Antimikrobielle, Antioksidanter Og Sårheling Egenskaper Av Kigelia africana (Lam.) Beneth. Og Strophanthus hispidus DC.

Sammendrag

Mikrobielle infeksjoner av ulike typer sår er en utfordring for behandling av sår og sårheling. Studien var å undersøke antimikrobielle og antioksidantegenskaper av metanol blad og stamme bark ekstrakter Av Kigelia africana og metanol blad og rot ekstrakter Av Strophanthus hispidus og også for å bestemme sårheling egenskaper av ekstrakter. De antimikrobielle aktivitetene til metanolekstraktene ble bestemt mot to Gram-positive og to Gram-negative bakterier og en sopp ved hjelp av agardiffusjon og mikrofortynningsmetoder. Antioxidantaktiviteten ble bestemt ved bruk av 1,1-difenyl-2–pikryl-hydrazyl (DPPH) – metoden. Ekstraktenes påvirkning på sårlukkingshastighet ble undersøkt ved hjelp av eksisjonssårmodellen og histopatologisk undersøkelse av behandlede og ubehandlede sårvev. MICs av blad ekstrakt Av K. africana mot test organismer var 2.5-7.5 mg / mL og stammen bark ekstrakt var 2.25-7.5 mg / mL. Blad ekstrakt Av S. hispidus hadde MIC utvalg av 2,5-7,5 mg / mL og 2,5-10 mg / mL for rot ekstrakt. IC50 av blad – og stammebarkekstrakter Av K. africana var henholdsvis 56,9 og 13,7 µ/mL, og blad og rot Av S. hispidus var henholdsvis 49,8 og 45,1 µ/mL. K. africana-ekstrakter (7,5% w/w) viste signifikant () sårkontraksjon på dag 7 med 72% av sårlukking, mens signifikante () sårkontraksjoner ble observert på dag 11 for stambark Av K. africana, blad-og rotekstrakter Av S. hispidus. Sårvev behandlet med ekstraktene viste forbedret kollagenering, re-epitheliazisjon og rask granulasjonsdannelse sammenlignet med ubehandlet sårvev. Ekstraktene ble funnet å inneholde alkaloider, saponiner, tanniner, flavonoider, karbohydrater og sapogenetiske glykosider. HPLC finger-utskrift av ekstraktene ble utviklet. Blad, stamme bark og rot ekstrakter Av K. africana og S. hispidus viste antimikrobielle, antioksidant, og forbedret sårheling egenskaper og disse kan rettferdiggjøre den medisinske bruken av planter for behandling av mikrobielle infeksjoner og sår.

1. Innledning

Sår brukes oftest når det refereres til skade på huden eller underliggende vev eller organer ved et slag, kutt, missil eller stab. Sår inkluderer også skade på huden forårsaket av kjemikalier, kulde, friksjon, varme, trykk og stråler, og manifestasjon i huden av indre forhold, for eksempel trykksår og sår . Sår har en enorm innvirkning på den helbredende helsevesenet. Kroniske sår representerer en stor helsebyrde og belastning på helseressursene i verden, inkludert Ghana .

et stort problem med sår er den høye infeksjonsrisikoen; derfor, hvis et middel som er aktivt mot disse mikroorganismer som forårsaker infeksjonen, brukes i helingsprosessen, vil det da bidra til å redusere infeksjonsrisikoen og den totale tiden for sårheling kan reduseres betydelig. For eksempel er det veldig enkelt for bakterier å komme inn gjennom den ødelagte huden og trenge inn i resten av kroppen. Bakterier koloniserer sår innen 48 timer etter skade og bakterier som Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa og Streptococcus spp kan forårsake infeksjon, og dette kan forlenge inflammatorisk fase av sårheling . Derfor kan egnede antimikrobielle midler brukes enten lokalt eller systematisk for å forhindre infeksjon av sår og fremskynde sårhelingsprosessen.

