Un Knockin mouse definisce un modello animale in cui una sequenza genica di interesse viene alterata dalla sostituzione uno per uno con un transgene, o aggiungendo sequenze geniche che non si trovano all’interno del locus.
L’inserimento di un transgene è tipicamente fatto in loci specifici. Questo approccio “mirato” causa meno disturbi dell’ambiente genetico attivo della trascrizione.
I topi Knockin sono adatti a una vasta gamma di applicazioni, dallo studio di elementi regolatori come i promotori alla produzione di anticorpi umanizzati terapeuticamente utili.
Il nostro Knockin mouse model solutions
Oltre Knockins convenzionali in cui una sequenza genica di interesse viene aggiunto ad un locus endogeno, offriamo una serie di soluzioni di uso comune:
- Rapido Knockin™ (Rosa26 e Hprt)
Pieno controllo della vostra espressione genica prendendo di mira il meglio studiato permissivo loci Rosa26 e Hprt.
- Punto di mutazione del mouse Knockin
Influenzare la funzione di una data proteina (guadagno o la perdita di funzione) da uno o più mutato nucleotidi
- Reporter mouse
Monitor eventi genetici, la funzione della proteina, la localizzazione e traffico di cellule
- Umanizzato modelli di mouse
Sostituire un mouse di sequenza del gene con la controparte umana
attivazione Condizionale del gene inserimenti o sostituzioni
Tutti Knockin disegni possono sopportare condizioni che consentano l’inserimento del gene o di sostituzione per essere attivato: A) in specifici tipi di cellule in un determinato tessuto mentre altri tipi di cellule e tessuti presentano un’espressione genica funzionale non modificata e/o B) temporalmente in un dato momento in animali embrionali, post-natali o adulti.
Vengono tipicamente utilizzati due approcci comuni:
lox-STOP-lox
La ricombinasi Cre riconosce i loci di ricombinazione loxP che causano una cancellazione della sequenza di STOP tra i due siti loxP, consentendo la trascrizione del gene di mutazione di interesse.
FLEx
Sia loxP che lox511 sono riconosciuti da Cre recombinase ma i siti lox511 possono ricombinarsi solo con altri siti lox511, non con i siti loxP.
Quando la sequenza di DNA è affiancata da siti lox in orientamenti opposti, il Cre invertirà la sequenza tra i siti. Se la sequenza di DNA è affiancata da siti lox nello stesso orientamento, il Cre aspetterà la sequenza.
Combinando il tipo di siti lox, il numero e l’orientamento dei siti lox che circondano i tuoi geni di interesse, è possibile creare un potente strumento FLEx per le tue specifiche esigenze scientifiche.
Per quanto riguarda l’approccio lox-STOP-lox, esprimere la Cre ricombinasi in uno specifico tipo di cellula o tessuto porta ad un’espressione genica mutata specifica del tessuto e l’utilizzo di una ricombinasi Cre attivata dall’induttore porta ad un’espressione genica temporalmente mutata in presenza di un induttore come il tamoxifene.
