validering av presumptiva tester för icke-humant blod med Kastle Meyer och Hemastix reagenser

Kastle Meyer och Hemastix reagenser är presumptiva tester som vanligen används i rättsmedicinska ärenden för detektion av blod, och deras lämplighet har granskats i ett flertal publikationer. Studier hittills har dock fokuserat på valideringen av dessa test på enbart humant blod, och inget publicerat arbete har tittat på känsligheten, specificiteten och effekten på DNA-analys när dessa reagenser används för att presumptivt testa för djurblod. Syftet med denna studie var att validera de två reagenserna för användning med djurblod och jämföra deras prestanda för att välja det bästa testet baserat på omständigheterna i utredningen av vilda djurbrott.

metodernas känslighet, specificitet, stabilitet och robusthet bedömdes genom experiment med utspädningar av djurblod (från 1:4 till 1:65536) med användning av direkta och indirekta (rub) tester, potentiella störande ämnen, blodkällor från olika arter och åldrat blod. Effekterna av de två reagenserna på efterföljande DNA-analys undersöktes också.

under de direkta testerna visade Kastle Meyer en högre känslighet, detekterade blod ner till en utspädning av 1:16,384, en storleksordning lägre än Hemastix. Men under rub-testet visade Hemastix en högre känslighet och detekterade blod ner till en utspädning av 1:64 på porösa material medan Kastle Meyer var positiv endast ner till en utspädning av 1:16. Vid användning av samma swab för presumptiv testning och DNA-extraktion tillät Hemastix-testning amplifiering av en tillräcklig mängd DNA för artsidentifiering vid dess känslighetsgräns på porösa material (1:64) medan Kastle Meyer hämmade mest amplifiering av DNA vid dess mindre känsliga gräns på 1:16 utspädning. Å andra sidan visade Hemastix en mycket lägre specificitet, vilket gav falska positiva resultat när de utsattes för tomat, potatis, rost, aviär urinsyra, blekmedel och diskbänk, medan Kastle Meyer endast gav en svag positiv reaktion från potatis. Båda testerna utfördes lika bra för att upptäcka färskt blod från olika djurarter. Stabilitetstestet gav jämförbara resultat bland testerna förutom åldrade fiskblodfläckar, där Kastle Meyer-testet utfördes dåligt.

på grund av dess användarvänlighet, högre känslighet och brist på interferens med nedströms DNA-analys, och trots dess reducerade specificitet jämfört med Kastle Meyer, är Hemastix-metoden mer lämplig för användning i vilda brottsutredningar. Positiva resultat skulle alltid bekräftas med DNA-analys och den låga störningen av reagenset tillåter användning av en enda swab för presumptiv testning och DNA-provtagning.

Lämna ett svar

Din e-postadress kommer inte publiceras.