inflammasjonsprosessen fører normalt til frigjøring av biologisk aktive mediatorer for å tiltrekke nøytrofiler, leukocytter og monocytter til sårområdet og disse angriper fremmedlegemer og mikroorganismer gjennom fagocytose. Dette fører da til produksjon av oksygenfrie radikaler som hydrogenperoksid, superoksidanion og hydroksylanion, og overskudd av disse midlene forårsaker vevskader hos mennesker eller dyr hvis de overvelder vertens naturlige antioksidanter som katalase, superoksiddismutase og glutationperoksidase. Derfor hindrer antioksidanter aktiviteten til frie radikaler og forhindrer dermed skade på celler og vev, som gir beskyttelse til mennesker og dyr, og forbedrer også helbredelsen av infiserte og ikke-infiserte sår .

Kigelia africana (Lam.) Beneth. tilhører Familien Bignoniaceae. Det er kjent som «Nufutene» i lokale Asante-Twi I Ghana. Det er utbredt Over Hele Afrika, Inkludert Ghana, Sierra Leone, Gambia, Sudan Og Nigeria, og det finnes i våt savanne og nær elvekropper der det forekommer i overflod . Det brukes til å behandle hudproblemer, inkludert soppinfeksjoner, koker, psoriasis og eksem, spedalskhet, syfilis og kreft. Røttene, treet og bladene har blitt funnet å inneholde kigelinon, vernolsyre, kigelin, iridoider, luteolin og 6-hydroksyluteolin . Iridoider har antibakteriell effekt .

Strophanthus hispidus DC. Tilhører Familien Apocynaceae og det kalles «Maatwa» i den lokale Asante-Twi. Den finnes over Hele Afrika og savanneskoger i Ghana, Senegal, Sudan, Kongo DR, Uganda og Tanzania. Den har mange medisinske bruksområder som motgift mot giften av svarthalset kobra, i behandling av syfilis sår, benete syfilis, og guinea-orm sår og sår . Planten inneholder et amorft glykosid (pseudo-strophanthin) med tungolje, to alkaloider (trigonellin og kolin), harpiks, mucilage og et rhamnosesukker . Målet med studien er å undersøke antimikrobielle, antioksidanter og sårheling egenskaper av metanol blad og stamme bark ekstrakter Av K. africana og metanol blad og rot ekstrakter Av S. hispidus.

2. Materialer og Metoder

2.1. Plantematerialer Og Kjemikalier

stammebark og blader Av k. africana og blader og røtter Av S. hispidus ble samlet Inn I Mai 2011 Fra Krofrom I Atwima-Kwanwoma-distriktet I Ashanti-Regionen og godkjent av Dr. A. Asase Fra Ghana Herbarium, Institutt For Botanikk, University Of Ghana. Voucher prøver av plantene har blitt deponert På Ghana Herbarium, University Of Ghana, Ghana. De ulike plantedelene ble tørket ved romtemperatur (28-30°C) i to uker. De tørkede plantedelene ble deretter malt i pulveriserte materialer. Med mindre annet er oppgitt, ble alle kjemikaliene kjøpt Fra Sigma (Deisenhofen, Tyskland).

2.2. Fremstilling Av Ekstrakter

Tjue gram pulverisert k. africana-blader ble tilsatt 300 mL 70% metanol og ekstrahert Med Ultra-Turrax T 50 (Janke & Kunkel, Labortenik, Tyskland) under iskjøl med en hastighet på 24000 rpm i 3-5 min. Den resulterende blandingen ble deretter filtrert ved Hjelp Av Whatmann filterpapir Nr. 10. Den roterende fordamperen ble deretter brukt til å konsentrere supernatanten under 40°C og lyofilisert. Prosedyren ble gjentatt for alle de gjenværende pulveriserte plantematerialene (k. africana stamme bark, s. hispidus blader og røtter). Utbyttet av blad ekstrakt (KAL) og stammen bark ekstrakt (KASB) Av k. africana og blad ekstrakt (SHL) og rot ekstrakt (SHR) Av S. hispidus var 4.3, 12.8, 13.0, og 11.4% w/w (relatert til tørket materiale) henholdsvis.

