un șoarece Knockin definește un model animal în care o secvență genică de interes este modificată prin substituție unu-la-unu cu o transgenă sau prin adăugarea de secvențe genetice care nu se găsesc în locus.
inserarea unei transgene se face de obicei în loci specifici. Această abordare” țintită ” provoacă mai puține tulburări ale mediului genetic activ de transcripție.
șoarecii Knockin sunt potriviți pentru o gamă largă de aplicații, de la studiul elementelor de reglementare, cum ar fi promotorii, până la producerea de anticorpi umanizați terapeutici utili.
soluțiile noastre model de șoarece Knockin
în afară de Knockins convenționale în care o secvență genică de interes este adăugată la un locus endogen, oferim un set de soluții utilizate în mod obișnuit:
- Quick Knockin (Rosa26 și Hprt)
controlul complet al expresiei genelor prin direcționarea celor mai bine studiate loci permisive Rosa26 și Hprt.
- mutația punctului mouse-ul Knocin
afectează funcția unei proteine date (câștig sau pierdere de funcție) de una sau mai multe nucleotide mutante
- Reporter mouse
Monitorizați evenimentele genetice, funcția proteinelor, localizarea și traficul de celule
- modelele de șoarece umanizate
înlocuiesc o secvență de gene de șoarece cu omologul uman
activarea condiționată a inserțiilor sau substituțiilor genetice
toate modelele Knockin pot suporta condiții care permit activarea inserției sau substituției genei: A) în tipuri de celule specifice într-un anumit țesut, în timp ce alte tipuri de celule și țesuturi prezintă o expresie genetică funcțională nemodificată și/sau B) temporal la un moment dat la animalele embrionare, postnatale sau adulte.
se folosesc de obicei două abordări comune:
lox-STOP-lox
recombinaza Cre recunoaște locii loxp de recombinare care determină o ștergere a secvenței de oprire între cele două site-uri loxP, permițând transcrierea genei dvs. de mutație de interes.
FLEx
ambele loxP și Lox511 sunt recunoscute de recombinaza Cre, dar site-urile lox511 se pot recombina numai cu alte site-uri lox511, nu cu site-uri loxp.
când secvența ADN este flancată de site-uri lox în orientări opuse, Cre va inversa secvența dintre site-uri. Dacă secvența ADN este flancată de site-uri lox în aceeași orientare, Cre va acciza secvența.
prin combinarea tipului de site-uri lox, numărul și orientarea site-urilor lox care înconjoară genele dvs. de interes, poate fi creat un instrument FLEx puternic pentru nevoile dvs. științifice specifice.
în ceea ce privește abordarea lox-STOP-lox, exprimarea recombinazei Cre într-un anumit tip de celulă sau țesut duce la o expresie genetică mutantă specifică țesutului și utilizarea unei recombinaze Cre activate de inductor duce la o expresie genetică mutantă temporală în prezența unui inductor precum tamoxifen.
