Une souris Knockin définit un modèle animal dans lequel une séquence de gènes d’intérêt est modifiée par substitution un pour un avec un transgène, ou en ajoutant des séquences de gènes qui ne se trouvent pas dans le locus.
L’insertion d’un transgène se fait généralement dans des loci spécifiques. Cette approche « ciblée » provoque moins de perturbations de l’environnement génétique actif dans la transcription.
Les souris Knockin sont adaptées à un large éventail d’applications, de l’étude d’éléments régulateurs tels que les promoteurs à la production d’anticorps humanisés thérapeutiquement utiles.
Nos solutions de modèles de souris Knockin
Outre les Knockins classiques où une séquence de gènes d’intérêt est ajoutée à un locus endogène, nous proposons un ensemble de solutions couramment utilisées:
- Quick Knockin™ (Rosa26 et Hprt)
Contrôle total de l’expression de vos gènes en ciblant les loci permissifs Rosa26 et Hprt les mieux étudiés.
- La mutation ponctuelle de la souris de Knockin
Affecte la fonction d’une protéine donnée (gain ou perte de fonction) par un ou plusieurs nucléotides mutés
- Souris rapporteuse
Surveiller les événements génétiques, la fonction protéique, la localisation et le trafic cellulaire
- Modèles de souris humanisés
Substituer une séquence de gènes de souris à l’homologue humain
Activation conditionnelle d’insertions ou de substitutions de gènes
Tous les modèles de Knockin peuvent supporter des conditions permettant d’activer l’insertion ou la substitution de gènes: A) dans des types cellulaires spécifiques dans un certain tissu tandis que d’autres types cellulaires et tissus présentent une expression génique fonctionnelle non modifiée, et / ou B) temporellement à un moment donné chez des animaux embryonnaires, postnataux ou adultes.
Deux approches communes sont typiquement utilisées :
lox-STOP-lox
La recombinase Cre reconnaît les loci de recombinaison loxP qui provoque une délétion de la séquence STOP entre les deux sites loxP, permettant la transcription de votre gène de mutation d’intérêt.
FLEx
loxP et lox511 sont toutes deux reconnues par la recombinase Cre, mais les sites lox511 ne peuvent se recombiner qu’avec d’autres sites lox511, pas avec les sites loxP.
Lorsque la séquence d’ADN est flanquée de sites lox dans des orientations opposées, le Cre inversera la séquence entre les sites. Si la séquence d’ADN est flanquée de sites lox dans la même orientation, le Cre excise la séquence.
En combinant le type de sites lox, le nombre et l’orientation des sites lox qui entourent vos gènes d’intérêt, un outil flexible puissant peut être créé pour vos besoins scientifiques spécifiques.
En ce qui concerne l’approche lox-STOP-lox, l’expression de la recombinase Cre dans un type cellulaire ou un tissu spécifique conduit à une expression génique mutée spécifique au tissu, et l’utilisation d’une recombinase Cre activée par un inducteur conduit à une expression génique mutée temporellement en présence d’un inducteur tel que le tamoxifène.