2.3. Foreløpig Fytokjemisk Screening

Fytokjemisk screening ble utført på metanolblad-og stammebarkekstrakter Av K. africana og blader Og røtter Av S. hispidus for å fastslå tilstedeværelsen av stivelse, tanniner, glykosider (sapogenetisk, antracen og cyanogenetisk), flavonoider, steroider og alkaloider . Tannininnholdet ble bestemt I Henhold Til Glasl-metodene og ved bruk av pyrogallol (merck, Darmstadt, Tyskland, renhet 99,5%, HPLC) som referanseforbindelse.

2.4. HPLC Fingertrykk Av Ekstrakter

HPLC fingertrykk av ekstraktene (KAL, KASB, SHL og SHR) ble utført på Et Thermo Finnigan Hplc-system ved Hjelp Av Hypersil Gold C18, omvendt fase kolonne (mm). Konsentrasjonen av ekstrakter var 10 mg / mL. Hplc optimale forhold: Injeksjonsvolum: 10 µ, Deteksjonsbølgelengde: 254 nm, Mobilfase : metanol : vann/50: 50 (isokratisk tilstand), Temperatur: 22°C, Pumpetrykk: 28 MPa, Strømningshastighet: 1 mL / min og driftstid: 10 min.

2.5. Bestemmelse Av Antimikrobiell Aktivitet Av Ekstrakter

2.5.1. Antimikrobiell Følsomhetstest

de antimikrobielle aktivitetene til ekstraktene (KAL, KASB, SHL OG SHR) og referansemedisiner (kloramfenikol og clotrimazol (Sigma, Deisenhofen, Tyskland) ble bestemt i henhold Til Metoden beskrevet Av Agyare og hans kolleger . Næringsstoffer agar (Oxoid Limited, Storbritannia) og sabouraud agar (Oxoid Limited, Storbritannia) media ble brukt for både bestemmelse av antibakterielle og soppdrepende aktiviteter, henholdsvis. Ett hundre mikroliter (106 cfu/mL) av testorganismene (Escherichia coli atcc 25922, Pseudomonas aeruginosa atcc 27853, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Bacillus subtilis Nctc 10073 og klinisk soppmiddel Candida albicans) ble brukt til å frø næringsagar og sabouraud agarplater, henholdsvis. I hver av disse platene ble fire (4) like langt brønner med diameter på 8 mm kuttet ut ved hjelp av steril korkborer og brønner fylt med forskjellige konsentrasjoner av ekstrakter og referansemedisiner oppløst i dimetylsulfoksid (DMSO) og tillatt å diffundere ved romtemperatur (28-30°C) i 1 time. Veksthemmingssonene ble målt etter 24 timers inkubasjon ved 37°C (for bakteriene) og 3 dager ved 30°C (for soppen). AKTIVITETEN TIL DMSO ble bestemt og ble funnet å vise ingen aktivitet mot testorganismer.

2.5.2. Mikrofortynningsmetode

MICs av ekstraktene (KAL, KASB, SHL og SHR) mot testbakteriene ble bestemt ved hjelp av den modifiserte mikrofortynningsteknikken som beskrevet Av Agyare et al. Og Eloff . Testoppløsninger (100 mg/mL) av ekstraktene ble tilberedt MED DMSO og testoppløsning (25-100 µ) ble serielt fortynnet til 100 µ / mL og 100 µ (106 cfu/mL) av testbakteriene dyrket i næringsbuljong (Oxoid Limited, Storbritannia) tilsatt til hver brønn i mikroplatene. De dekkede mikroplatene ble inkubert til 37°C i 24 timer.for å indikere vekst ble 30 µ av 3-(4,5-dimetyltiazol-2-yl)-2,5-difenyltetrazoliumbromid oppløst i vann tilsatt til mikroplatebrønnene og inkubert til 37°C i 30 min. Test sopp agent (C. albicans) ble dyrket i sabouraud dextrose bouillon (Oxoid Limited, Storbritannia) og deretter inkubert i 3 dager ved 30°C. MICs AV KAL, KASB, SHL og SHR ekstrakter mot test sopp ble bestemt i henhold til retningslinjene beskrevet i National Committee for Clinical Laboratory Standards for filamentous sopp. De minste hemmende konsentrasjonene av ekstraktene mot testorganismene ble påvist som minimumskonsentrasjonen av ekstrakter som ikke utviste mikrobiell vekst etter tilsetning AV MTT til mediet og inkubasjon ved 37°C i 20 min . Ovennevnte eksperimenter ble gjentatt tre ganger.

