den modifierade Knotts metod används för koncentration och identifiering av mikrofilarier, specifikt hjärtmask Dirofilaria immitis. Det måste differentieras från den icke-patogena mikrofilaria av Dipetalonema reconditum (”Dipet” för kort).
ett direkt blodutstryk kan göras samtidigt. Det är ett snabbt, icke-koncentrationstest för mikrofilaria. Dirofilaria och Dipet differentieras av deras motilitetsmönster.
dessa tester ska alltid göras när en patient testar hjärtmaskantigen positivt, eller det finns någon anledning att misstänka att hunden för närvarande har eller har haft hjärtmasksjukdom tidigare. Förekomsten av Dirofilaria kommer att påverka kursen och / eller valet av behandling.
Knott ’s test kan göras utan att göra ett direkt smet, men gör aldrig ett direkt smet utan att göra ett Knott’ s test. Knott är ett känsligare test eftersom det koncentrerar mikrofilaria så att de är mindre benägna att missa under mikroskopisk undersökning.
förfarande för direkt smet:
enkel. Placera en droppe blod, helst från ett EDTA-rör eller hepariniserad spruta, i mitten av en bild. Släpp ett lock över toppen och undersök under mikroskopet på 10x effekt. Dirofilaria kommer att ha en stationär, vridande rörelse; Dipetalonema kommer att uppvisa en snabbare riktningsrörelse och kommer ofta att skjuta direkt från fältet.
förfarande för den modifierade Knott teknik:
se till att du bär handskar för skydd. Använd ett 15 ml centrifugrör och tillsätt cirka 10 ml 2% formalin (detta kan köpas kommersiellt) till 1 ml antikoagulerat blod. Placera tummen över toppen av det kapade röret och vänd flera gånger för att blanda ordentligt. Centrifugera i 5 minuter vid 1000 till 1500 rpm.
du bör kunna visualisera en vitaktig plugg längst ner på röret efter spinning. Kassera supernatanten i rätt behållare för farligt avfall.
Lägg till en droppe ny metylenblå fläck med en lång glas-eller plastpipett
använd pipetten för att blanda fläcken med sedimentet
Lägg till en droppe av denna blandning i mitten av en bild. Släpp ett lock på toppen. Undersök på mikroskopet under 10x effekt.
till skillnad från med direkt smet kommer mikrofilaria att presentera som stillastående. Dirofilaria måste särskiljas från Dipetalonema baserat på storlek och form. Använd följande tabell för att hjälpa dig att skilja:
Parameter |
D. immitus |
D. reconditum |
längd (mikron) |
||
bredd (mikron) |
||
form (främre änden) |
avsmalnande |
blunt |
form (kropp) |
rakt |
böjda |
form (svans) |
rakt |
knapp krok |
Antal närvarande |
få till många |
få |
rörelse |
stationär |
flyttar över slide |
(Cornell University)
ett annat coolt test för mikrofilaria
Fyll ett mikrohematokritrör och snurra ner som om du gör en pcv.
Lägg röret på en bild och lägg det på mikroskopstadiet. Fokusera på buffy coat på 10x power-om en hund är hjärtmask positiv och har cirkulerande microfilaria, kan du se microfilaria skruva runt i buffy coat!