een Knockin-muis definieert een diermodel waarin een genetische sequentie van belang wordt veranderd door één-op-één substitutie met een transgen, of door gensequenties toe te voegen die niet binnen de locus worden gevonden.
het inbrengen van een transgeen gebeurt meestal in specifieke loci. Deze “gerichte” benadering veroorzaakt minder verstoringen van het transcriptie-actieve genetische milieu. Knockin muizen zijn geschikt voor een breed scala van toepassingen, van de studie van regulerende elementen zoals promotoren tot de productie van therapeutisch bruikbare gehumaniseerde antilichamen.
onze Knockin mouse model solutions
naast conventionele Knockins waar een gensequentie van belang wordt toegevoegd aan een endogene locus, bieden we een set van veelgebruikte oplossingen:
- Quick Knockin™ (Rosa26 en Hprt)
volledige controle van uw genexpressie door zich te richten op de best bestudeerde tolerante loci Rosa26 en Hprt.
- Punt mutatie Knockin muis
Invloed op de functie van een bepaald eiwit (winst of het verlies van de functie door één of meer gemuteerd nucleotiden
- Verslaggever muis
Monitor genetische gebeurtenissen, eiwit functie, lokalisatie en cel mensenhandel
- Vermenselijkt muis-modellen
Vervangen door een muis gen sequentie met de menselijke tegenhanger
Voorwaardelijke activering van gen inserties of vervangingen
Alle Knockin ontwerpen kunnen dragen voorwaarden die het mogelijk maken uw gen insertie of vervanging worden geactiveerd: A) in specifieke celtypen in een bepaald weefsel, terwijl andere celtypen en weefsels een ongewijzigde, functionele genexpressie vertonen, en/of B) tijdelijk op een bepaald tijdstip bij embryonale, postnatale of volwassen dieren.
twee gemeenschappelijke benaderingen worden gewoonlijk gebruikt:
lox-STOP-lox
de CRE recombinase herkent de loci van recombinatie loxP die een deletie van de STOPSEQUENTIE tussen de twee loxp-plaatsen veroorzaakt, waardoor de transcriptie van uw mutatiegen van belang mogelijk is.
FLEx
zowel loxP als lox511 worden herkend door cre recombinase, maar lox511-sites kunnen alleen recombineren met andere lox511-sites, niet met loxP-sites.
wanneer de DNA-sequentie wordt geflankeerd door lox-sites in tegengestelde oriëntaties, zal de Cre de sequentie tussen de sites omkeren. Als de DNA-sequentie wordt geflankeerd door lox-sites in dezelfde richting, zal de Cre de sequentie uitsnijden.
door het combineren van type lox-sites, aantal en oriëntatie van lox-sites die uw genen van belang omringen, kan een krachtige FLEx-tool worden gemaakt voor uw specifieke wetenschappelijke behoeften.
bij de lox-STOP-lox-benadering leidt het uitdrukken van de CRE-recombinase in een specifiek celtype of weefsel tot een weefselspecifieke gemuteerde genexpressie, en het gebruik van een inductor-geactiveerde cre-recombinase leidt tot een tijdelijk gemuteerde genexpressie in aanwezigheid van een inductor zoals tamoxifen.