2.6. Bestemmelse Av Frie Radikaler Scavenging Aktivitet

de frie radikaler scavenging aktiviteter av ekstrakter ble bestemt i henhold til metoden For Chizzola og hans kolleger ved hjelp Av 1, 1-difenyl-2-picryl-hydrazyl (DPPH). Oppløsning (0,1 mM) AV DPPH i metanol ble tilberedt og 10 µ av denne oppløsningen ble tilsatt til 100 µ av metanolekstrakter sammen med α-tokoferol i forskjellige konsentrasjoner i 96-brønns mikrotiterplater. Platene ble ristet i 30 sek og etter 30 min ble absorbansen målt ved 517 nm. Hemmingsprosenten ( % ) av radikal scavenging ble beregnet ved hjelp av følgende ligning. Inhibering, hvor er absorbansen av kontrollen, er absorbansen av prøven ved 517 nm og Hemmende Konsentrasjon, IC50 er mengden (µ/mL) som reduserer absorbansen med 50%.

2.7. Evaluering Av Sårhelingsegenskaper (Eksisjonssårmodell)

2.7.1. Forsøksdyr

Trettifem (Hunnsprague Dawley) rotter ble plassert i bur i rustfritt stål og matet med normale kommersielle rotter diett (GAFCO, Tema, Ghana), gitt vann ad libitum og vedlikeholdt under laboratorieforhold (temperatur 28-30°C, relativ fuktighet 60-70%, og normal lys-mørk syklus). En dag før forsøket ble rottene brakt til laboratoriet og vant til eksperimenthåndtering og apparatet for å minimere effekten av stress og nyhet. Alle prosedyrer og teknikker som ble brukt i disse studiene var i samsvar Med National Institute Of Health Retningslinjer For Omsorg og Bruk Av Forsøksdyr (NIH, Department of Health Services publikasjon nr 83-23, revidert 1985). Protokollene for studien ble godkjent av Instituttets Etikkomite.

2.7.2. Eksisjonssårmodell

dyrene (hunnsprague Dawley-rotter) som veide 115-120 g ble bedøvet med ketamin ved 120 mg/kg kroppsvekt subkutant før sårene ble dannet. Den dorsale pelsen av dyrene ble barbert til en sirkulær diameter på ca 40 mm ved hjelp av barberblad, og det forventede området av såret som skulle opprettes ble skissert på den barberte huden. Områdene ble rengjort med 70% etanol før eksisjonssårene ble opprettet i henhold Til Den modifiserte metoden Til Bhakta et al. . Hud sår ble opprettet langs markeringene ved hjelp av tannet tang, kirurgiske blader, og spisse saks. Hele sårene ble igjen åpnet og dyrene delt inn i syv (7) grupper på fem dyr hver. Den første gruppen ble topisk behandlet med 1% w/w sølvsulfadiazinsalve (Arytons Drugs, Ghana) som referansemedisin . Den andre gruppen ble behandlet med vandig krem (kjøretøy alene). Den tredje gruppen ble ubehandlet og tillatt for normal sårheling å finne sted. De siste fire gruppene ble behandlet med henholdsvis 7,5% w/w ekstraktkrem (KAL, KASB, SHL og SHR). Sårbehandling startet på 2nd dagen etter sårdannelse. Ekstraktene og referansemedisinene ble topisk påført sårene 24 hver time i 24 dager. I løpet av behandlingen ble skalerte fotografier av sårområdet tatt (ved hjelp av Høyoppløselig Digitalkamera) sammen med en millimetermåling hver 48. time fra den første dagen av sårbehandling. Sårområdet ble bestemt hver annen dag til den 24. dagen.

