en Knockin-mus definerer en dyremodel, hvor en gensekvens af interesse ændres ved en-til-en-substitution med en transgen eller ved at tilføje gensekvenser, der ikke findes inden for locus.
indsættelsen af et transgen sker typisk i specifikke loci. Denne” målrettede ” tilgang forårsager mindre forstyrrelser i det transkriptionsaktive genetiske miljø.
Knockin-mus er velegnede til en bred vifte af applikationer, fra undersøgelsen af regulatoriske elementer såsom promotorer til produktion af terapeutisk nyttige humaniserede antistoffer.
vores Knockin mouse model solutions
udover konventionelle Knockins, hvor en gensekvens af interesse føjes til et endogent locus, tilbyder vi et sæt almindeligt anvendte løsninger:
- hurtig Knockin Kristian (Rosa26 og Hprt)
fuld kontrol over dit genekspression ved at målrette mod de bedst studerede permissive loci Rosa26 og Hprt.
- punktmutation Knockin mus
påvirker funktionen af et givet protein (forstærkning eller tab af funktion) af et eller flere muterede nukleotider
- Reporter mus
Overvåg genetiske hændelser, proteinfunktion, lokalisering og cellehandel
- humaniserede musemodeller
erstat en musegensekvens med den menneskelige modstykke
betinget aktivering af genindsættelser eller substitutioner
alle Knockin-designs kan bære forhold, der gør det muligt at aktivere din genindsættelse eller substitution: A) i specifikke celletyper i et bestemt væv, mens andre celletyper og væv udviser en umodificeret, funktionel genekspression, og/eller B) midlertidigt på et givet tidspunkt hos embryonale, postnatale eller voksne dyr.
to almindelige tilgange anvendes typisk:
Loc-STOP-Loc
Cre-rekombinasen genkender loci for rekombination loc, der forårsager en sletning af STOPSEKVENSEN mellem de to loc-steder, hvilket tillader transkription af dit mutationsgen af interesse.
fleks
både loks og loks511 genkendes af Cre-rekombinase, men loks511-lokaliteter kan kun rekombineres med andre loks511-lokaliteter, ikke med loks.
når DNA-sekvensen flankeres af lokaliteter i modsatte retninger, vil Cre invertere sekvensen mellem lokaliteterne. Hvis DNA-sekvensen er flankeret af lokaliteter i samme retning, CRE vil punge sekvensen.
ved at kombinere type lokaliteter, antal og orientering af lokaliteter, der omgiver dine gener af interesse, kan der oprettes et kraftfuldt Bøjningsværktøj til dine specifikke videnskabelige behov.
hvad angår fremgangsmåden, fører ekspression af Cre-rekombinasen i en specifik celletype eller væv til en vævsspecifik muteret genekspression, og ved anvendelse af en induceraktiveret Cre-rekombinase fører til en midlertidigt muteret genekspression i nærvær af en inducer, f.eks.
