsats: Vi föreslår att uttrycket av fenotypisk resistens mot EMB i M. tuberculosis kan associeras med förändringar eller förlust av cellväggar i L-formbakterier, vilket resulterar i brist på ett specifikt mål för EMB-verkan. Dessutom kan produktion av kapselliknande strukturer och biofilmmatris med L-former bidra till deras resistens och överlevnad i närvaro av antibakteriella medel.