2.8. Histopatologiske Studier

sårvevsprøver fra ubehandlede og behandlede dyr ble tatt under helbredelsesprosessen ved dag 14. 6 mm tykke seksjoner fra hver gruppe, ble samlet på slutten av forsøket for å evaluere de histopatologiske endringene . Prøvene ble fikset i 10% bufret formalin i 24 timer og dehydrert med en sekvens av etanol-xylenserier av oppløsninger, behandlet og blokkert med parafin ved 40-60°C og deretter delt inn i 5-6 µ tykke seksjoner. Seksjonene ble farget med hematoksylin og eosin flekk, Van Gieson flekk, og toluidine blå flekk. Hematoxylin og eosin farget seksjoner Og Van Gieson er farget seksjoner ble sjekket for kollagen avsetning. Toluidin blåfargede seksjoner ble brukt til å flekke mastceller .

2.9. Statistisk Analyse

GraphPad Prism Versjon 5.0 For Windows (GraphPad Software, San Diego, CA, USA) ble brukt til alle statistiske analyser. Data presenteres som gjennomsnittlig SEM () og analyseres Av Enveis ANOVA etterfulgt av Dunnet ‘s multiple comparison’ s test. * , * * og * * * ble vurdert som statistisk signifikante i alle analyser. Grafene ble plottet ved Hjelp Av Sigma Plot For Windows Versjon 11.0 (Systat Software Inc., Tyskland).

3. Resultater

3.1. Foreløpig Fytokjemisk Screening

både blad-og stammebark Av k. africana og s. hispidus ble funnet å inneholde tanniner (med varierende mengder), steroider, saponiner, sapogenetiske glykosider og karbohydrater mens bladene til de to plantene inneholder flavonoider. Alkaloider var tilstede i både blad og rot Av S. hispidus (Tabell 1).

3.2. HPLC Fingertrykk Av Ekstrakter

HPLC fingertrykk av ekstraktene (KAL, KASB, SHL og SHR) ble bestemt for å identifisere de viktigste toppene (forbindelser) i de forskjellige ekstraktene med det formål å identifisere og kvalitetskontroll (Figur 1, 2, 3 og 4).

Figur 1

HPLC kromatogram (finger-utskrift) av metanol blad ekstrakt (KAL) Av K. africana ved 254 nm.

Figure 2

HPLC chromatogram (finger-printing) of methanol stem bark extract (KASB) of K. africana at 254 nm.

Figure 3

HPLC chromatogram (finger-printing) of methanol leaf extract (SHL) of S. hispidus at 254 nm.

Figur 4

HPLC-kromatogram (fingerutskrift) av metanolrotekstrakt (SHR) Av S. hispidus ved 254 nm.

3.3. Antimikrobiell Aktivitet

metanolekstraktene (KAL, KASB, SHL og SHR) ble funnet å være aktive mot testorganismene (E. coli, P. aeruginosa, s. aureus, b. subtilis og c. albicans) med varierende midlere inhiberingssoner og P. aeruginosa ble funnet å være mindre utsatt for ekstraktene. De minste hemmende konsentrasjonsområdene Til K. africana-ekstrakter (KAL og KASB) mot testorganismene var fra 2,25 til 7,5 mg/mL, og S. hispidus-ekstrakter (SHL og SHR) var 2,5 til 10 mg / mL (Tabell 2). Med hensyn til agardiffusjonsmetoden viser alle ekstraktene (KAL, KASB, SHL og SHR) med konsentrasjoner på 20 og 50 mg / mL høyere inhiberingssoner mot testorganismene enn 10 mg/mL konsentrasjon (Tabell 3).

3.4. Antioxidantaktivitet

alle ekstraktene viste et visst nivå av antioksidantegenskaper med KASB som hadde lavest IC50 og KAL med lavest fri renseaktivitet (Tabell 4 Og Figur 5).

Figur 5

Free radical scavenging aktiviteter av metanol leaf extract (KAL) og stem bark extract (KASB) Av K. africana og leaf extract (SHL), root extract (SHR) Av S. hispidus og-tokoferol (referanse antioksidant) bestemt AV DPPH-metoden.

