mysz Knockin definiuje model zwierzęcy, w którym sekwencja genów jest zmieniana przez substytucję jeden na jeden transgenem lub przez dodanie sekwencji genów, które nie znajdują się w locus.
wstawianie transgenu odbywa się zazwyczaj w określonych loci. To” ukierunkowane ” podejście powoduje mniej zakłóceń środowiska genetycznego aktywnego transkrypcyjnie.
myszy Knockin nadają się do szerokiego zakresu zastosowań, od badania elementów regulacyjnych, takich jak promotorzy, do produkcji użytecznych terapeutycznie humanizowanych przeciwciał.
nasze rozwiązania modelu myszy Knockin
oprócz konwencjonalnych Knockinów, w których Sekwencja genów jest dodawana do endogennego locus, oferujemy zestaw powszechnie stosowanych rozwiązań:
- Quick Knockin™ (Rosa26 i Hprt)
Pełna kontrola ekspresji genów poprzez ukierunkowanie najlepiej przebadanych permisywnych loci Rosa26 i Hprt.
- mutacja punktowa myszy
wpływa na funkcję danego białka (wzmocnienie lub utrata funkcji) przez jeden lub więcej zmutowanych nukleotydów
- Mysz Reporterska
monitoruje zdarzenia genetyczne, funkcje białek, lokalizację i handel komórkami
- humanizowane modele myszy
Zastąp sekwencję genów myszy ludzkim odpowiednikiem
warunkowa aktywacja insercji lub substytucji genów
wszystkie projekty Knockin mogą znosić warunki, które pozwalają na aktywację insercji lub substytucji genów: A) w określonych typach komórek w określonej tkance, podczas gdy inne typy komórek i tkanki wykazują niezmodyfikowaną, funkcjonalną ekspresję genów i/lub B) tymczasowo w danym punkcie czasowym u zwierząt embrionalnych, poporodowych lub dorosłych.
zwykle stosuje się dwa wspólne podejścia:
lox-STOP-lox
rekombinaza Cre rozpoznaje loci rekombinacji loxP, która powoduje delecję sekwencji STOP pomiędzy dwoma miejscami loxP, umożliwiając transkrypcję interesującego genu mutacji.
FLEx
zarówno loxP, jak i lox511 są rozpoznawane przez rekombinazę Cre, ale miejsca lox511 mogą rekombinować tylko z innymi miejscami lox511, nie z miejscami loxP.
gdy sekwencja DNA jest flankowana przez miejsca lox w przeciwnych kierunkach, Cre odwróci sekwencję między miejscami. Jeśli sekwencja DNA jest flankowana przez miejsca lox w tej samej orientacji, Cre będzie akcyzy sekwencji.
łącząc rodzaj witryn lox, liczbę i orientację witryn lox, które otaczają interesujące Cię geny, można stworzyć potężne narzędzie FLEx dla konkretnych potrzeb naukowych.
jeśli chodzi o podejście lox-STOP-lox, ekspresja rekombinazy Cre w określonym typie komórki lub tkance prowadzi do swoistej dla tkanki mutowanej ekspresji genu, a zastosowanie aktywowanej induktorem rekombinazy Cre prowadzi do czasowo zmutowanej ekspresji genu w obecności induktora, takiego jak tamoksyfen.