3.5. Sårhelingsaktivitet (Sårlukningshastighet)

alle ekstraktene (KAL, KASB, SHL og SHR) behandlede grupper viste betydelige aktiviteter på sårlukningshastigheten sammenlignet med ubehandlet og kjøretøyet alene med KAL og SHL som hadde betydelig påvirkning(og, resp.) på frekvensen av sårlukking fra 7. til 15. dag etter behandling (Figur 6 og 8, Tabell 5) og KASB og SHR viser signifikante lignende effekter på sårheling fra 10. til 18. dag etter behandling (Figur 7 og 9, Tabell 5).

3.6. Histopatologiske Studier

Histologiske studier viste rikelig proliferasjon av fibroblaster med varierende grad av fibrose. Prøvene viste 70 til 80% tett og fortykket fibrose for sårene som ble behandlet med ekstraktene, mens 1% w/w sølvsulfadiazinsalven (positiv kontroll) viste 60 til 70% fibrose. Fibroblastceller og kollagenfibre var fremtredende tilstede i referansegruppene og ekstraktene som ble behandlet sammenlignet med ubehandlet kontroll. Det var rikelig angiogenese, forbedret kollagenering og reepitelialisering, bevis på markerte behandlingsresponser blant vedvarende betennelse med sårvev behandlet med ekstraktene sammenlignet med ubehandlet sårvev (Figur 10).

(a)

(b)

(c)

(d)

(e)

(f)

(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f))

Figur 10

Histopatologisk undersøkelse av sårvev behandlet med kjøretøy, ekstrakter og ubehandlet vev. Representative bilder farget med hematoxylin og eosin flekken, Van Gieson ‘ s flekken og toluidine blå flekken behandlet daglig med 7,5% w/w kremer av metanol blad ekstrakt (KAL) Av k. africana (a), metanol stammen bark ekstrakt (KASB) Av k. africana (b), metanol blad ekstrakt (SHL) krem Av s. hispidus (c) og metanol rot ekstrakt (SHR) krem Av S. hispidus (d) og ubehandlet såret vev (e) for 14 dager. (A) kal: rikelig angiogenese, forbedret kollagenering og reepithelialisering, tydelig av markerte behandlingsresponser blant vedvarende betennelse. (b) KASB: merkbar angiogenese og dannelse av granulasjonsvev med tegn på apoptose etter vevsnekrose med mindre intens kollagenering og reepitelialisering. (c) SHL: med merkbar intens kollagenering og reepithelialisering. (d) SHR: med merkbar granulasjonsvevdannelse manifestert som vevpåfylling. Kollagenering og reepitelisering var også alvorlig sammenlignet med ubehandlet sårvev. (e) Ubehandlet sårvev med vedvarende betennelse med ufullstendig sårområdet; tegn på dårlig dannelse av granulasjonsvev, kollagenering og reepitelialisering, men kraftig angiogenese. (f) Behandlet sårvev med 1% w/w sølvsulfadiazin viste rask dannelse av granulasjonsvev, kollagenering, tydelig forbedret sårheling og ujevn keratinøs såroverflate tydelig reepithelialisering. Legend: AG: angiogenesis, CO: collagenation, DS: død plass etter nekrose, GR: granulasjonsvev etter apoptose, IC: ufullstendig sårområdet, IF: betent vev, KE: keratinøst epitel, nd: nekrotisk rusk av vedvarende betennelse. Re: realisering.

4. Diskusjon

den nåværende undersøkelsen beskriver noen av de biologiske aktivitetene, inkludert antimikrobielle og sårheling egenskaper av bladene, stammen bark og røtter ekstrakter Fra de tropiske plantene k. africana og s. hispidus. Planteprodukter er potensielle sårheling agenter, og i stor grad foretrukket på grunn av deres utbredt tilgjengelighet, mindre eller ingen bivirkninger, og effektivitet som rå preparater . Den fytokjemiske screeningen av tørkede blader og rot Av S. hispidus avslørte tilstedeværelsen av tanniner, alkaloider, saponiner, steroider, karbohydrater og sapogenetiske glykosider, og flavonoider i bladene. Alkaloider var fraværende i tørkede blader Og stamme bark Av k. africana og saponiner, steroider, karbohydrater og sapogenetiske glykosider var til stede i begge plantematerialer. Flavonoider ble også funnet I bladene Av K. africana (Tabell 1). HPLC-fingerutskriften av ekstraktene (KAL, KASB, SHL og SHR) ble også utviklet for identifikasjons-og kvalitetskontrollformål (Figur 1, 2, 3 og 4).

de fytokjemiske bestanddelene i en plante bestemmer ofte den fysiologiske virkningen på menneskekroppen. Antioksidanter er midler som beskytter celler mot skade forårsaket av molekyler kjent som frie radikaler. Antioxidantaktiviteten til ekstrakter skyldes hovedsakelig tilstedeværelsen av fenolforbindelser som flavonoider, fenolsyrer, tanniner og fenolditerpener . Derfor spiller bestanddelene av ekstraktene, som tanniner og flavonoider, en viktig rolle i sårheling ved å forhindre og beskytte oksidativ skade fra frie radikaler .

den antimikrobielle aktivitet av metanol ekstrakter Av K. africana blader og stilk bark Og S. hispidus blader og røtter ble bestemt mot fire bakterier, to Gram-positive bakterier (s. aureus og b. subtilis), to Gram-negative bakterier (E. coli og p. aeruginosa), og en sopp (c. albicans), ved hjelp av cup plate agar diffusjon metoden. Metanolekstraktene fra de to plantene var aktive mot alle de testede organismene (Tabell 2). Den minste inhibitoriske konsentrasjonen (MIC) ble bestemt som den laveste konsentrasjonen av råekstrakt hvor ingen mikrobiell vekst og Mic av KAL mot Henholdsvis s. aureus, b. subtilis, E. coli, p. aeruginosa og c. albicans var henholdsvis 5, 2,5, 5,5, 7,5 og 2,5 mg/mL, OG KASB var henholdsvis 5, 5,5, 5,25, 7,5 og 2,25 mg/mL. Shl-og SHR-ekstrakter viste også lignende antimikrobiell aktivitet, og Deres Mikrofoner var i samme område Som k. africana-ekstraktene (Tabell 2 og 3). De antibakterielle og soppdrepende aktiviteter av ekstrakter (KAL, KASB, SHL, OG SHR) var lik aktivitet utstilt ved blad ekstrakter Av kigelia pinnata (Jacq.) DC. som rapportert Av Binutu et al. . Den antimikrobielle virkningen av ekstraktene kan tilskrives astringent natur av fenoliske bestanddeler, inkludert tanniner og andre polyfenoler som er tilstede i ekstraktene .

beboelse av patogene bakterier som Stafylokokker, Streptokokker og Pseudomonas i sår kan normalt føre til infeksjon av sår som kan resultere i dannelse av kroniske sår . Fra denne studien ble det innsett At k. africana og s. hispidus-ekstraktene viste sterk og bredspektret antimikrobiell aktivitet mot disse patogenene. Siden De fleste MICs av ekstraktene mot testorganismer var under 8 mg/mL, kunne det utledes at ekstraktene viste sterk antimikrobiell aktivitet ifølge Fabry og hans kolleger . Topisk påføring av antimikrobielle midler eller ekstrakter er en effektiv behandlingsmetode for å ødelegge mikrobielle populasjoner på grunn av tilgjengeligheten av de aktive stoffene på sårstedet som fører til økt sårhelingsaktivitet .

IC50-verdiene for utdragene (KAL, KASB, SHL og SHR) var henholdsvis 1,5, 56,9, 13,7, 49,8 og 45,1 µ/mL (Tabell 4). Disse resultatene tyder på at disse ekstraktene har antioksidantegenskaper med unntak Av ekstrakter Av S. hispidus, og dette kan lette helbredelse av sår . Dette kan tyde på at den tradisjonelle bruken Av S. hispidus som sårhelende middel er kanskje ikke nødvendigvis på grunn av sin antioksidantaktivitet, men heller basert på andre biologiske effekter. IC50-verdiene av blader Og stamme bark Av K. africana var lik funn Av Gathirwa og hans kolleger .

ekstraktene (KAL, KASB, SHL og SHR) hadde betydelig innflytelse på sårlukkingshastigheten basert på de forskjellige behandlingsdagene for sårene med ekstraktene sammenlignet med ubehandlet. SHL-ekstrakt viste signifikant forbedret effekt på sårhelingsprosessen ved dag 11 () med prosentvis sårlukking på 90.13 (Figur 8) sammenlignet med ubehandlede sår. PÅVIRKNINGEN AV SHL på sårene var lik DEN FOR SHR-ekstrakt med signifikant økt sårkontraksjon på dag 11 () og sårlukking på 91,72% (Figur 9). Påvirkningen AV KASB ekstrakt (Figur 7) var lik shl og SHR ekstrakter. KAL-ekstraktet forbedret imidlertid sårkontraksjonen betydelig fra dag 7 () med sårlukking på 85,1% (Figur 6) til den 17.dagen. Histopatologisk undersøkelse av sårvevet viste kraftig angiogenese, økt kollagenering og reepitelialisering sammenlignet med ubehandlede sår (Figur 10). Disse biologiske aktivitetene av ekstraktene kan skyldes økt spredning av fibroblaster og keratinocytter og vellykket reduksjon av patogene bakterier ved ekstraktene, og disse kan tilskrives de fytokjemiske bestanddelene av ekstraktene.

effektene observert ved kun behandlet krem og de ubehandlede sårene var ikke statistisk signifikante sammenlignet med ekstraktene eller sølvsulfadiazinbehandlede sår. Dette kan også indikere at komponentene i den vandige krem ikke forstyrret aktiviteten til ekstraktene, og dermed kan de forsterkede effektene av ekstraktene bare skyldes de bioaktive prinsippene som er tilstede i disse ekstraktene. Sårhelingseffektene av ekstraktene kan skyldes de forskjellige fytokjemiske bestanddelene som er tilstede i dem. Tanniner som proanthocyanidiner og andre tanniner, inkludert garvesyre, geraniin og furosin, er kjent for å lette sårheling . Ekstraktene ble funnet å inneholde flavonoider og saponiner, og disse sekundære metabolittene har blitt funnet å forbedre sårheling, og dermed kan de forbedrede sårhelingseffektene av ekstraktene tilskrives deres fytokjemiske bestanddeler.

ovennevnte funn kan støtte påstandene om at sår behandlet med planteekstrakter leges raskere og bedre enn ubehandlede sår og bruken av disse plantene for behandling av mikrobielle infeksjoner. Imidlertid må isolering og karakterisering av bioaktive forbindelser som er ansvarlige for disse farmakologiske egenskapene, utføres.

5. Konklusjon

metanolbladet og stammen bark Av K. africana og metanolblad og rotekstrakter Av S. hispidus viste antioksidant, antimikrobielle aktiviteter med MIC-områder på henholdsvis 2,25 til 7,5 mg/mL og 2,5 til 10 mg/mL mot testorganismer, forbedrede sårheling egenskaper og disse farmakologiske egenskapene kan rettferdiggjøre medisinsk bruk av disse plantene for behandling av mikrobielle infeksjoner og sår. Bioaktivitetsstyrt fraksjonering og isolering av de bioaktive forbindelsene som er ansvarlige for de biologiske aktivitetene, vil bli utført.

Interessekonflikt

forfatterne erklærer at de ikke har noen interessekonflikt.

Takk

forfatterne ønsker å uttrykke sin takknemlighet Til Mr. Thomas Ansah Av Institutt For Farmakologi, KNUST, Kumasi, Ghana for sin tekniske assistanse Og Nana Yaw Atefah for innsamling av planter. De anerkjente Også Dr. Paul Ossei Fra Institutt For Patologi, Komfo Anokye Teaching Hospital, Kumasi, Ghana for hans bidrag til den patologiske vurderingen av sårvev.